發(fā)布時(shí)間：2020-08-15 08:02

【摘要】：蝙蝠蛾擬青霉菌性溫,味甘,入肺,腎經(jīng),有補(bǔ)益肺腎,秘精益氣的功效。蝙蝠蛾擬青霉菌(Paecilomyces hepiali ChenDai)是子囊菌門(Ascomycota),散囊菌綱(Eurotiomycetes),散囊菌目(Eurotiales),叢梗孢科(Moniliaceae)擬青霉菌(Paecilomyces Bain),是從冬蟲夏草中分離得到的無性世代菌株,其與天然冬蟲夏草具有相似的化學(xué)和營(yíng)養(yǎng)成分及藥理作用。目前蝙蝠蛾擬青霉菌工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)出的菌絲體發(fā)酵產(chǎn)品已獲得國(guó)家新藥證書,并列入《中國(guó)藥典》。本文對(duì)制備蝙蝠蛾擬青霉菌培養(yǎng)基的原材料大豆進(jìn)行宏觀和顯微的鑒定,大豆質(zhì)地堅(jiān)硬飽滿,不同大豆品種在豆臍顏色、粒徑、百粒重等宏觀形態(tài)上存在差別。大豆籽粒分為種皮和子葉兩個(gè)部分,種皮由表皮層、柵欄層、滴漏層、薄壁層、下皮層5個(gè)組成部分,大豆子葉占據(jù)籽粒大部分體積,由類圓形薄壁細(xì)胞自內(nèi)向外由小到大構(gòu)成。不同品種大豆之間營(yíng)養(yǎng)成分含量存在顯著差異,粗蛋白含量最高是吉農(nóng)33號(hào),其次是吉農(nóng)36號(hào)、吉農(nóng)48號(hào);粗脂肪含量最高是江西655號(hào),其次是江西1978號(hào)、江西686號(hào);鈣含量最高是吉農(nóng)18號(hào),其次是吉農(nóng)51號(hào)、吉農(nóng)29號(hào);鎂含量最高是吉農(nóng)33號(hào),其次是江西655號(hào)、吉農(nóng)48號(hào);銅含量最高是吉農(nóng)48號(hào),其次是吉農(nóng)71號(hào)、吉農(nóng)45號(hào);鋅含量最高是吉農(nóng)45號(hào),其次是吉農(nóng)33號(hào)、吉農(nóng)38號(hào)大豆;鐵含量最高是吉農(nóng)29號(hào),其次是吉農(nóng)71號(hào)、吉農(nóng)45號(hào);錳含量最高是吉農(nóng)45號(hào),其次是吉農(nóng)28號(hào)、吉農(nóng)51號(hào);總異黃酮含量最高是吉農(nóng)45號(hào),其次是吉農(nóng)51號(hào)、吉農(nóng)48號(hào)。研究表明甲醇回流提取的方法極大提高了大豆總異黃酮提取率。本文為規(guī)范原材料大豆重金屬和農(nóng)藥殘留量,建立了同時(shí)檢測(cè)常用于大豆生產(chǎn)的乙草胺、廣滅靈(異惡草松、異VA草酮)、2-4D丁酯、多效唑、氰戊菊酯、敵敵畏、樂果農(nóng)藥殘留量的GC-MS/MS檢測(cè)方法,該方法靈敏可靠,測(cè)定的10種大豆樣品農(nóng)藥殘留均未超標(biāo)。10種大豆重金屬檢測(cè)中有6種大豆鉻超標(biāo),1種鉛超標(biāo),1種鎘超標(biāo),砷、汞未超標(biāo),因此,在培養(yǎng)基原料篩選時(shí),應(yīng)多關(guān)注重金屬超標(biāo)問題,以保證蝙蝠蛾擬青霉菌發(fā)酵產(chǎn)物的安全性。本文同時(shí)測(cè)定了不同品種大豆加工成的豆粕的營(yíng)養(yǎng)成分含量,其間存在顯著差異,粗蛋白含量最高是豆粕36號(hào),其次是豆粕33號(hào)、豆粕71號(hào);粗脂肪含量最高是豆粕71號(hào),其次是豆粕48號(hào)、豆粕33號(hào);鈣含量最高是豆粕45號(hào),其次是豆粕18號(hào)、豆粕48號(hào);鎂含量最高是豆粕18號(hào),其次是豆粕51號(hào)、豆粕71號(hào);銅含量最高是豆粕38號(hào),其次是豆粕36號(hào)、豆粕71號(hào);鋅含量最高是豆粕38號(hào),其次是豆粕48號(hào)、豆粕51號(hào);鐵含量最高是豆粕38號(hào),其次是豆粕29號(hào)、豆粕18號(hào);錳含量最高是豆粕28號(hào),其次是豆粕51號(hào)、豆粕48號(hào);總異黃酮含量最高是豆粕51號(hào),其次是豆粕18號(hào)、豆粕28號(hào)。本文將不同品種的豆粕培養(yǎng)基發(fā)酵培養(yǎng)蝙蝠蛾擬青霉菌,蝙蝠蛾擬青霉菌絲透明,菌落白色,20d可長(zhǎng)滿PDA培養(yǎng)基,液體培養(yǎng)時(shí),不產(chǎn)生菌球,研究豐富了蝙蝠蛾擬青霉菌的生物學(xué)特性研究?jī)?nèi)容。發(fā)酵產(chǎn)物生物量和有效成分含量之間存在顯著差異,發(fā)酵產(chǎn)物中生物量最高是吉農(nóng)33號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物,其次是吉農(nóng)38號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物、吉農(nóng)18號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物;麥角甾醇含量最高是吉農(nóng)29號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物,其次是吉農(nóng)36號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物、吉農(nóng)51號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物;腺苷含量最高是吉農(nóng)18號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物,其次是吉農(nóng)29號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物、吉農(nóng)45號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物;腺嘌呤最高是吉農(nóng)38號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物,其次是吉農(nóng)29號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物、吉農(nóng)36號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物;蟲草素最高是吉農(nóng)48號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物,其次是吉農(nóng)45號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物、吉農(nóng)36號(hào)培養(yǎng)產(chǎn)物。本文采用Pearson方法分析培養(yǎng)基原材料大豆和培養(yǎng)基豆粕的營(yíng)養(yǎng)成分與發(fā)酵產(chǎn)物生物量和有效成分含量之間的相關(guān)性。研究結(jié)果表明,培養(yǎng)基中的豆粕和原料大豆主要營(yíng)養(yǎng)成分含量對(duì)蝙蝠蛾擬青霉菌發(fā)酵產(chǎn)物品質(zhì)有顯著影響,大豆中鈣和大豆苷含量越高,蝙蝠蛾擬青霉菌發(fā)酵產(chǎn)物中腺苷含量越高。豆粕中鈣、大豆苷、大豆苷元、染料木素含量越高,蝙蝠蛾擬青霉菌發(fā)酵產(chǎn)物中腺苷含量越高;豆粕中鈣、鎂、大豆苷、大豆苷元、染料木素、總異黃酮含量越高,蝙蝠蛾擬青霉菌發(fā)酵產(chǎn)物中腺嘌呤含量越低;豆粕中鐵含量越高,生物量越大。綜合以上研究結(jié)果,制定了《優(yōu)質(zhì)大豆(供發(fā)酵菌粉用)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》,用于保證蝙蝠蛾擬青霉菌發(fā)酵產(chǎn)物有效性和穩(wěn)定性。本文用腺嘌呤建立腎臟和睪丸損傷的小鼠模型,運(yùn)用現(xiàn)代藥理學(xué)的方法研究蝙蝠蛾擬青霉菌秘精益氣、溫腎助陽的傳統(tǒng)功效。將小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組和蝙蝠蛾擬青霉菌粉的5個(gè)劑量組(350mg/kg、550mg/kg、750mg/kg、1500mg/kg、3000mg/kg)。研究結(jié)果表明蝙蝠蛾擬青霉菌對(duì)腺嘌呤造成的腎臟和睪丸損傷能夠起到恢復(fù)作用,可以使小鼠體重逐漸恢復(fù)上升趨勢(shì),HE染色、Masson染色的組織病理學(xué)檢查顯示其對(duì)受損的腎臟和睪丸組織結(jié)構(gòu)有恢復(fù)作用,能夠大幅降低腎臟和睪丸組織纖維化情況,并調(diào)節(jié)血清中多種激素含量,改善生精過程中多種關(guān)鍵酶的水平,使BUN、Cr、FSH、LH、ACP、SDH和LDH水平趨向正�；�,穩(wěn)定下丘腦-垂體-腎上腺軸和下丘腦-垂體-性腺軸。其中蝙蝠蛾擬青霉菌1500mg/kg劑量組恢復(fù)作用顯著優(yōu)于其他劑量組。
【學(xué)位授予單位】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S565.1;R285
【圖文】：

