【摘要】：[目的]目前腦卒中仍是導(dǎo)致長(zhǎng)期殘疾的主要原因,至今尚無(wú)特效的治療藥物。人參皂苷Rb1是目前發(fā)現(xiàn)能有效治療腦血管疾病的三七中重要的活性成分。大腦皮層是支配軀體感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)的重要結(jié)構(gòu),對(duì)許多化學(xué)損害較為敏感尤其是缺血。通過(guò)研究人參皂苷Rb1對(duì)大鼠局造性腦缺血腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子及其前體腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的影響及可能的機(jī)制,探求人參皂苷Rb1對(duì)腦缺血的保護(hù)作用機(jī)制。[方法]將48只SD雄性大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、人參皂苷組(100mg/kg)和尼莫地平組(1mg/kg),每組12只,每組又分為3天,7天,14天三個(gè)亞組。采用光化學(xué)誘導(dǎo)大鼠局灶性腦缺血的方法建立腦缺血模型,術(shù)后當(dāng)日開(kāi)始給藥,2次/日,各假手術(shù)組和模型組術(shù)后4 h腹腔注射等量生理鹽水。于術(shù)前、術(shù)后(當(dāng)日,3 天、7 天、14 天)根據(jù) corner test,adhesive tape-removal test和改良神經(jīng)功能缺損評(píng)分(mNSS)檢測(cè)神經(jīng)功能缺損評(píng)分,樣本給藥3,7,14天后取腦組織,用western blotting和免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)皮層的TrkB、sortilin,tPA,PAI-1和p75NTR的表達(dá)變化,ELISA檢測(cè)mBDNF和proBDNF的濃度變化。[結(jié)果]行為學(xué)檢測(cè)結(jié)果:腦缺血后大鼠出現(xiàn)不同程度感覺(jué)運(yùn)動(dòng)障礙,通過(guò)Corner test,Adhesive tape removal test和mNSS對(duì)大鼠進(jìn)行神經(jīng)缺損評(píng)估。研究發(fā)現(xiàn),與模型組相比,人參皂苷Rb1組和尼莫地平組大鼠的感覺(jué)運(yùn)動(dòng)障礙均顯著改善(P0.05)。①Corner test:與假手術(shù)組比較,模型組偏好向右側(cè)轉(zhuǎn)身(P0.01);與模型組比較,人參皂苷Rb1組和尼莫地平組向右轉(zhuǎn)身次數(shù)減少(P0.05),并且隨用藥時(shí)間延長(zhǎng),呈現(xiàn)出時(shí)間依賴性。②Adhesive tape removal test:與假手術(shù)組比較,模型組大鼠接觸膠帶時(shí)間和撕除膠帶時(shí)間均延長(zhǎng)(P0.05);與模型組比較,人參皂苷Rbl組和尼莫地平組接觸膠帶和撕除膠帶時(shí)間縮短(P0.05),尤其7天和14天時(shí)明顯縮短(P0.05)。③mNSS:假手術(shù)組未見(jiàn)神經(jīng)功能缺損(評(píng)分均為0);模型組mNSS評(píng)分高于假手術(shù)組(P0.01);與模型組相比,人參皂苷Rb1組和尼莫地平組神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分降低(P0.05);與3天組比較,7天組和14天組神經(jīng)功能缺損評(píng)分降低但無(wú)顯著差異(P0.05)。Western blotting檢測(cè)結(jié)果可見(jiàn):①與假手術(shù)組相比,模型組TrkB,sortilin,P75NTR,tPA和PAI-1蛋白表達(dá)明顯增加(P0.05);②與模型組相比,人參皂苷Rb1和尼莫地平治療明顯降低sortilin、P75NTR和PAI-1蛋白表達(dá)(P0.P5),尤其以給藥14天降低顯著(P0.05);③與模型組相比,人參皂苷Rb1和尼莫地平治療使TrkB和tPA表達(dá)顯著上調(diào)(P0.05),且呈現(xiàn)時(shí)間依賴性,尤其以用藥14天增加顯著(P0.05)④人參皂苷Rb1和尼莫地平組間比較無(wú)顯著差異(P0.05)。免疫組織化學(xué)法檢測(cè)結(jié)果可見(jiàn):①假手術(shù)組幾乎未見(jiàn)P75陽(yáng)性表達(dá);腦缺血后3天、7天、14天均可見(jiàn)胞漿和胞膜內(nèi)大量P75陽(yáng)性表達(dá)(P0.05),隨時(shí)間延長(zhǎng)表達(dá)稍有下降,光密度值升高(P0.05),光密度值隨時(shí)間延長(zhǎng)稍有下降;給予人參皂苷Rb1和尼莫地平治療3天、7天、14天均可減少P75陽(yáng)性表達(dá)(P0.05),且呈現(xiàn)時(shí)間依賴性;人參皂苷Rb1和尼莫地平組各時(shí)間點(diǎn)比較無(wú)顯著差異(P0.05)。②假手術(shù)組可見(jiàn)少量sortilin陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞;與假手術(shù)組比較,缺血模型組出現(xiàn)大量胞漿著色的陽(yáng)性細(xì)胞(P0.05),光密度值明顯升高(P0.05);PNS-Rb1和尼莫地平治療組在3天、7天、14天均見(jiàn)sortilin陽(yáng)性表達(dá)明顯減少(P0.05),且呈現(xiàn)時(shí)間依賴性,用藥14天時(shí)sortilin陽(yáng)性表達(dá)下降明顯,光密度值隨時(shí)間延長(zhǎng)下降明顯(P0.05)。人參皂苷Rb1和尼莫地平組比較無(wú)顯著差異(P0.05)。③假手術(shù)組胞漿和胞膜區(qū)可見(jiàn)少量TrkB陽(yáng)性表達(dá),模型組胞漿著色的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目增加(P0.05),陽(yáng)性表達(dá)的光密度值升高(P0.05);人參皂苷Rb1和尼莫地平治療組在3天、7天、14天均見(jiàn)TrkB陽(yáng)性表達(dá)明顯增加(P0.05),且呈現(xiàn)時(shí)間依賴性,光密度值升高(P0.05)。人參皂苷Rb1和尼莫地平組各時(shí)間點(diǎn)比較無(wú)顯著差異(P0.05)。Elisa結(jié)果可見(jiàn):與假手術(shù)組比較,模型組mBDNF/proBDNF表達(dá)水平均升高(P0.05);與模型組比較,人參皂苷Rb1和尼莫地平組mBDNF表達(dá)水平進(jìn)一步升高(P0.05),而proBDNF表達(dá)水平下降(P0.05),且呈現(xiàn)時(shí)間依賴性。與3天組比較,人參皂苷Rb1和尼莫地平14天組BDNF/proBDNF表達(dá)水平差異顯著(P0.05)。[結(jié)論]人參皂苷Rb1能顯著改善缺血性卒中引起的感覺(jué)運(yùn)動(dòng)功能障礙,且時(shí)間依賴性的增加BDNF,TrkB以及其加工酶(組織纖溶酶原激活劑,TPA)的表達(dá),同時(shí),減少proBDNF,p75NTR,sortilin以及Ⅰ型纖溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)的表達(dá),最終介導(dǎo)神經(jīng)元的保護(hù)作用。因此,人參皂苷Rb1可能是通過(guò)激活BDNF/TrkB信號(hào)通路和抑制proBDNF/sortilin/p75NTR信號(hào)通路改善腦缺血感覺(jué)運(yùn)動(dòng)障礙。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

