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當(dāng)歸不同部位的化學(xué)成分與補(bǔ)血作用研究

發(fā)布時(shí)間:2020-08-05 15:45
【摘要】:當(dāng)歸為常用中藥材,具有補(bǔ)血活血,調(diào)經(jīng)止痛,潤(rùn)腸通便的功效。迄今為止,已發(fā)現(xiàn)的當(dāng)歸有效成分有多糖、揮發(fā)油、有機(jī)酸、黃酮等;藥理作用有改善貧血、調(diào)節(jié)子宮平滑肌、潤(rùn)腸等。然而,當(dāng)歸傳統(tǒng)以根入藥,關(guān)于當(dāng)歸資源的利用與報(bào)道基本上全集中在當(dāng)歸根的研究上,對(duì)其莖葉部位的化學(xué)成分及藥理學(xué)研究鮮有報(bào)道,造成了資源的大量的浪費(fèi);另一方面人們對(duì)于當(dāng)歸的研究多為干品,對(duì)于當(dāng)歸鮮品的研究也很少,因此本論文在前期實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,主要從化學(xué)成分以及補(bǔ)血作用兩個(gè)方面對(duì)當(dāng)歸不同部位及當(dāng)歸鮮品(榨汁液)與干品(水煎液)分別進(jìn)行了相關(guān)的研究,旨在為當(dāng)歸全藥材資源的綜合利用提供一定的科學(xué)依據(jù)。其內(nèi)容如下:一、當(dāng)歸不同部位的HPLC指紋圖譜、多糖含量及揮發(fā)性成分研究采用HPLC法建立了當(dāng)歸不同部位(根與莖葉)HPLC色譜圖,采用UV測(cè)定當(dāng)歸根與莖葉中多糖的含量,采用GC-MS檢測(cè)當(dāng)歸根與莖葉中的揮發(fā)性成分。結(jié)果顯示當(dāng)歸不同部位HPLC指紋圖譜、多糖含量、揮發(fā)性成分均具有一定的差異性,且當(dāng)歸根中阿魏酸的相對(duì)峰面積、多糖含量、揮發(fā)性主要成分Z-藁本內(nèi)酯與正丁烯基苯酞的相對(duì)含量均高于當(dāng)歸莖葉,旨在為擴(kuò)大當(dāng)歸藥材的用藥范圍提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。二、當(dāng)歸不同部位的補(bǔ)血作用研究采用乙酰苯肼建立血虛模型,造模第1天給予當(dāng)歸與莖葉水煎液灌胃治療,13天后取材,通過(guò)檢測(cè)其血常規(guī)、臟器指數(shù)、生化指標(biāo)以及肝脾HE染色病理切片觀察來(lái)探討當(dāng)歸不同部位(根與莖葉)對(duì)溶血性血虛小鼠的干預(yù)作用。結(jié)果顯示,與模型組相比,當(dāng)歸根與莖葉的各項(xiàng)指標(biāo)均具有一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05或P㩳0.01),另外,病理切片顯示當(dāng)歸莖葉水煎液和當(dāng)歸根水煎液均可減輕APH所致小鼠肝臟、脾臟細(xì)胞的點(diǎn)狀壞死及淤血。說(shuō)明當(dāng)歸根與莖葉對(duì)于溶血性貧血均具有一定的改善作用,且當(dāng)歸根的效果較好,但相對(duì)于模型組小鼠來(lái)說(shuō),當(dāng)歸莖葉各項(xiàng)指標(biāo)仍具有一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05或P㩳0.01),表明當(dāng)歸莖葉具有一定的可開(kāi)發(fā)價(jià)值。三、當(dāng)歸不同部位水煎液與榨汁液的HPLC指紋圖譜、多糖含量及揮發(fā)性成分研究采用HPLC法建立了當(dāng)歸不同部位(根與莖葉)水煎液與榨汁液HPLC色譜圖,采用UV測(cè)定當(dāng)歸不同部位(根與莖葉)水煎液與榨汁液多糖的含量,采用GC-MS檢測(cè)當(dāng)歸不同部位(根與莖葉)水煎液與榨汁液的揮發(fā)性成分。結(jié)果顯示當(dāng)歸不同部位水煎液與榨汁液HPLC指紋圖譜、多糖含量、揮發(fā)性成分均具有一定的差異性,且當(dāng)歸莖葉榨汁液中阿魏酸的相對(duì)峰面積、多糖含量、揮發(fā)性主要成分Z-藁本內(nèi)酯與正丁烯基苯酞的相對(duì)含量均高于當(dāng)歸莖葉水煎液;當(dāng)歸根榨汁液中除Z-藁本內(nèi)酯與正丁烯基苯酞的相對(duì)含量高于當(dāng)歸根水煎液外,多糖含量與阿魏酸相對(duì)峰面積均略低于當(dāng)歸根水煎液,旨在為當(dāng)歸鮮藥材的開(kāi)發(fā)利用提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。四、當(dāng)歸不同部位水煎液與榨汁液的補(bǔ)血作用研究采用乙酰苯肼建立血虛模型,造模第1天給予當(dāng)歸不同部位榨汁液與水煎液灌胃治療,13天后取樣,通過(guò)檢測(cè)其血常規(guī)、臟器指數(shù)、生化指標(biāo)以及肝脾HE染色病理切片觀察來(lái)探討當(dāng)歸不同部位(根與莖葉)水煎液與榨汁液對(duì)溶血性血虛小鼠的干預(yù)作用,結(jié)果顯示,與模型組相比,當(dāng)歸不同部位榨汁液與水煎液的各項(xiàng)檢測(cè)檢測(cè)指標(biāo)均具有一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義((P㩳0.05或(P㩳0.01);另外,病理切片顯示鮮當(dāng)歸榨汁液和當(dāng)歸水煎液均可減輕APH所致小鼠肝脾臟細(xì)胞的點(diǎn)狀壞死及淤血。說(shuō)明當(dāng)歸不同部位榨汁液與水煎液對(duì)溶血性血虛模型均具有一定的改善作用,且榨汁液效果較水煎液好,旨在為當(dāng)歸鮮品資源的開(kāi)發(fā)利用提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】:甘肅中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R285;R284.1
【圖文】:

HPLC色譜,當(dāng)歸,根重,復(fù)性


每次 10 uL,記錄色譜圖譜,以阿魏酸的保留時(shí)間和峰面積為參照,測(cè)的各主要色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積的 RSD 均<3 %,各指紋圖譜相似度在 0.984~1.000,表明儀器精密度良好。2.4.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)精密稱取當(dāng)歸根粉末約 0.5 g,按 2.2 項(xiàng)下制備供試品溶液,置于室溫,分別于 0 h,4 h,8.h,12.h,24.h,36.h 進(jìn)樣檢測(cè),記錄色譜圖譜,以阿魏酸的保留時(shí)間和峰面積為參照,測(cè)的各主要色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積的 RSD 均<3 %,各指紋圖譜相似度在 0.957~1.000,表明室溫下當(dāng)歸根供試品溶液在 36 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。2.4.3 重復(fù)性試驗(yàn)精密稱取當(dāng)歸根粉末約 0.5 g,平行 6 份,按 2.2 項(xiàng)下制備供試品溶液,按 2.3 項(xiàng)下分別進(jìn)樣檢測(cè),記錄色譜圖譜,測(cè)的各主要色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積的 RSD均<3%,各指紋圖譜相似度在 0.991~1.000,表明重復(fù)性良好,其色譜圖見(jiàn)圖 1-1。

HPLC色譜,阿魏酸,對(duì)照品,當(dāng)歸


當(dāng)歸不同部位的化學(xué)成分與補(bǔ)血作用研究2.5 當(dāng)歸根與莖葉 HPLC 指紋圖譜方法的建立[5-7]2.5.1 特征指紋峰的選擇將當(dāng)歸根與莖葉中各組分相對(duì)保留時(shí)間按從小到大的順序依次排列,并在每個(gè)相對(duì)保留時(shí)間下標(biāo)出該組分的相對(duì)面積,以相對(duì)峰面積≥1%來(lái)比較當(dāng)歸根與莖葉樣品中相同保留時(shí)間值的相對(duì)峰面積。2.5.2 參照峰的標(biāo)定本實(shí)驗(yàn)選擇保留時(shí)間為 27.60±0.13min 的色譜峰為參照峰計(jì)算各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)保留峰面積,即 10 號(hào)峰,因 10 號(hào)峰為阿魏酸,是藥典規(guī)定的指標(biāo)性成分,阿魏酸對(duì)照品 HPLC 色譜圖見(jiàn)圖 1-2。

色譜圖,當(dāng)歸,莖葉,色圖


當(dāng)歸不同部位的化學(xué)成分與補(bǔ)血作用研究二者共有峰 12 個(gè),除 10 號(hào)峰(阿魏酸)和 4 號(hào)峰外,其余的 9 個(gè)共有色譜峰中當(dāng)歸莖葉的相對(duì)峰面積均大于當(dāng)歸根的相對(duì)峰面積,且 2、13、14 號(hào)峰當(dāng)歸莖葉相對(duì)峰面積是當(dāng)歸根的 10 倍左右。除共有峰外,當(dāng)歸莖葉 6 號(hào)峰的相對(duì)峰面積(14.36%)也較大,在 10%以上;當(dāng)歸根中 10、24 號(hào)峰,即阿魏酸(8.099%)、藁本內(nèi)酯(71.973%)相對(duì)峰面積均較高于當(dāng)歸莖葉中阿魏酸(0.571%)與藁本內(nèi)酯(2.365%)相對(duì)峰面積。對(duì)比當(dāng)歸根與莖葉 HPLC 色譜圖可以看出,在 15~50 min 時(shí)間段,當(dāng)歸莖葉色譜峰較當(dāng)歸根多,尤其是在 15~30 min 時(shí)間段,當(dāng)歸莖葉除去已標(biāo)定的特征峰之外,還有許多色譜峰,表明當(dāng)歸莖葉中存在許多極性大成分。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2781697

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