【摘要】：目的:探討寒熱交替刺激對大鼠肺及皮膚免疫功能的影響,以及玉屏風(fēng)散對大鼠衛(wèi)外功能的干預(yù)作用,為提高機(jī)體免疫防御功能提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1、分組:SPF級健康雄性Wistar大鼠108只,體重180-220g,按照隨機(jī)數(shù)字表法分為6組,每組18只,分別為:正常組(A組)、寒熱交替組(B組)、寒熱交替加中藥干預(yù)組(C組)、低免常溫組(D組)、低免寒熱交替組(E組)、低免寒熱交替加中藥干預(yù)組(F組)。2、造模及給藥:(1)免疫低下大鼠模型的制備:除正常組外,免疫低下組大鼠均皮下注射免疫抑制劑氫化可的松注射液20mg/(kg.d),連續(xù)注射5d。(2)寒熱交替刺激大鼠模型的制備:首先對大鼠進(jìn)行寒刺激,設(shè)定人工氣候箱RH(%)(50±4),T℃(0±2),每天刺激40分鐘;寒刺激結(jié)束后,緊接著對大鼠進(jìn)行熱刺激,設(shè)定人工氣候箱RH(%)(50±4),T℃(33±2),每天刺激20分鐘。(3)藥物干預(yù):每天定時(shí)將大鼠置于人工氣候箱接受寒熱交替刺激后,按照中藥給藥劑量等效換算方法計(jì)算,將玉屏風(fēng)散成人每日所需藥量換算成大鼠所需藥量為25g/kg,連續(xù)灌胃用藥,每天1次;同時(shí),其余組大鼠灌以相應(yīng)劑量的蒸餾水。3、檢測:(1)一般情況觀察:每日定時(shí)觀察并記錄各組大鼠的精神、活動(dòng)、毛色、關(guān)節(jié)、大便以及進(jìn)食飲水量、體重等一般情況。(2)形態(tài)學(xué)觀察:分別于實(shí)驗(yàn)第7d、14d、28d,采用HE染色,于光鏡下觀察不同時(shí)期各組大鼠肺及皮膚組織的病理形態(tài)學(xué)改變。(3)免疫指標(biāo)測定:分別于實(shí)驗(yàn)第7d、14d、28d,檢測大鼠氣管肺灌洗液(簡稱氣道液)中免疫球蛋白IgG含量;檢測大鼠肺及皮膚組織中T細(xì)胞亞群CD4~+、CD8~+以及細(xì)胞因子IL-1α、TNF-α含量。(4)檢測大鼠左肺濕/干重比(W/D)。結(jié)果:1、一般情況:與正常組相比,各模型組大鼠的精神、活動(dòng)、毛色、關(guān)節(jié)、大便、進(jìn)食飲水量以及體重等,分別在第7天、14天、28天不同時(shí)間段均發(fā)生了不同程度的改變,表現(xiàn)出一系列的病理癥狀。實(shí)驗(yàn)期間,大鼠在接受寒熱交替刺激后表現(xiàn)出了諸如精神萎靡、活動(dòng)度減少、身體蜷縮、扎堆、鼻部分泌物增多、背毛豎立凌亂、稀便、進(jìn)食飲水量減少、體重增長緩慢,部分大鼠出現(xiàn)足背水腫伴糜爛破潰,關(guān)節(jié)腫大等病理征。隨著干預(yù)時(shí)間的延長,動(dòng)物的行為學(xué)病理表現(xiàn)逐漸加重。2、形態(tài)學(xué)觀察:通過HE染色,經(jīng)電鏡下觀察大鼠肺及皮膚組織病理學(xué)變化可見,與正常組相比,寒熱交替組和低免寒熱交替組大鼠肺組織存在慢性炎細(xì)胞浸潤、淋巴細(xì)胞浸潤、纖維組織增生、肺泡萎縮等不同程度的損傷;而皮膚組織的病變程度則不明顯,或僅表現(xiàn)為低免模型組皮膚組織現(xiàn)少量淋巴細(xì)胞浸潤,結(jié)果證實(shí)寒熱交替刺激對于肺組織所造成的的病理損傷較皮膚組織更為明顯。3、免疫指標(biāo)T細(xì)胞亞群CD4~+、CD8~+:與正常組相比,寒熱交替組、低免常溫組、低免寒熱交替組大鼠肺及皮膚中CD4~+、CD8~+含量均明顯降低(P0.01),且以低免模型組肺及皮膚組織中指標(biāo)含量的降低最為顯著。與寒熱交替組相比,低免寒熱交替組大鼠肺及皮膚中CD4~+、CD8~+含量均降低(P0.01),寒熱交替加中藥干預(yù)組大鼠肺及皮膚中CD4~+、CD8~+含量均升高;與低免寒熱交替組相比,低免寒熱交替加中藥干預(yù)組大鼠肺及皮膚中CD4~+、CD8~+含量均升高(P0.01)。分別于第7天、14天、28天三個(gè)不同時(shí)間段,大鼠肺及皮膚組織中CD4~+、CD8~+的含量變化趨勢呈現(xiàn)一致性。4、免疫指標(biāo)細(xì)胞因子IL-1α、TNF-α:與正常組相比,寒熱交替組、低免常溫組、低免寒熱交替組大鼠肺及皮膚中IL-1α、TNF-α含量降低,且以低免模型組肺及皮膚組織中指標(biāo)含量的降低最為顯著(P0.01)。