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黃芥籽中活性成分的制備及其抗氧化活性評(píng)價(jià)

發(fā)布時(shí)間:2020-08-09 22:25
【摘要】:隨著科技發(fā)展及生活水平提高,現(xiàn)代人們?nèi)粘=佑|到越來(lái)越多的輻射以及致癌物,這些物質(zhì)進(jìn)入體內(nèi),能夠誘導(dǎo)過(guò)量的自由基產(chǎn)生,使機(jī)體的抗氧化系統(tǒng)紊亂,導(dǎo)致氧化還原失衡,引起氧化應(yīng)激,從而導(dǎo)致衰老及多種慢性病的發(fā)生。因此采取有效手段清除過(guò)量自由基,對(duì)于減緩衰老以及改善人們健康狀況意義重大�?茖W(xué)研究表明,西蘭花、芥菜等十字花科植物具有抗氧化、抗癌等活性,經(jīng)常食用十字花科植物能夠降低多種慢性病的發(fā)生。本文以芥菜的種子黃芥籽為原料,對(duì)其水提取的工藝及水解條件進(jìn)行了優(yōu)化,分別得到了黃芥籽水提物及水解產(chǎn)物,并對(duì)二者進(jìn)行了成分分析及抗氧化活性的評(píng)價(jià)。本論文主要的研究?jī)?nèi)容如下:本實(shí)驗(yàn)以黃芥籽水提物中的硫苷及多酚含量為響應(yīng)值,對(duì)黃芥籽的水提取工藝進(jìn)行了單因素及響應(yīng)面優(yōu)化,確定黃芥籽水提物中總硫苷及總酚含量最優(yōu)的提取條件為:提取溫度92 ℃,料液比1:40(w/w),提取時(shí)間2.0h并對(duì)水提物進(jìn)行了理化成分分析,其中主要的活性成分硫苷、多酚及黃酮的含量分別為56.94 ±0.32、15.29 ±0.40、10.67 ± 0.83 mg/g。之后通過(guò)DPPH自由基清除能力、羥自由基清除能力及FRAP亞鐵離子還原能力測(cè)定對(duì)黃芥籽水提物的體外抗氧化活性進(jìn)行研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃芥籽水提物不具有DPPH自由基清除能力,具有良好的羥自由基清除能力及亞鐵離子還原能力。通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和響應(yīng)面法對(duì)黃芥籽的水解條件進(jìn)行了優(yōu)化,確定黃芥籽水解產(chǎn)物中主要活性成分AITC含量最優(yōu)的水解條件為:pH 6.0、抗壞血酸添加量2.0 mg、EDTA添加量1.2 mmol;在此條件下異硫氰酸酯的產(chǎn)量為8.17±0.35mg/g。采用氣質(zhì)聯(lián)用法對(duì)其水解產(chǎn)物進(jìn)行了成分分析,共分離出34種物質(zhì),包含異硫氰酸酯類、脂類、醛類、酸類等,其中烯丙基異硫氰酸酯及亞油酸響應(yīng)值最高。本實(shí)驗(yàn)采用H2O2誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞成功建立細(xì)胞抗氧化模型,通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)及細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)確定了黃芥籽水提物及水解產(chǎn)物對(duì)HepG2細(xì)胞的安全劑量,并對(duì)其抗氧化能力進(jìn)行了評(píng)價(jià)。研究表明,黃芥籽水提物及水解產(chǎn)物能夠顯著增強(qiáng)氧化損傷細(xì)胞的活力及細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶SOD、CAT及GSH-Px的活力,并且能夠顯著降低受損傷細(xì)胞LDH泄漏率、細(xì)胞內(nèi)ROS及MDA的含量。綜合以上,可以確定黃芥籽水提物及水解產(chǎn)物可以顯著緩解HepG2細(xì)胞由H202誘導(dǎo)的氧化損傷。
【學(xué)位授予單位】:天津科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R284;R285
【圖文】:

異硫氰酸酯,酸酯,抗腫瘤,信號(hào)通路


0逡逑SFN逡逑圖1-3常見(jiàn)的異硫氰酸酯的結(jié)構(gòu)示意圖逡逑Fig.邋1-3邋The邋structures邋of邋common邋isothiocyanates逡逑1.4.3.2異硫氰酸酯的分析方法逡逑(1)

總酚含量,水提物,提取時(shí)間


邐1:60逡逑料液比(wAv)邋+硫苷+總酚逡逑圖3-4料液比對(duì)黃芥籽水提物中硫苷及總酚含量的影響逡逑Fig.邋3-4邋Effect邋of邋feed邋liquid邋ratio邋on邋total邋content邋of邋glucosinolates邋and邋phenols邋in邋aqueous邋extract邋of逡逑yellow邋mustard逡逑注:不同字母代表各組間數(shù)據(jù)具有差異顯著性(P<邋0.05)逡逑3.1.3.3提取時(shí)間對(duì)黃芥籽水提物中總硫苷及總酚含量的影響逡逑提取時(shí)間對(duì)黃芥籽水提物中硫苷及總酚含量的影響見(jiàn)圖3-5。由圖3-5可見(jiàn),隨逡逑著提取時(shí)間的增加黃芥籽水提物中的硫苷和總酚含量均呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì),提逡逑取時(shí)間由1.0邋h增加到2.0邋h時(shí),硫苷及總酚含量增加比較明顯,但2.0邋h后兩者含量逡逑開(kāi)始下降,因提取時(shí)間過(guò)長(zhǎng),使得多酚在相對(duì)高的溫度條件下發(fā)生降解,并且過(guò)長(zhǎng)的逡逑提取時(shí)間使多糖,果膠,蛋白等水溶性雜質(zhì)溶出增加,從節(jié)省時(shí)間考慮,確定最佳提逡逑取時(shí)間為2.0邋h。逡逑55邋-I邐r邐16逡逑^邋b邋b邋-14邋^逡逑J邋40邋-邐\邐J逡逑iW邐a邐f邋'邋13邋*i逡逑<^i邋33邐a邐鄰逡逑細(xì)邐?邐12邐g逡逑m邋30'邐鉺逡逑25-邐.邐11逡逑20邋-J邐.邐.邐.邐.邐1-邋10逡逑1.0邐1.5邐2.0邐2.5邐3.0逡逑提取時(shí)間(h)邐一■一硫苷一^一總酚逡逑圖3-5提取時(shí)間對(duì)黃芥籽水提物中硫苷及總酚含量的

總酚含量,交互作用分析,響應(yīng)面,回歸方程


圖3-6響應(yīng)面交互作用分析逡逑Fig.邋3-6邋Analysis邋of邋response邋surface邋interaction逡逑總酚含量的回歸方程:逡逑Y邋i=l邋5.26-0.55邋A+0.10B-0.16C-2.500E-003AB+0.1邋9AC+0.14BC-0.92A2-0.44B2-逡逑0.46C2。逡逑總酚含量的各因素方差分析見(jiàn)表3-3。逡逑表3-3方差分析逡逑Table邋3-3邋Variance邋analysis邋of邋response邋surface邋experiment逡逑來(lái)源邐平方和邐自由度邐均方邐F?邐P值邐顯著性逡逑模型邐6.84邐9邐0.76邐179.45邐<0.0001邐顯著逡逑A邐0.034邐1邐0.034邐7.95邐0.0258逡逑B邐0.048邐I邐0.048邐11.45邐0.0117逡逑C邐0.59邐1邐0.59邐140.32邐<0.0001逡逑AB邐0.043邐I邐0.043邐10.18邐0.0153逡逑AC邐0.17邐I邐0.17邐40.73邐0.0004逡逑

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