又稱海綿柔組織，由 7-8 列細(xì)胞組成，橫向排列，細(xì)胞壁很薄，組織疏很強(qiáng)的吸水力，厚度 13-28μm；下皮層由一排扁圓形細(xì)胞組成，排列松散，厚度 3-6圖 1.1a 所示。子葉占據(jù)大豆子粒的大部分體積，子葉細(xì)胞排列的致密程度可以近似反個(gè)子粒的質(zhì)地。顯微觀察顯示，大豆子葉細(xì)胞為類圓形薄壁細(xì)胞，內(nèi)含大量糊粉粒及油。子葉外層細(xì)胞比內(nèi)層細(xì)胞大而排列疏松，核心細(xì)胞小而排列致密，如圖 1.1b 所

大豆粗蛋白含量顯著高于其他 12 個(gè)品種，江西 655 號(hào)粗蛋白，測(cè)得的粗蛋白含量在 33.6-39.5%范圍內(nèi)。大豆粗蛋白含量>吉農(nóng) 48 號(hào)大豆>吉農(nóng) 36 號(hào)大豆>吉農(nóng) 29 號(hào)大豆>吉農(nóng) 45 號(hào)1978 號(hào)大豆>吉農(nóng) 51 號(hào)大豆>吉農(nóng) 38 號(hào)大豆>吉農(nóng) 18 號(hào)大豆大豆>江西 655 號(hào)大豆（圖 1.2，表 1-5）。

測(cè)定大豆粗脂肪含量顯著高于其他 12 個(gè)品種，吉農(nóng) 51 號(hào)與 38 號(hào)和吉農(nóng) 28 號(hào)之間粗脂肪含量無顯著性差異，但顯肪含量在 16.78-30.53%范圍內(nèi)。大豆粗脂肪含量由高至8 號(hào)大豆>江西 686 號(hào)大豆>吉農(nóng) 36 大豆>吉農(nóng) 33 大豆 45 大豆>吉農(nóng) 28 大豆>吉農(nóng) 38 大豆>吉農(nóng) 71 大豆>吉農(nóng) 1-5）。4±0cd29.44±0.05b491.23±9.50e2178.20±19.35ef9.30±0.30f36.80±0.44g1226.8±0.b29.82±0.07b395.3±3.80f2255.40±11.19cde9.20±0.17f37.60±0.63g1216.5

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