動(dòng)障礙的作用，通過(guò)Ｃｏｍｅｒ邋ｔｅｓｔ，Ａｄｈｅｓｉｖｅ邋ｔａｐｅ邋ｒｅｍｏｖａｌ邋ｔｅｓｔ和ｍＮＳＳ對(duì)大鼠進(jìn)行逡逑評(píng)估。研究發(fā)現(xiàn)與模型組相比，ＰＮＳ－Ｒｂｌ組和尼莫地平組大鼠的感覺(jué)運(yùn)動(dòng)障礙均逡逑顯著改善（圖１，尸＜０．０５）。逡逑ｌ．ｌＣｏｒｎｅｒｔｅｓｔ：與假手術(shù)組比較，模型組偏好向右側(cè)轉(zhuǎn)身（圖１Ａ－Ｃ，Ｐ＜０．０１）；逡逑與模型組比較，ＰＮＳ－Ｒｂｌ組和尼莫地平組向右轉(zhuǎn)身次數(shù)減少（圖１Ａ－Ｃ，Ｐ＜ａ0５），逡逑并且隨用藥時(shí)間延長(zhǎng)，呈現(xiàn)出時(shí)間依賴性。逡逑１．２邐Ａｄｈｅｓｉｖｅ邋ｔａｐｅ邋ｒｅｍｏｖａｌ邋ｔｅｓｔ：與假手術(shù)組比較，模型組大鼠接觸膠帶時(shí)間和撕逡逑除膠帶時(shí)間均延長(zhǎng)（圖１Ｄ－Ｅ，與模型組比較，ＰＮＳ－Ｒｂｌ組和尼莫地平逡逑組接觸膠帶和撕除膠帶時(shí)間縮短（圖１Ｄ－Ｅ，Ｐ＜０．０５），尤其７天和１４天時(shí)明顯逡逑縮短（圖１Ｄ－Ｅ，尸＜ａｏ？）。逡逑１．３邐ｍＮＳＳ：假手術(shù)組未見(jiàn)神經(jīng)功能缺損（評(píng)分均為０）；模型組ｒｎＮＳＳ評(píng)分高于逡逑假手術(shù)組（圖ＩＦ

