【摘要】：中藥作為我國傳統(tǒng)藥物,傳統(tǒng)使用中以口服為主,藥物經(jīng)口進(jìn)入體內(nèi),經(jīng)過消化系統(tǒng)代謝后,進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng),在特定的部位與機體靶點相互作用而發(fā)揮藥效,再經(jīng)過體內(nèi)組織器官的代謝排出體外。然而,由于中藥主要來源于動物和植物,所以大多中藥具有生物的多樣性、變異性、成分復(fù)雜性等特性,并且藥物進(jìn)入體內(nèi)后,經(jīng)過吸收、代謝、分布、排泄以及成分之間的相互作用過程,使得體內(nèi)的成分更加復(fù)雜多樣。此外,由于受藥物的毒副作用影響,一般體內(nèi)藥物濃度和代謝物的量都會非常低。這些因素增加了中藥研究的難度,也成為中藥邁向國際化的主要阻礙屏障。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,分析檢測技術(shù)不斷提高,液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析技術(shù)具有高靈敏度、高準(zhǔn)確度和高選擇性的特點,使得生物樣品的分析檢測成為可能。因此,本文以檳榔和四磨湯口服液為研究對象,采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)研究其化學(xué)成分和體內(nèi)代謝過程,為它們的進(jìn)一步研究提供可參考的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。此外,本研究通過體外酶溫孵的方法初步研究檳榔堿在不同化學(xué)成分環(huán)境中的代謝行為,為中藥配伍減毒相關(guān)研究提供可借鑒的方法和思路。1.檳榔水提液和四磨湯口服液的化學(xué)成分分析。本研究以超高液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)為分析手段,通過一級質(zhì)譜數(shù)據(jù)、多級質(zhì)譜碎片數(shù)據(jù)、參考文獻(xiàn)和標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)譜數(shù)據(jù)確定結(jié)構(gòu)。結(jié)果從檳榔水提液中共鑒定出13個化合物,包括7個生物堿類成分,3個單寧類成分,3個氨基酸類成分。從四磨湯口服液中共鑒定出71個化合物,包括26個黃酮、14個生物堿、4個香豆素、5個氨基酸、7個有機酸、13個萜類和2個其他類化合物。2.檳榔血清藥物成分及尿液代謝成分研究。本研究以大鼠為實驗對象,檳榔水提液為藥物,連續(xù)多次口服灌胃給藥后,收集大鼠的尿液和血漿樣品,采用Thermo Scientific BDS Hypersil C18 色譜柱(150 mm ×2.1 mm,2.4 μm),以乙腈-0.1%甲酸水為流動相進(jìn)行梯度洗脫,于電噴霧線性離子阱軌道阱質(zhì)譜負(fù)離子模式下進(jìn)行檢測。結(jié)果從大鼠尿液和血漿中共鑒定出41個化合物,包括9個原型成分和32個代謝物。3.四磨湯口服液血清藥物成分及尿液代謝成分研究。本研究以四磨湯口服液作為供試液,大鼠為實驗對象,色譜分離選用Thermo HypersilBDS反相柱(2.1mm X 150mm,2.4 μm),以乙腈-0.1%甲酸水為流動相進(jìn)行梯度洗脫,電噴霧線性離子阱軌道阱質(zhì)譜正離子及負(fù)離子模式下進(jìn)行檢測,根據(jù)化合物的精確分子量和碎片離子信息進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果從大鼠尿液和血漿中共鑒定出38個化合物,包括12個原型成分和26個代謝產(chǎn)物。4.四磨湯口服液的體內(nèi)過程分析。本研究按照口服藥物的消化道歷程,研究四磨湯口服液多成分的總體代謝輪廓情況,通過液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對四磨湯口服液在腸壁酶、腸道菌和肝臟3個部位的代謝吸收情況進(jìn)行分析。結(jié)果從血液樣品中共鑒定出18個化合物,其中,15個化合物是以原型的形式存在,3個化合物是以代謝物的形式存在。5.檳榔堿在不同化學(xué)成分環(huán)境中在體外肝微粒體中的代謝程度研究。以體外肝微粒體溫孵法結(jié)合高效液相色譜法,比較檳榔堿單獨在肝微粒體中的代謝程度和檳榔堿在檳榔水提液中、四磨湯口服液中時被肝微粒體代謝的程度,以比較檳榔堿在不同化學(xué)成分環(huán)境下的代謝行為差異,從而從體外酶的角度解釋中藥配伍減毒的作用機制。結(jié)論:本文研究闡明了檳榔水提液和四磨湯口服液的化學(xué)成分,刻畫了檳榔水提液和四磨湯口服液經(jīng)口服給藥后在體內(nèi)的成分變化,為檳榔和四磨湯口服液在臨床應(yīng)用的安全性評價、藥理藥效作用研究、質(zhì)量控制等方面提供了良好的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ)。同時,體外酶的代謝實驗也為中藥配伍減毒機制的研究提供了具有借鑒意義的數(shù)據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5
【圖文】：