與寒熱交替組相比,低免寒熱交替組大鼠肺及皮膚中IL-1α、TNF-α含量均降低(P0.01),寒熱交替加中藥干預(yù)組大鼠肺及皮膚中IL-1α、TNF-α含量均明顯升高(P0.05或P0.01);與低免寒熱交替組相比,低免寒熱交替加中藥干預(yù)組大鼠肺及皮膚中IL-1α、TNF-α含量均明顯升高(P0.01)。分別于第7天、14天、28天三個(gè)不同時(shí)間段,大鼠肺及皮膚組織中IL-1α、TNF-α的含量變化趨勢呈現(xiàn)一致性。5、免疫指標(biāo)大鼠氣管肺灌洗液(簡稱氣道液)中免疫球蛋白IgG:與正常組相比,寒熱交替組、低免常溫組、低免寒熱交替組大鼠氣道液IgG含量均明顯降低,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,具有顯著性差異(P0.01);與低免常溫組相比,低免寒熱交替組大鼠氣道液IgG含量明顯降低,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01);與寒熱交替組相比,低免寒熱交替組大鼠氣道液IgG含量明顯降低,具有顯著性差異(P0.01);與寒熱交替組相比,寒熱交替加中藥干預(yù)組大鼠氣道液IgG含量均有不同程度的升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01);與低免寒熱交替組相比,低免寒熱交替加中藥干預(yù)組大鼠氣道液IgG含量也明顯升高,具有顯著性差異(P0.01)。6、左肺濕干重比(W/D):第7天時(shí),與正常組相比,寒熱交替組、低免常溫組、低免寒熱交替組大鼠左肺濕干重比(W/D)均明顯升高,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,具有顯著性差異(P0.01);第14天時(shí),低免寒熱交替組與正常組相比,大鼠左肺濕干重比(W/D)有所升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1、氫化可的松可導(dǎo)致大鼠免疫功能降低。2、寒熱交替刺激對大鼠的一般情況(精神活動(dòng)、皮膚毛色、關(guān)節(jié)、鼻部分泌物、糞便、進(jìn)食飲水量、體重)、免疫指標(biāo)(肺及皮膚中CD4~+、CD8~+、IL-1α、TNF-α含量,氣道液免疫球蛋白IgG含量)、左肺濕干重比(W/D)以及組織形態(tài)學(xué)均有明顯影響。其中,寒熱交替刺激對免疫低下組大鼠的影響比正常組更為明顯。3、玉屏風(fēng)散對大鼠的一般情況(精神活動(dòng)、皮膚毛色、關(guān)節(jié)、鼻部分泌物、糞便、進(jìn)食飲水量、體重)、免疫指標(biāo)(肺及皮膚中CD4~+、CD8~+、IL-1α、TNF-α含量,氣道液免疫球蛋白IgG含量)、左肺濕干重比(W/D)以及組織形態(tài)學(xué)均有明顯的改善及免疫調(diào)節(jié)作用。其中,玉屏風(fēng)散對正常組大鼠的免疫調(diào)節(jié)和改善作用優(yōu)于免疫低下組。4、分別于第7天、14天、28天不同時(shí)間段,大鼠肺組織與皮膚組織中免疫指標(biāo)(CD4~+、CD8~+、IL-1α、TNF-α)的含量變化趨勢呈現(xiàn)一致性,可見在寒熱交替刺激條件下,大鼠肺與皮膚在病理變化方面具有很大的相關(guān)性,這與“肺外合皮毛”的經(jīng)典闡述具有一致性。
【學(xué)位授予單位】：山西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5;R-332
【圖文】：

1 玉屏風(fēng)散對寒熱交替刺激模型大鼠進(jìn)食量的 2 玉屏風(fēng)散對寒熱交替刺激模型大鼠飲水量的圖 1、圖 2 顯示，分別于第 7 天、14 天、28 、低免常溫組、低免寒熱交替組大鼠進(jìn)食量及飲低免常溫組相比，低免寒熱交替組分別于第 7

玉屏風(fēng)散對寒熱交替刺激模型大鼠飲水量的的影響

**P＜0.01；與低免常溫組相比，△△P＜0.01；與寒熱交替交替組相比，★★P＜0.01。體重（g）7 天 14 天 283.50±17.28 338.83±12.40 245.33±6.19**299.17±6.65**269.17±7.33##323.33±10.88#279.67±7.15 291.00±22.95**226.33±23.83**△△#267.50±16.68**△△##266.83±3.60★★278.00±17.92

【參考文獻(xiàn)】

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