【摘要】：隨著科技發(fā)展及生活水平提高,現(xiàn)代人們?nèi)粘＝佑|到越來越多的輻射以及致癌物,這些物質(zhì)進(jìn)入體內(nèi),能夠誘導(dǎo)過量的自由基產(chǎn)生,使機體的抗氧化系統(tǒng)紊亂,導(dǎo)致氧化還原失衡,引起氧化應(yīng)激,從而導(dǎo)致衰老及多種慢性病的發(fā)生。因此采取有效手段清除過量自由基,對于減緩衰老以及改善人們健康狀況意義重大�？茖W(xué)研究表明,西蘭花、芥菜等十字花科植物具有抗氧化、抗癌等活性,經(jīng)常食用十字花科植物能夠降低多種慢性病的發(fā)生。本文以芥菜的種子黃芥籽為原料,對其水提取的工藝及水解條件進(jìn)行了優(yōu)化,分別得到了黃芥籽水提物及水解產(chǎn)物,并對二者進(jìn)行了成分分析及抗氧化活性的評價。本論文主要的研究內(nèi)容如下:本實驗以黃芥籽水提物中的硫苷及多酚含量為響應(yīng)值,對黃芥籽的水提取工藝進(jìn)行了單因素及響應(yīng)面優(yōu)化,確定黃芥籽水提物中總硫苷及總酚含量最優(yōu)的提取條件為:提取溫度92 ℃,料液比1:40(w/w),提取時間2.0h并對水提物進(jìn)行了理化成分分析,其中主要的活性成分硫苷、多酚及黃酮的含量分別為56.94 ±0.32、15.29 ±0.40、10.67 ± 0.83 mg/g。之后通過DPPH自由基清除能力、羥自由基清除能力及FRAP亞鐵離子還原能力測定對黃芥籽水提物的體外抗氧化活性進(jìn)行研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃芥籽水提物不具有DPPH自由基清除能力,具有良好的羥自由基清除能力及亞鐵離子還原能力。通過單因素實驗和響應(yīng)面法對黃芥籽的水解條件進(jìn)行了優(yōu)化,確定黃芥籽水解產(chǎn)物中主要活性成分AITC含量最優(yōu)的水解條件為:pH 6.0、抗壞血酸添加量2.0 mg、EDTA添加量1.2 mmol;在此條件下異硫氰酸酯的產(chǎn)量為8.17±0.35mg/g。采用氣質(zhì)聯(lián)用法對其水解產(chǎn)物進(jìn)行了成分分析,共分離出34種物質(zhì),包含異硫氰酸酯類、脂類、醛類、酸類等,其中烯丙基異硫氰酸酯及亞油酸響應(yīng)值最高。本實驗采用H2O2誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞成功建立細(xì)胞抗氧化模型,通過MTT實驗及細(xì)胞凋亡實驗確定了黃芥籽水提物及水解產(chǎn)物對HepG2細(xì)胞的安全劑量,并對其抗氧化能力進(jìn)行了評價。研究表明,黃芥籽水提物及水解產(chǎn)物能夠顯著增強氧化損傷細(xì)胞的活力及細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶SOD、CAT及GSH-Px的活力,并且能夠顯著降低受損傷細(xì)胞LDH泄漏率、細(xì)胞內(nèi)ROS及MDA的含量。綜合以上,可以確定黃芥籽水提物及水解產(chǎn)物可以顯著緩解HepG2細(xì)胞由H202誘導(dǎo)的氧化損傷。
【學(xué)位授予單位】：天津科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R284;R285
【圖文】：

０逡逑ＳＦＮ逡逑圖１－３常見的異硫氰酸酯的結(jié)構(gòu)示意圖逡逑Ｆｉｇ．邋１－３邋Ｔｈｅ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ邋ｏｆ邋ｃｏｍｍｏｎ邋ｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅｓ逡逑１．４．３．２異硫氰酸酯的分析方法逡逑（１）

