【摘要】：目的:探討900MHz手機(jī)頻率電磁輻射對(duì)大鼠睪丸氧化損傷尤其是Prdx2和Prdx4蛋白表達(dá)的影響,并探討龜齡集對(duì)其作用機(jī)制。在前期研究基礎(chǔ)上,以睪丸超微結(jié)構(gòu)、抗氧化酶、過(guò)氧化物酶蛋白2(Peroxiredoxin2,Prdx2)和過(guò)氧化物酶蛋白4(Peroxiredoxin 4,Prdx4)表達(dá)為主要研究指標(biāo),選用中藥龜齡集為干預(yù)因素,觀察900MHz手機(jī)頻率電磁輻射對(duì)大鼠睪丸的影響及龜齡集對(duì)其可能的作用機(jī)制。方法:將50只清潔級(jí)健康SD雄性大鼠隨機(jī)均分為五組(n=10),分別為:假輻射組,4小時(shí)輻射組,8小時(shí)輻射組,4小時(shí)中藥組,8小時(shí)中藥組。假輻射組輻射0h,余組分別于900MHz電磁輻射(370μW/cm~2)下暴露4小時(shí)和8小時(shí),持續(xù)15d,4小時(shí)中藥組和8小時(shí)中藥組輻射后灌胃龜齡集混懸液,其它3組灌胃純凈水。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死取材。HE染色觀察大鼠睪丸組織病理形態(tài),透射電鏡觀察睪丸組織超微結(jié)構(gòu)的變化,TBA法檢測(cè)大鼠睪丸組織及大鼠血清氧化抗氧化指標(biāo)變化,免疫組化和Western blot技術(shù)檢測(cè)Prdx2、Prdx4蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果1.各組大鼠一般情況比較實(shí)驗(yàn)過(guò)程中觀察發(fā)現(xiàn)各組大鼠反應(yīng)靈敏度未見(jiàn)明顯變化,日常進(jìn)食進(jìn)水量正常,龜齡集組大鼠大便量增多,各組大鼠外觀皮毛完整且色白有光澤,各組大鼠體重均逐漸上升,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.各組大鼠睪丸系數(shù)的比較對(duì)比各組間大鼠睪丸重量和睪丸系數(shù),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.各組大鼠睪丸組織形態(tài)學(xué)比較假輻射組大鼠睪丸各曲細(xì)精管緊密連接,曲細(xì)精管內(nèi)部各層結(jié)構(gòu)完整;可見(jiàn)精原細(xì)胞、初級(jí)精母細(xì)胞、次級(jí)精母細(xì)胞(偶見(jiàn))、精子細(xì)胞整齊排列,且管腔內(nèi)充滿成熟精子;與假輻射組相較,4小時(shí)輻射組大鼠睪丸組織學(xué)變化不顯著,8小時(shí)輻射組睪丸生精小管結(jié)構(gòu)清晰,各級(jí)生精細(xì)胞分布清楚,但微顯疏松,小管腔內(nèi)成熟精子數(shù)目減少;4小時(shí)中藥組大鼠睪丸生精小管內(nèi)各層細(xì)胞分層清晰完整,曲細(xì)精管腔內(nèi)充滿成熟精子;與8小時(shí)輻射組相較,8小時(shí)中藥組大鼠睪丸組織形態(tài)基本正常。4.各組大鼠睪丸超微結(jié)構(gòu)的比較與假輻射組比較,4小時(shí)輻射組精原細(xì)胞膜內(nèi)陷,支持細(xì)胞與生精小管基膜稍有分離,細(xì)胞間間隙增寬,部分線粒體腫脹,嵴消失且內(nèi)含空泡;與假輻射組比較,8小時(shí)輻射組曲細(xì)精管基膜增厚且與支持細(xì)胞間隙加寬,細(xì)胞與細(xì)胞間空泡明顯,精原細(xì)胞可見(jiàn)細(xì)胞膜不規(guī)則化,明顯凹陷,線粒體啞鈴狀畸形,線粒體部分嵴融合消失且內(nèi)含空泡;與4小時(shí)輻射組相較,4小時(shí)中藥組睪丸曲細(xì)精管基膜趨向正�；�,支持細(xì)胞恢復(fù)緊密連接,細(xì)胞間間隙縮小,線粒體結(jié)構(gòu)基本正常;與8小時(shí)輻射組相比,8小時(shí)中藥組細(xì)胞間隙減小,曲細(xì)精管基膜與支持細(xì)胞連接趨于正常,偶見(jiàn)空泡,偶見(jiàn)線粒體腫脹、空泡。5.各組大鼠血清GSH、MDA含量和SOD、POD活性對(duì)比與假輻射組大鼠相比較,4小時(shí)輻射組和8小時(shí)輻射組血清谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性顯著下降,丙二醛(malonic dialdehyde,MDA)含量均明顯增多(P0.05),8小時(shí)輻射組血清過(guò)氧化物酶(peroxidase,POD)活力明顯下降(P0.05);與4小時(shí)輻射組相較,8小時(shí)輻射組血清MDA含量明顯增加,SOD活性降低(P0.05);與4小時(shí)輻射組相較,4小時(shí)中藥組血清組織MDA含量明顯減少(P0.05);與8小時(shí)輻射組比較,8小時(shí)中藥組血清MDA含量明顯減少,SOD活性顯著增加(P0.05);其他指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。