【摘要】：黃芪補(bǔ)氣湯出自秦伯未所著的《中醫(yī)臨證備要》,屬于補(bǔ)益類方劑,主要用于因沖任虛損,氣血虛弱不能攝胎且伴有畏寒腹痛的小產(chǎn)患者。本實(shí)驗(yàn)室前期采用秀麗隱桿線蟲感染模型研究表明,黃芪補(bǔ)氣湯可以通過提高線蟲宿主的免疫力來達(dá)到抗感染的效果。基于上述研究,本實(shí)驗(yàn)以黃芪、當(dāng)歸、肉桂配比為10:5:3的質(zhì)量比,采用水提法制備了黃芪補(bǔ)氣湯提取物;并根據(jù)《中華人民共和國藥典(2015版)》有關(guān)藥材標(biāo)志性成分的測(cè)定方法,測(cè)定了提取物中阿魏酸和總黃酮的含量,為提取物的質(zhì)量穩(wěn)定性和可控性提供了參考;同時(shí)按照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范(2003版)》關(guān)于增強(qiáng)免疫力的檢測(cè)項(xiàng)目,以健康雌性昆明小鼠作為研究對(duì)象,處理組按照生藥量1.5、3、9 g/kg體重三個(gè)劑量灌胃給藥,并設(shè)置空白對(duì)照組(蒸餾水)和陽性藥組(胸腺法新),連續(xù)給藥30天,分別測(cè)定了臟器/體重比值、細(xì)胞免疫功能、體液免疫功能、單核巨噬-細(xì)胞功能、NK細(xì)胞活性。另外,采用健康昆明小鼠進(jìn)行了急性毒性試驗(yàn)。最后,采用MTT法研究了黃芪補(bǔ)氣湯提取物對(duì)幾種不同類型腫瘤細(xì)胞的生長抑制作用。得到的結(jié)論如下:1、黃芪補(bǔ)氣湯提取物的制備工藝為:采用水提法煎煮兩次,第一次加8倍量的蒸餾水,煎煮45 min;第二次加6倍量的蒸餾水,煎煮30 min。2、黃芪補(bǔ)氣湯提取物選擇阿魏酸和總黃酮作為標(biāo)志性成分進(jìn)行質(zhì)量控制,分別采用高效液相法和紫外分光光度法進(jìn)行含量測(cè)定,測(cè)得阿魏酸含量為167μg/g浸膏,總黃酮含量為6.18 mg/g浸膏。3、按照提取物浸膏最大溶解濃度1.02 g/mL,0.4 mL/10 g體重灌胃,結(jié)果表明,黃芪補(bǔ)氣湯提取物的小鼠口服最大耐受量(MTD)大于40.8 g/kg,遠(yuǎn)大于保健食品規(guī)范毒理學(xué)結(jié)果的判定中要求的大于或等于10 g/kg。4、黃芪補(bǔ)氣湯提取物具有促進(jìn)小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)、提高單核-巨噬細(xì)胞吞噬能力以及NK細(xì)胞活性的功效,而對(duì)ConA誘導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化反應(yīng)、血清溶血素水平無作用,根據(jù)《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范(2003版)》有關(guān)增強(qiáng)免疫力功能的結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn),黃芪補(bǔ)氣湯提取物具有增強(qiáng)免疫力的保健功能。5、黃芪補(bǔ)氣湯提取物對(duì)肺癌細(xì)胞、大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤細(xì)胞、黑色素瘤細(xì)胞、肝癌細(xì)胞(A549、PC12、B16、HepG2)均具有抑制作用,其抑制作用呈時(shí)間和劑量依賴性。
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

圖 2.4 阿魏酸標(biāo)準(zhǔn)曲線Figure2.4 The standard curve of ferulic acid度實(shí)驗(yàn)品溶液在色譜條件下連續(xù)進(jìn)樣 5 次，測(cè)定峰面積，結(jié)果峰面積的 R器精密度良好。表 2.2 精密度實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果Table2.2 The result of precision experiment樣次數(shù) 峰面積 平均值 RSD（%1 1614640815973322 0.6272 159251953 159125044 159089765 15973526

圖 2.5 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線Figure2.5 The standard curve of rutir密度實(shí)驗(yàn)定 6 份同一蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品溶液，測(cè)定 OD 值，結(jié)果吸光值的 RSD 為 1度良好。表 2.7 精密度實(shí)驗(yàn)測(cè)定結(jié)果Table2.7 The result of precision experiment準(zhǔn)品序號(hào) OD 值 平均值 RSD（%1 0.2800.291 1.982 0.2963 0.2904 0.294

論文 黃芪補(bǔ)氣湯提取物的免疫活性析時(shí)，先按照程序進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，符合方差齊性的，計(jì)算間無顯著性差異；若 F≥F0.05，P≤0.05，用各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)方差齊性或者非正態(tài)的數(shù)據(jù)，需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)霓D(zhuǎn)換，滿足行統(tǒng)計(jì)；對(duì)于轉(zhuǎn)換后仍不符合要求的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行試驗(yàn)示，給藥后小鼠體重正常增長，各組間無顯著性差異（P<便正常、毛色正常，無震顫、抽搐、急躁等癥狀，無死亡的小鼠口服最大耐受量（MTD）大于 40.8 g/kg，遠(yuǎn)大于保要求的大于或等于 10 g/kg。

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本文編號(hào)：2799561