【摘要】：蟲茶是我國特有的林業(yè)資源昆蟲產(chǎn)品,是由特種昆蟲取食特種植物所排出的糞粒而制成。灰直紋螟是貴州主要產(chǎn)蟲茶昆蟲之一,主要分布于貴州黔東南地區(qū),其寄主植物有化香樹和青錢柳。本文測定和評價了灰直紋螟-青錢柳蟲茶的主要營養(yǎng)成分及保健和藥用價值,同時對灰直紋螟-青錢柳蟲茶的抗腫瘤作用效果進(jìn)行了宏觀方面與分子表達(dá)方面的研究,為該蟲茶品種資源的合理利用,以及開發(fā)安全、有效、擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的治療腫瘤新藥方面提供科學(xué)的理論依據(jù)和材料。本文主要研究結(jié)果如下:1.灰直紋螟-青錢柳蟲茶營養(yǎng)成分分析與評價分析了灰直紋螟-青錢柳蟲茶(以下簡稱:灰青蟲茶)一般營養(yǎng)成分、茶特征物質(zhì)、氨基酸、脂肪酸、礦物質(zhì)組成,同時也對其重金屬含量進(jìn)行安全性評價,并以倉樟蟲茶、紫白蟲茶和常規(guī)茶為參照,對灰青蟲茶的營養(yǎng)價值進(jìn)行了評價。結(jié)果表明,灰青蟲茶含有較高的茶多酚物質(zhì);氨基酸總含量較高,其8種必需氨基酸約占氨基酸總量的39.3%,必需氨基酸與非必需氨基酸的比值為64.76%,必需氨基酸評價顯示灰青蟲茶的氨基酸模式接近雞蛋且優(yōu)于大豆;礦物質(zhì)含量豐富,其中以Ca含量最高,同時含有豐富的K元素,K/Na之比為208.04;重金屬含量無超標(biāo)�；仪嘞x茶氨基酸和礦物質(zhì)含量豐富、種類齊全,氨基酸模式較合理,是優(yōu)質(zhì)蛋白和安全的礦物質(zhì)保健飲品,具有較高的營養(yǎng)價值。2.灰直紋螟-青錢柳蟲茶體外抗癌活性檢測通過MTT比色法檢測灰青蟲茶在體外對MCF-7乳腺癌細(xì)胞和SGC-7901胃癌細(xì)胞株的增殖抑制活性,結(jié)果表明,灰青蟲茶對該兩種細(xì)胞具有良好抗癌活性,如蟲茶濃度為500μg·mL~(-1)時處理72h后,對MCF-7乳腺癌細(xì)胞的抑制率為(95.18±2.48)%,對SGC-7901胃癌細(xì)胞的抑制率為(90.92±2.27)%�；仪嘞x茶對同一腫瘤細(xì)胞在不同時間段的誘導(dǎo)凋亡能力不同,同時蟲茶對腫瘤細(xì)胞的抑制率與濃度及處理時間呈正相關(guān),如48 h內(nèi)蟲茶濃度為100μg·mL~(-1)至500μg·mL-1時其對MCF-7乳腺癌細(xì)胞的抑制率分別為(31.82±2.32)%、(42.98±1.89)%、(54.97±2.13)%和(64.78±1.86)%。蟲茶對不同腫瘤細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡能力也不相同,如對人MCF-7乳腺癌細(xì)胞,36 h后蟲茶的IC_(50)為(322.17±1.42)μg·mL~(-1),48 h后蟲茶的IC_(50)為(178.72±0.94)μg·mL~(-1);但對人SGC-7901胃癌細(xì)胞,36 h后蟲茶的IC_(50)為(364.06±0.97)μg·mL~(-1),48 h后蟲茶的IC_(50)為(220.35±1.21)μg·mL~(-1)。這表明,不同的腫瘤細(xì)胞對于蟲茶的敏感性具有差異,其原因很可能是由于不同的腫瘤細(xì)胞來源于不同的組織器官,它們之間具有基因表達(dá)的差異性以及不同的代謝特點(diǎn)。3.灰直紋螟-青錢柳蟲茶體外抗腫瘤細(xì)胞凋亡機(jī)制檢測實(shí)時熒光定量PCR是監(jiān)測腫瘤細(xì)胞中微小殘留分子標(biāo)志的必備研究工具之一,通過熒光定量PCR分別檢測了MCF-7乳腺癌細(xì)胞和SGC-7901胃癌細(xì)胞中相關(guān)凋亡基因的表達(dá)水平。結(jié)果發(fā)現(xiàn),灰青蟲茶處理后的MCF-7乳腺癌細(xì)胞和SGC-7901胃癌細(xì)胞中的Fas、FasL、Bax和caspase家族促凋亡基因的表達(dá)水平明顯上調(diào),同時對于抗凋亡基因Bcl-2而言,灰青蟲茶可以顯著下調(diào)其mRNA的表達(dá)水平。Fas和FasL作為外源性凋亡通路相關(guān)基因,Bax和Bcl-2作為內(nèi)源性凋亡通路相關(guān)基因,而實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明灰青蟲茶可以同時觸發(fā)MCF-7乳腺癌細(xì)胞和SGC-7901胃癌細(xì)胞中的內(nèi)源性和外源性凋亡途徑,從而誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡。同時灰青蟲茶對基因表達(dá)的影響呈現(xiàn)劑量依賴性。
【學(xué)位授予單位】：貴州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R284;R285

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本文編號：2793522