6.各組大鼠睪丸組織GSH、MDA含量和SOD、POD活性對(duì)比與假輻射組大鼠比較,4小時(shí)輻射組大鼠睪丸組織SOD活力顯著減低,8小時(shí)輻射組大鼠睪丸組織MDA含量均明顯增加(P0.05),GSH含量、SOD和POD活性顯著降低(P0.05);與4小時(shí)輻射組比較,8小時(shí)輻射組大鼠睪丸GSH含量降低;與8小時(shí)輻射組比較,8小時(shí)中藥組大鼠睪丸組織MDA含量明顯降低(P0.05),GSH含量和SOD活性顯著增加(P0.05);其他指標(biāo)間變化差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。7.各組大鼠睪丸組織Prdx2和Prdx4蛋白表達(dá)的比較(免疫組化)假輻射組大鼠睪丸組織Prdx2和Prdx4蛋白在精原細(xì)胞、初級(jí)精母細(xì)胞、次級(jí)精母細(xì)胞和精子細(xì)胞均有表達(dá),表達(dá)由精原細(xì)胞向精子細(xì)胞逐步增強(qiáng),與假輻射組比較,輻射組睪丸組織Prdx2和Prdx4蛋白表達(dá)明顯減低,精原細(xì)胞和初級(jí)精母細(xì)胞幾乎無(wú)表達(dá),次級(jí)精母、精子細(xì)胞和精子呈淡棕色,表達(dá)減弱。龜齡集組睪丸組織Prdx2和Prdx4蛋白表達(dá)平均光度值明顯增加,尤其是8小時(shí)龜齡集組表達(dá)明顯。與假輻射組對(duì)比,4小時(shí)輻射組和8小時(shí)輻射組大鼠睪丸組織Prdx2和Prdx4蛋白表達(dá)平均光度值明顯降低(P0.05),與4小時(shí)輻射組對(duì)比,8小時(shí)輻射組睪丸組織Prdx2和Prdx4蛋白表達(dá)降低,4小時(shí)中藥組睪丸組織Prdx2和Prdx4蛋白表達(dá)明顯增多(P0.05);與8小時(shí)輻射組對(duì)比,8小時(shí)中藥組睪丸組織Prdx2和Prdx4蛋白表達(dá)明顯增多(P0.05)。8.各組大鼠睪丸組織Prdx2和Prdx4蛋白表達(dá)的比較(Western blot)與假輻射組大鼠對(duì)比,其他組大鼠睪丸組織Prdx2和Prdx4蛋白表達(dá)平均灰度比值明顯減少(P0.05);與4小時(shí)輻射組對(duì)比,4小時(shí)中藥組睪丸組織Prdx2和Prdx4蛋白表達(dá)明顯增多(P0.05);與8小時(shí)輻射組對(duì)比,8小時(shí)中藥組睪丸組織Prdx2和Prdx4蛋白表達(dá)顯著增加(P0.05)。此外,與4小時(shí)輻射組相比,8小時(shí)輻射組睪丸組織Prdx2和Prdx4蛋白表達(dá)量下降(P0.05)。9.各組大鼠睪丸組織凋亡情況比較各組大鼠睪丸組織均可見(jiàn)部分生精細(xì)胞凋亡,其細(xì)胞核呈棕黃色為陽(yáng)性表達(dá),假輻射組主要見(jiàn)于精原細(xì)胞;4小時(shí)和8小時(shí)輻射組可見(jiàn)于精原細(xì)胞、精母細(xì)胞和精子細(xì)胞,8小時(shí)輻射組可見(jiàn)部分成熟精子呈黃褐色表達(dá);4小時(shí)中藥組見(jiàn)于精原細(xì)胞,偶見(jiàn)于初級(jí)精母細(xì)胞;8小時(shí)中藥組見(jiàn)于精原細(xì)胞,初級(jí)精母細(xì)胞,偶見(jiàn)于精子細(xì)胞。結(jié)論:1.900MHz手機(jī)頻率電磁輻射后,大鼠睪丸組織超微結(jié)構(gòu)明顯改變,細(xì)胞膜及線粒體形態(tài)改變明顯,大鼠睪丸組織氧化損傷加重,抗氧化酶活性降低,Prdx2和Prdx4蛋白在睪丸組織的表達(dá)減弱,各組細(xì)胞均有凋亡,具有時(shí)間效應(yīng)關(guān)系。大鼠與人類雖不屬于同一種屬,且氧化損傷可能與輻射劑量有相關(guān)性,但此實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)臨床有一定的指導(dǎo)意義,可使人類重視輻射的影響并做好預(yù)防。2.龜齡集可改善輻射致大鼠睪丸組織超微結(jié)構(gòu)的損傷,增加Prdx2和Prdx4在睪丸組織的表達(dá),降低氧化損傷,本研究?jī)H對(duì)蛋白表達(dá)以及氧化情況做了簡(jiǎn)單的分析,但電磁輻射對(duì)人體組織器官損傷的深入機(jī)制未得到有效證實(shí),尚需進(jìn)一步研究。
【學(xué)位授予單位】：河北中醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