邐１：６０逡逑料液比（ｗＡｖ）邋＋硫苷＋總酚逡逑圖３－４料液比對黃芥籽水提物中硫苷及總酚含量的影響逡逑Ｆｉｇ．邋３－４邋Ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ｆｅｅｄ邋ｌｉｑｕｉｄ邋ｒａｔｉｏ邋ｏｎ邋ｔｏｔａｌ邋ｃｏｎｔｅｎｔ邋ｏｆ邋ｇｌｕｃｏｓｉｎｏｌａｔｅｓ邋ａｎｄ邋ｐｈｅｎｏｌｓ邋ｉｎ邋ａｑｕｅｏｕｓ邋ｅｘｔｒａｃｔ邋ｏｆ逡逑ｙｅｌｌｏｗ邋ｍｕｓｔａｒｄ逡逑注：不同字母代表各組間數(shù)據(jù)具有差異顯著性（Ｐ＜邋０．０５）逡逑３．１．３．３提取時間對黃芥籽水提物中總硫苷及總酚含量的影響逡逑提取時間對黃芥籽水提物中硫苷及總酚含量的影響見圖３－５。由圖３－５可見，隨逡逑著提取時間的增加黃芥籽水提物中的硫苷和總酚含量均呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢，提逡逑取時間由１．０邋ｈ增加到２．０邋ｈ時，硫苷及總酚含量增加比較明顯，但２．０邋ｈ后兩者含量逡逑開始下降，因提取時間過長，使得多酚在相對高的溫度條件下發(fā)生降解，并且過長的逡逑提取時間使多糖，果膠，蛋白等水溶性雜質(zhì)溶出增加，從節(jié)省時間考慮，確定最佳提逡逑取時間為２．０邋ｈ。逡逑５５邋－Ｉ邐ｒ邐１６逡逑＾邋ｂ邋ｂ邋－１４邋＾逡逑Ｊ邋４０邋－邐＼邐Ｊ逡逑ｉＷ邐ａ邐ｆ邋＇邋１３邋＊ｉ逡逑＜＾ｉ邋３３邐ａ邐鄰逡逑細(xì)邐？邐１２邐ｇ逡逑ｍ邋３０＇邐鉺逡逑２５－邐．邐１１逡逑２０邋－Ｊ邐．邐．邐．邐．邐１－邋１０逡逑１．０邐１．５邐２．０邐２．５邐３．０逡逑提取時間（ｈ）邐一■一硫苷一＾一總酚逡逑圖３－５提取時間對黃芥籽水提物中硫苷及總酚含量的

圖３－６響應(yīng)面交互作用分析逡逑Ｆｉｇ．邋３－６邋Ａｎａｌｙｓｉｓ邋ｏｆ邋ｒｅｓｐｏｎｓｅ邋ｓｕｒｆａｃｅ邋ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ逡逑總酚含量的回歸方程：逡逑Ｙ邋ｉ＝ｌ邋５．２６－０．５５邋Ａ＋０．１０Ｂ－０．１６Ｃ－２．５００Ｅ－００３ＡＢ＋０．１邋９ＡＣ＋０．１４ＢＣ－０．９２Ａ２－０．４４Ｂ２－逡逑０．４６Ｃ２。逡逑總酚含量的各因素方差分析見表３－３。逡逑表３－３方差分析逡逑Ｔａｂｌｅ邋３－３邋Ｖａｒｉａｎｃｅ邋ａｎａｌｙｓｉｓ邋ｏｆ邋ｒｅｓｐｏｎｓｅ邋ｓｕｒｆａｃｅ邋ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ逡逑來源邐平方和邐自由度邐均方邐Ｆ？邐Ｐ值邐顯著性逡逑模型邐６．８４邐９邐０．７６邐１７９．４５邐＜０．０００１邐顯著逡逑Ａ邐0．0３４邐１邐０．０３４邐７．９５邐０．０２５８逡逑Ｂ邐0．0４８邐Ｉ邐０．０４８邐１１．４５邐０．０１１７逡逑Ｃ邐０．５９邐１邐０．５９邐１４０．３２邐＜０．０００１逡逑ＡＢ邐０．０４３邐Ｉ邐０．０４３邐１０．１８邐０．０１５３逡逑ＡＣ邐０．１７邐Ｉ邐０．１７邐４０．７３邐０．０００４逡逑

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本文編號：2787639