【摘要】：目的:對古鉤藤的質(zhì)量分析以及古鉤藤提取液對D-GalN所致小鼠化學(xué)性肝損傷的保護(hù)作用進(jìn)行初步研究。方法:(1)按照2015年版《中國藥典》通則藥品質(zhì)量分析研究方法對古鉤藤莖葉進(jìn)行紫外光譜、紅外光譜和薄層色譜鑒別,以及水分、灰分和浸出物的檢查。(2)應(yīng)用高效液相色譜法測定古鉤藤葉中咖啡酸的含量。(3)利用HPLC法對古鉤藤水提液進(jìn)行指紋圖譜研究。(4)以古鉤藤不同極性的提取物為研究對象,采用D-GalN建立小鼠化學(xué)性肝損傷模型,觀察其對各組小鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)及肝組織勻漿超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及肝臟病理組織學(xué)變化的影響。結(jié)果:(1)確定了古鉤藤莖葉紫外、紅外以及薄層鑒別的方法;古鉤藤藥材莖,水分不高于13.01%,不低于6.27%,總灰分不高于15.32%,不低于6.15%,酸不溶性灰分不高于0.55%,不低于0.17%,浸出物不高于11.75%,不低于5.21%;古鉤藤藥材葉,水分不高于10.37%,不低于4.82%,總灰分不高于23.14%,不低于9.06%,酸不溶性灰分不高于3.96%,不低于0.13%,浸出物不高于19.92%,不低于10.8%。(2)應(yīng)用高效液相色譜法測定古鉤藤葉中咖啡酸的含量,方法學(xué)的考察結(jié)果表明,各項(xiàng)考察結(jié)果的RSD值均小于3%,10批古鉤藤葉中咖啡酸的含量在0.0965%~0.4772%之間。(3)建立了古鉤藤水提取液指紋圖譜的共有模式,共標(biāo)定了13個共有峰,10批不同產(chǎn)地圖譜與對照指紋圖譜相似度均在0.9以上。(4)古鉤藤提取物能降低小鼠血清ALT、AST活性(P0.05),能升高小鼠肝勻漿中SOD的活性(P0.05),降低MDA的水平(P0.05)。結(jié)論:(1)本次實(shí)驗(yàn)對古鉤藤莖葉質(zhì)量分析進(jìn)行了初步研究,可以為其今后的質(zhì)量控制以及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供科學(xué)依據(jù)。(2)初步建立HPLC法測定古鉤藤葉中咖啡酸的含量,該方法準(zhǔn)確可靠,線性關(guān)系良好,精密度高,可用于古鉤藤藥材的質(zhì)量評價(jià)。(3)建立了古鉤藤水提液指紋圖譜的共有模式,該方法特征性強(qiáng),準(zhǔn)確可靠,方法學(xué)考察均符合要求,可為古鉤藤藥材的質(zhì)量評價(jià)提供依據(jù)。(4)古鉤藤提取液對D-GalN所致小鼠化學(xué)性肝損傷具有一定的保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】：廣西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285;R284.1
【圖文】：

10批古鉤藤葉聚類分析圖

圖 1-21 10 批古鉤藤莖聚類分析圖由聚類分析圖可知，10 批古鉤藤葉分為三大類，楊美、十萬大山、石埠、羅村、譚紋村、高峰為一類；馬村、蘇b\村、新蘇村為一類；武鳴為一類。10 批古鉤藤莖分為三大類，馬村、蘇b\村、新蘇村、武鳴為一類；十萬大山、石埠、羅村、高峰為一類；楊美、譚紋村為一類。綜上所述，古鉤藤莖葉紅外鑒別方法可暫定為：精密稱取古鉤藤粉末 1g，按 1:200 的比例與溴化鉀混合，置烘箱干燥 30min 后，取出于紅外燈下在瑪瑙乳缽中研磨均勻，于手動壓片機(jī)上壓至透明的薄片。經(jīng)FT-IR 光譜進(jìn)行測定，掃描次數(shù) 16，分辨率 8，扣除 H2O 和 CO2的干擾，光譜掃描范圍是 4000~400cm-1，記錄古鉤藤莖、葉粉末的紅外光譜圖。

稱取 10 批廣西境內(nèi)不同產(chǎn)地古鉤藤葉粉末各 1g，分別加入 30%甲ml，超聲提取 1h，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。精密稱取綠原照品5mg，精密加入甲醇10ml，制成濃度為0.5mg/ml的對照品貯備液 2015 年版《中國藥典》第四部通則 0502 薄層色譜法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，分取供試品溶液及對照品溶液約半管（吸樣毛細(xì)管），用點(diǎn)狀方式點(diǎn)樣別點(diǎn)于同一硅膠 GF254薄層板上，以體積比正丁醇-冰醋酸-純水（4：1為展開劑展開，展距約 7cm 時(shí)取出，晾干，置 254nm 的紫外光下供試品溶液及對照品溶液并進(jìn)行 TLC 實(shí)驗(yàn)，供試品色譜中，在與對薄層色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，結(jié)果見圖 1-22。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2792525