影響逡逑與假手術(shù)組相比，模型組ＴｒｋＢ，邋ｓｏｒｔｉｌｉｎ，邋Ｐ７５ＮＴＲ，ｔ－ＰＡ和ＰＡＩ－１蛋白表達(dá)逡逑明顯增加（圖２，邋Ｐ＜ａ0５）；與模型組相比，ＰＮＳ－Ｒｂｌ和尼莫地平治療明顯降低逡逑ｓｏｒｔｉｌｉｎ，Ｐ７５ＮＴＲ邋和邋ＰＡＩ－１邋蛋白表達(dá)（圖邋２Ａ－Ｄ；邋Ｉ－Ｊ，戶＜０．０５），尤其以給藥邋１４逡逑天降低顯著（Ｐ＜ａ0５）。與模型組相比，ＰＮＳ－Ｒｂｌ和尼莫地平治療使ＴｒｋＢ和ｔＰＡ逡逑表達(dá)顯著上調(diào)（圖２Ｅ－Ｆ；邋Ｇ－Ｈ，Ｐ＜ｆｔ０５），且呈現(xiàn)時(shí)間依賴性，尤其以用藥１４天逡逑增加顯著（Ｐ＜ｆｔ０５）；邋ＰＮＳ－Ｒｂｌ和尼莫地平組間比較無(wú)顯著差異（Ｐ＞０．０５）。逡逑２４逡逑

４邋ＴｒｋＢ，邋Ｐ７５和Ｓｏｒｔｉｌｉｉｉ的免疫組織化學(xué)檢測(cè)逡逑４．１ＰＮＳ－Ｒｂｌ對(duì)腦缺血大鼠Ｐ７５ＮＴＲ表達(dá)的影響逡逑圖３顯示，假手術(shù)組幾乎未見(jiàn)Ｐ７５陽(yáng)性表達(dá)（圖３Ａ）；腦缺血后３天、７天、逡逑１４天均可見(jiàn)胞漿和胞膜內(nèi)大量Ｐ７５陽(yáng)性表達(dá)（圖３Ａ，Ｐ＜ｆｔ０５），隨時(shí)間延長(zhǎng)表逡逑達(dá)稍有下降，Ｐ７５光密度值升高（圖３Ｂ，邋Ｐ＜０．０５），隨時(shí)間延長(zhǎng)稍有下降；給予逡逑ＰＮＳ－Ｒｂｌ和尼莫地平治療３天、７天、１４天均可減少Ｐ７５陽(yáng)性表達(dá)（圖３Ａ，Ｐ＜０．０５），逡逑且呈現(xiàn)時(shí)間依賴性；ＰＮＳ－Ｒｂｌ和尼莫地平組各時(shí)間點(diǎn)比較無(wú)顯著差異（圖３，逡逑２６逡逑

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 武彩霞;李梅;杜冠華;;腦缺血再灌注損傷的病理機(jī)制研究進(jìn)展[J];山東醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校學(xué)報(bào);2015年02期

2 陳甲;矯樹(shù)生;梁春榮;王延江;許志強(qiáng);;腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子前體對(duì)小鼠海馬神經(jīng)元存活和突起生長(zhǎng)的抑制作用[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2014年09期

3 童華;周雷;劉建平;高麗;沈納;黃新生;;前體腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抑制大鼠螺旋神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元的存活和神經(jīng)突再生[J];生理學(xué)報(bào);2014年02期

4 朱會(huì)超;國(guó)晶晶;任煜;;三七總皂苷藥理研究進(jìn)展[J];河南中醫(yī);2014年03期

5 關(guān)健;戴建武;佟偉民;杜世偉;王任直;;腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子對(duì)腦梗死大鼠神經(jīng)細(xì)胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的影響[J];中國(guó)微侵襲神經(jīng)外科雜志;2012年11期

6 劉娟;裘瑩;何晶;文蕾;管曉菲;袁瓊蘭;;人參皂苷Rb1和Rg1對(duì)海馬神經(jīng)元的影響[J];同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2011年03期

7 鐘森;陳文超;徐永強(qiáng);黃永章;楊建業(yè);張曉燕;;三七總皂苷對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠神經(jīng)干細(xì)胞相關(guān)調(diào)節(jié)因子及腦細(xì)胞凋亡的影響[J];中國(guó)中醫(yī)急癥;2010年02期

8 魯瑤;彭娜;路志紅;桑韓飛;楊謙梓;熊利澤;;人參皂甙-Rd預(yù)先給藥對(duì)大鼠腦的保護(hù)作用[J];中華神經(jīng)外科疾病研究雜志;2009年06期

9 張永全;莫國(guó)煥;陳明;曾祥發(fā);陸暉;;三七總皂苷對(duì)腦缺血再灌注大鼠BDNF表達(dá)的影響[J];中成藥;2008年07期

10 李花;鄧常青;熊艾君;陳北陽(yáng);;三七總皂苷對(duì)大鼠腦缺血再灌注后腦內(nèi)NGF和bFGF表達(dá)的影響[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2008年02期

本文編號(hào)：2795105