健脾益智法對(duì)MCAO大鼠腦水腫的作用及機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2020-08-06 06:08
【摘要】:本文基于“脾主運(yùn)化水濕”是津液代謝重要內(nèi)在機(jī)制的角度,從理論和實(shí)驗(yàn)兩個(gè)方面,探討健脾益智法對(duì)缺血性中風(fēng)后腦水腫的改善作用,從而完善“脾腦相關(guān)”理論,豐富“脾主運(yùn)化”理論的科學(xué)內(nèi)涵,為中醫(yī)藥臨床防治缺血性中風(fēng)的作用機(jī)制研究提供新的思路和方法。理論研究部分,本文首先從現(xiàn)代醫(yī)學(xué)角度,探討對(duì)缺血性中風(fēng)腦水腫的認(rèn)識(shí);其次,從中醫(yī)對(duì)缺血性中風(fēng)腦水腫的認(rèn)識(shí),提出從津液代謝角度降低腦水腫的思路,并進(jìn)一步提出“脾主運(yùn)化水濕”是津液代謝的重要內(nèi)在機(jī)制,脾胃升清降濁,清升濁降是人體內(nèi)部氣化過(guò)程中升降運(yùn)動(dòng)的一般規(guī)律,而這一生理活動(dòng)的進(jìn)行,主要以脾胃為樞紐;最后,基于津液代謝探討健脾益智法對(duì)缺血性中風(fēng)腦水腫的防治作用。實(shí)驗(yàn)部分,具體研究如下:1.目的:探討健脾益智法對(duì)缺血性中風(fēng)大鼠腦水腫的作用機(jī)制,及其對(duì)Na~+K~+-ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶活性變化和對(duì)MDA、SOD、CAT、GSH-Px等自由基損害的影響。2.方法:將180只13周齡,體重280-300g的SPF級(jí)健康雄性SD大鼠,適應(yīng)性飼養(yǎng)6天后,隨機(jī)分為正常組、模型組、中藥組,每組各60只。模型組、中藥組用線(xiàn)栓法制備大腦中動(dòng)脈栓塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,并進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)分,選取2-3分的大鼠。造模24h后,各組開(kāi)始給藥,正常組、模型組給與生理鹽水,中藥組給與健脾益智混懸液,均按1.44ml/100g,1次/日進(jìn)行喂藥。再按存活時(shí)間分為以下5個(gè)亞組:6h、12h、1d、3d、7d,每個(gè)亞組各12只。測(cè)定腦含水量;采用TTC染色法測(cè)定腦梗死體積;蛋白濃度的測(cè)定用BCA法,以牛血清白蛋白(BSA)作為標(biāo)準(zhǔn)品;MDA含量的測(cè)定,采用TBA比色法;SOD活性的測(cè)定,采用黃嘌呤氧化酶法;CAT活性的測(cè)定,CAT在一定條件下能直接分解其底物H_2O_2,使其濃度下降,則吸光度下降;GSH-Px活性的測(cè)定,以催化GSH氧化的反應(yīng)速度即單位時(shí)間內(nèi)GSH減少量來(lái)表示。3.結(jié)果:中藥組梗死體積較模型組顯著縮小,模型組術(shù)后1d的梗死面積最大(P0.05)。模型組中,腦缺血6h后,大鼠腦含水量開(kāi)始升高,術(shù)后1d達(dá)到高峰,之后逐漸下降,趨于正常,與正常組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);中藥組術(shù)后3d、7d腦組織含水量低于模型組,與模型組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),并在中藥治療第7d時(shí)達(dá)到最低。術(shù)后6h、12h、1d、3d,與正常組相比,模型組Na~+K~+-ATP酶活性顯著降低(P0.05);術(shù)后6h、12h、7d,與模型組相比,中藥組Na~+K~+-ATP酶活性顯著增加(P0.05)。術(shù)后6h、12h、3d,與正常組相比,模型組Ca~(2+)-ATP酶活性顯著降低(P0.05);術(shù)后6h、12h、3d、7d,與模型組相比,中藥組Ca~(2+)-ATP酶活性顯著增加(P0.05)。與模型組比較,中藥組的MDA含量除了術(shù)后1d外均顯著低于模型組(P0.05):而SOD活性除了術(shù)后6h、1d外,均顯著高于模型組(P0.05);CAT含量在術(shù)后3d、7d時(shí)與模型組差異有顯著性;GSH-Px含量除了術(shù)后6h外均顯著高于模型組。4.結(jié)論:(1)脾胃主升清降濁是津液氣化的內(nèi)在動(dòng)力,脾胃又為氣機(jī)之樞,是津液運(yùn)行輸布的內(nèi)在動(dòng)力,故“脾主運(yùn)化”是津液代謝的重要內(nèi)在機(jī)制。(2)健脾益智法可減少M(fèi)CAO大鼠腦含水量,與其能增加Na~+K~+-ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶活性有關(guān),考慮健脾益智法能通過(guò)降低腦水腫程度來(lái)改善缺血性中風(fēng)引起的腦功能障礙。(3)健脾益智法可促進(jìn)MCAO大鼠腦組織SOD、GSH-Px、CAT表達(dá)增加,減少M(fèi)DA的產(chǎn)生,抑制脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng),縮小腦梗死面積,保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的通透性和完整性,降低腦水腫程度,對(duì)缺血性中風(fēng)大鼠腦組織有明顯的保護(hù)作用。
【學(xué)位授予單位】:福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類(lèi)號(hào)】:R285.5
【學(xué)位授予單位】:福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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