各組大鼠體重的比較

各組大鼠睪丸系數(shù)的比較

21圖 1-3 各組大鼠睪丸組織形態(tài)（HE 染色，×200）Fig.1-3 The histomorphology changes in the rat testis (HE staining, ×200)A:False radiation group B:4h-radiation group C:8h-radiation groupD:4h-Chinese medicine group E:8h-Chinese medicine group

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 耿德軍;呂朝輝;李西平;;微波對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生殖功能的影響[J];實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué);2016年03期

2 王東;李博;劉媛;馬夜肥;陳書強(qiáng);孫惠君;董杰;馬旭輝;周晶;王曉紅;;手機(jī)輻射對(duì)離體精子質(zhì)量及DNA甲基化的影響[J];中華男科學(xué)雜志;2015年06期

3 孫中明;吳燕紅;周海港;姜語(yǔ)彥;許哲杰;;龜齡集膠囊對(duì)弱精子癥精子線粒體功能的作用機(jī)制研究[J];中國(guó)男科學(xué)雜志;2015年03期

4 申鍵;王美玲;;甘草提取物抗輻射效應(yīng)的研究[J];內(nèi)蒙古大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2015年01期

5 張蓉;石鵬展;楊云霜;瞿彬;武曉寒;;從腎陰虧虛探討核輻射損傷的中醫(yī)病因病機(jī)[J];湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào);2014年03期

6 梁棉勝;胡軍;劉小波;;龜齡集膠囊治療勃起功能障礙的療效觀察[J];實(shí)用中西醫(yī)結(jié)合臨床;2011年05期

7 郭軍;張春影;;龜齡集膠囊治療少弱精子癥的療效觀察[J];中國(guó)男科學(xué)雜志;2009年07期

8 張志偉;秦雪梅;樸晉華;;龜齡集的研究現(xiàn)狀[J];山西醫(yī)藥雜志;2009年02期

9 于雷;王劍鋒;劉麗波;鞠桂芝;;枸杞抗輻射損傷作用[J];中國(guó)公共衛(wèi)生;2007年10期

10 任占川;陳一勇;郭連魁;;龜齡集對(duì)大鼠大腦皮質(zhì)和紋狀體內(nèi)神經(jīng)絲蛋白表達(dá)的影響[J];解剖學(xué)雜志;2005年06期

本文編號(hào)：2785299