并結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)對比進(jìn)行化學(xué)成分確認(rèn)。結(jié)果從檳榔水提液中共鑒定了邋１３個化合逡逑物，化合物詳細(xì)信息見表１．２。其中包括７個生物堿類成分，３個單寧類成分，３個氨基逡逑酸類成分。質(zhì)譜總離子流圖（ＴＩＣ）見圖１．１，１３個化合物的結(jié)構(gòu)見圖１．２。逡逑} 歐ｍ邋｜邋｜逡逑Ｉ：邋Ｖ／逡逑政邋Ｉ邋廣、、Ｊ邋Ｊ邋Ｖ邋ｊ逡逑圖１．１．檳榔水提液負(fù)離子模式掃描總離子流圖逡逑２３逡逑

和３０８邋0３的分子質(zhì)量［８６］。以化合物３３為例，它給出的分子離子峰為》２／２邋５７９邋（＃玻罰保保常暴g罕４ｈ\0嗑]3?其二級譜碎片離子為邋ｗ／ｚ４５９邋［Ｍ－Ｈ－Ｃ８Ｈ８０］－，邋３３９邋［Ｍ－Ｈ－Ｃ１２Ｈ１６０５］－，邋３１３邋［Ｍ－Ｈ－Ｃ１ＧＨｉ８０８］－，逡逑２７１邋［Ｍ－Ｈ－Ｃ１２Ｈ２Ｑ０９：Ｔ，２３５邋［Ｍ－Ｈ－Ｃ１６Ｈ２４0８］－。因此，化合物３３被確認(rèn)為柚皮苷。它的逡逑碎片裂解圖及推測的質(zhì)譜裂解規(guī)律如圖２．１。逡逑化合物３７和新橙皮苷表現(xiàn)出了相同的分子組成，其分子離子峰分別為６０９逡逑（Ｃ２８Ｈ３５０１５）和６０９邋（Ｃ２ＳＨ３５０１５）。不僅如此，他們還有相似的二級譜裂解離子／？／ｚ４８９逡逑［Ｍ－Ｈ－Ｃ４Ｈ８0４］－，邋４４７邋［Ｍ－Ｈ－Ｃ６Ｈｉ0０５］－，邋４０３邋［Ｍ－Ｈ－ＣｇＨｕＯｅ］－，邋３４３邋［Ｍ－Ｈ－ＣｉｏＨｉｇＯｇ］＇，邋３２５逡逑［Ｍ－Ｈ－Ｃ１０Ｈ２0０９］－，邋３０１邋［Ｍ－Ｈ－Ｃ１２Ｈ２０Ｏ９］－，２８６邋［Ｍ－Ｈ－Ｃ１３Ｈ２３０９］＿，２４２邋［Ｍ－Ｈ－Ｃ１４Ｈ２３0ｉｉ］－，因逡逑此，化合物３７被認(rèn)定為橙皮苷。相似的，基于色譜表現(xiàn)和相似的質(zhì)譜裂解規(guī)律，７個黃逡逑酮苷類化合物（化合物１８，邋２４，邋２６，邋３１，４１，４２和４８被分別鑒定為忍冬苷，新圣葉苷，圣逡逑草枸櫞苷，野漆樹苷，異jㄜ�，忱@に兀罰埃埃模咸煙擒�，袐屬Y糗眨郟福罰擼福埂�。茰O幕仆義俠嗷銜錚ɑ希常

本文編號：2781888