【摘要】：黃芩苷是中藥傳統(tǒng)藥物黃芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的有效活性成分之一,并具有廣泛的藥理作用,清除氧自由基,保護心腦血管,保護神經(jīng)系統(tǒng)。由于較差的溶解性,導致黃芩苷口服制劑對于腦部疾病的治療,不但生物利用度較低,并缺乏一定的腦靶向性。目的:為改善黃芩苷脂溶性,增加透膜特性,將其制備成具有特定體外表征的脂質(zhì)體,試圖提高生物利用度,提高腦靶向性;通過黃芩苷脂質(zhì)體(BA-LP)在急性腦缺血模型大鼠體內(nèi)的生物藥劑學行為,驗證腦缺血損傷時,缺血組織存在類似于腫瘤的高滲透、長滯留(Enhanced Permeability and Retention effect,EPR)效應“炎癥靶向”作用。方法:1建立黃芩苷脂質(zhì)體(BA-LP)包封率的測定方法�？疾觳煌闹苽浞椒▽A-LP包封率的影響。采用SPSS17.0相關性分析法,對黃芩苷脂質(zhì)體工藝的影響因素進行分析,然后通過Box-behnken Design優(yōu)化黃芩苷脂質(zhì)體制備工藝。2用馬爾文粒徑測定儀測定黃芩苷脂質(zhì)體粒徑和Zeta電位,透射電鏡觀察BA-LP的外觀形態(tài)。采用不同方程模型對BA-LP與黃芩苷(BA)進行體外釋放擬合。3藥代動力學及分布學研究實驗:采用栓線法制備急性腦缺血再灌注模型,采用HPLC對生物樣品中黃芩苷進行分析,對比正常及急性腦缺血再灌注模型大鼠,靜脈注射BA-LP及BA后的藥代動力學及組織靶向性情況。4采用TTC染色、腦水腫及神經(jīng)功能評分指標探討黃芩苷脂質(zhì)體對急性腦缺血再灌注損傷的保護作用。采用DAS3.1.1軟件中的散點相關法(Y=a+b?lnx)建立黃芩苷濃度-時間-藥效之間的量效相關性研究方法。結(jié)果:1通過單因素相關性分析發(fā)現(xiàn)水化體積對包封率的影響極顯著(P0.01),Box-behnken Design優(yōu)化確定黃芩苷脂質(zhì)體最優(yōu)處方為:磷脂藥物比例3.81:1,磷脂膽固醇比例為5.70:1,水化體積為1.02 mL,超聲功率60 W,超聲時間10 min,超聲溫度20±5°C。2 BA-LP外部形態(tài)為球形顆粒,粒徑為160-190 nm,PDI值為0.190-0.224,電位為-5.7 mV,其體外釋放符合雙相動力模型,具有緩釋作用。3藥代動力學及分布學研究實驗結(jié)果:本研究對比了正常及急性腦缺血再灌注模型大鼠,靜脈注射BA-LP及BA后的藥代動力學及組織分布情況:BA-LP正常組血漿中AUC_((0-∞))明顯高于BA正常組(P0.01),半衰期t_(1/2z)延長1.62倍,BA-LP正常組Vz,CLz明顯降低(P0.01);與BA-LP正常組相比,BA-LP模型組大鼠血漿AUC_((0-t))、MRT_((0-t))、Cmax顯著升高(P0.01),表觀分布容積Vz與清除率CLz,明顯降2.632、2.333倍(P0.01),黃芩苷脂質(zhì)體靜脈注射的生物利用度為4.728%。靶向性評價結(jié)果:對于BA-LP模型組,在各組織中Te由大到小依次為:紋狀體(26.610%)嗅球(15.210%)海馬(12.379%)腎(9.246%)皮層(8.558%)小腦(7.161%)肝(6.390%)脾(5.660%)心(4.572%)肺(4.213%);對于BA模型組,TE在各組織的由大到小依次為:腎(20.988%)紋狀體(17.814%)嗅球(15.716%)海馬(14.241%)皮層(11.358%)小腦(5.611%)肝(5.667%)肺(5.538%)心(2.407%)脾(0.634%)。與BA模型相比,BA-LP模型組腦組織的靶向性增強,尤其靶向于紋狀體、嗅球、海馬,而對腎的選擇性降低了2.296倍。4藥效學及PK-PD相關性研究實驗:從TTC染色、腦水腫及神經(jīng)功能評分結(jié)果可知黃芩苷脂質(zhì)體對急性腦缺血具有一定的保護作用。通過PK-PD模型擬合,結(jié)果靜脈注射BA后血漿中黃芩苷濃度與SOD擬合方程為Y_(SOD)=224.859-2.34?lnX,(r=-0.861,p=0.006);黃芩苷濃度與LDH擬合方程為:Y_(LDH)=7319.867+53.096?lnX,(r=0.924,P=0.001)。給予BA-LP后血漿中黃芩苷濃度與SOD擬合方程為Y_(SOD)=185.248+15.605?lnX,(r=0.691,P=0.027);黃芩苷濃度與LDH擬合方程為:Y_(LDH)=5513.347+64.377?lnX,(r=0.856,P=0.002)。血漿中SOD、LDH的變化可能與黃芩苷藥效的發(fā)揮具有時間滯后性有關。結(jié)論:采用逆向蒸發(fā)法制備BA-LP包封率最高、粒徑最小,其方法具有可行性;BA-LP體外釋放過程符合雙相動力學特征;體內(nèi)藥代動力學及組織分布表明黃芩苷脂質(zhì)體具有緩釋作用,可延長黃芩苷在體內(nèi)的滯留時間,具有分布范圍窄、提高生物利用度、靶向于腦組織的特點;通過急性腦缺血模型證實了腦損傷時存在類似于腫瘤“EPR”效應的“炎癥靶向”作用,可靶向腦組織。
【學位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5
【圖文】：

發(fā)現(xiàn)空白脂質(zhì)體在 276 nm 處有吸收[40]，造成干擾，因此，本研究選擇 315.5 nm 為黃芩苷檢測波長。結(jié)果如圖1-1。圖 1-1 黃芩苷及空白脂質(zhì)體全波長掃描圖2.1.3 標準曲線的建立精密稱取黃芩苷對照品 14.46 mg，置 100 mL 容量瓶中，加 pH7.0 的 PBS 溶液配制成濃度為 144.60 μg/mL 的儲備液。精密量取上述儲備液用 pH7.0 的 PBS液進一步稀釋得到系列質(zhì)量濃度的黃芩苷標準溶液，分別為 2.892、5.784、8.676、空白脂質(zhì)體黃芩苷脂質(zhì)體

圖 1-10 各因素對響應值包封率的三維效應面和二維等高線圖2.6 處方優(yōu)化工藝的確定及驗證依據(jù)效應面法優(yōu)化的工藝條件范圍，最終確定磷脂藥物比例 3.81:1，磷脂膽

黃芩苷脂質(zhì)體透射電鏡圖

【參考文獻】

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本文編號：2792500