【摘要】：目的:本研究從腸道微生態(tài)研究NASH“脾虛”病機(jī)實質(zhì),闡述“肝病實脾”理論論治NASH與腸粘膜穩(wěn)態(tài)重建關(guān)系,探討疏肝理脾方對NASH大鼠模型腸道菌群的影響。方法:實驗選用健康清潔級雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠60只。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周,分為兩組,其中一組隨機(jī)選取8只大鼠作為正常組,給予正常飲食。其余52只大鼠,給予蛋氨酸膽堿缺乏飲食(MCD飲食),MCD飲食的投放以10g/d/100g。8周后,正常飲食組(簡稱N)隨機(jī)抽取2只大鼠,蛋氨酸膽堿缺乏飲食組隨機(jī)選取4只大鼠對大鼠進(jìn)行病理造模評價,并從兩組中收集36個大鼠糞便樣本。剩余48只大鼠被隨機(jī)分為6組,分別為模型中藥低劑量組(簡稱ML)、模型中藥高劑量組(簡稱MH)、模型中藥低劑量對照組(簡稱MLD)、模型中藥高劑量對照組(簡稱MHD)、模型無中藥組(簡稱M)、模型無中藥對照組(簡稱MD)。ML組、MH組給予中藥灌胃的同時MCD飲食。MLD與MHD照組給予中藥同時予以正常飲食。M組為繼續(xù)MCD飲食,MD組為給予正常飲食。中藥低、高劑量分別給予0.92g/day,3.68g/day的中藥灌胃。中藥治療4周,對大鼠進(jìn)行大鼠糞便樣本的收集。整個實驗過程持續(xù)12周,期間保持各組大鼠進(jìn)食量相同,平均每周測量各組大鼠的體重。結(jié)果1.一般情況比較8周時正常組大鼠毛發(fā)光澤順滑,無脫毛現(xiàn)象,體重持續(xù)增加,大便粒大色黑。MCD飲食組大鼠毛發(fā)枯稿無光澤,毛發(fā)稀疏,體重持續(xù)降低,大便粒小色黃。12周時,MH組與MD組在體重、毛發(fā)、活動力等方面改善明顯。MHD組與MD組比較,在體重、毛發(fā)、活動力等方面改善明顯。2.肝臟組織HE染色MCD飲食組大鼠造模8周顯示大鼠肝臟肝細(xì)胞組織不同程度出現(xiàn)程度的脂肪變性和變性,可見炎癥細(xì)胞的浸潤和局部小壞死灶。造模12周時,M組大鼠肝臟病理表現(xiàn)為肝細(xì)胞氣球樣變性,肝小葉邊界模糊不清,肝細(xì)胞炎性浸潤,肝細(xì)胞壞死,邊界不清楚,可見肝纖維化。MHD組大鼠肝臟切片表現(xiàn)為肝臟脂肪沉積明顯較造第8周時減輕,肝小葉結(jié)構(gòu)邊界尚清楚,未見明顯炎癥組織浸潤。3.糞便腸道菌群16S rRNA高通量焦磷酸測序結(jié)果3.1物種組成分析所有樣本都注釋到了7個分類水平,并且在門水平上主要注釋到了13個門,其中主要以厚壁桿菌、擬桿菌、放線桿菌、變性桿菌為主,并且MHD組與N組在門水平上腸道結(jié)構(gòu)趨于相近。MH組與M組比較腸道菌群在門水平上也存在明顯差異。在屬水平上,N組和MHD組在屬水平上豐度無明顯差異。3.2大鼠腸道糞便樣本的alpha多樣性分析MLD組和MHD組、ML組和MH組在豐富度(chao1)和多樣性(shannon)上比較二者無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),表明中藥劑量的高低對腸道菌群豐富度和多樣性無明顯影響。MHD組與MD組比較腸道菌群的豐富度和多樣性,具有顯著差異性,比較無顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。且MHD組與正常組比較,二者無明顯顯著差異性。3.3大鼠腸道糞便樣本的bate多樣性分析N組與造模第8周時糞便腸道菌群比較表明兩者腸道菌群結(jié)構(gòu)差異性明顯,兩者比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。ML組與MH組比較,MLD組與MHD組在距離上相差較遠(yuǎn),腸道菌群結(jié)構(gòu)上比較有明顯差異(P0.05),MHD組與MD組比較腸道菌群結(jié)構(gòu)具有顯著差異(P0.05),MHD組與N組比較無明顯差異性,二者具有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。MH組與M組比較,二者在腸道菌群豐度和多樣性方面具有顯著差異(P0.05)。4.結(jié)論1.采用蛋氨酸膽堿缺乏飲食(MCD飲食)成功的誘導(dǎo)產(chǎn)生的NASH大鼠模型,并且改變了腸道菌群的結(jié)構(gòu),損傷了腸道粘膜屏障。2.單純低劑量中藥干預(yù)對腸道菌群的豐度和多樣性產(chǎn)生了影響,但是,并無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。高劑量中藥干預(yù)對腸道菌群的豐度和多樣性影響明顯,能夠在一定程度上恢復(fù)大鼠腸道菌群的豐度,降低腸道菌群的多樣性,調(diào)節(jié)腸道穩(wěn)態(tài)性。
【學(xué)位授予單位】：湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5
【圖文】：

肝小葉邊界清晰，未見炎癥浸潤。造模組 8 周時顯組織不同程度出現(xiàn)程度的脂肪變性和變性，可見大量肝細(xì)胞常肝細(xì)胞明顯增大，肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大量脂肪滴，并把細(xì)胞核戒征 。可見散在點狀壞死灶，壞死區(qū)可見少量炎癥細(xì)胞浸HE 染色比較明顯差異（見圖 2）。造模 12 周時，M 組大鼠肝臟組織臟病理表現(xiàn)為肝細(xì)胞氣界模糊不清，肝細(xì)胞炎性浸潤，肝細(xì)胞壞死，邊界不清楚，組大鼠肝臟組織仍可見較多了肝細(xì)胞脂肪浸潤，肝小葉結(jié)構(gòu)浸潤。MD 組大鼠肝細(xì)胞病理可見肝細(xì)胞脂肪浸潤較 M 組明顯正常，肝小葉結(jié)構(gòu)邊界尚清楚，未見明顯炎癥組織浸潤。ML視野仍可見有肝細(xì)胞脂肪堆積，肝細(xì)胞體積稍大，偶可見少許組大鼠肝組織病理表現(xiàn)肝細(xì)胞脂肪堆積明顯減少，肝小葉結(jié)胞的浸潤。（見圖 3）

MD 組大鼠肝細(xì)胞病理可見肝細(xì)胞脂肪浸潤較 M 組明顯減少，肝細(xì)胞正常，肝小葉結(jié)構(gòu)邊界尚清楚，未見明顯炎癥組織浸潤。MLD 組大鼠肝組視野仍可見有肝細(xì)胞脂肪堆積，肝細(xì)胞體積稍大，偶可見少許炎癥細(xì)胞浸潤組大鼠肝組織病理表現(xiàn)肝細(xì)胞脂肪堆積明顯減少，肝小葉結(jié)構(gòu)正常，未見胞的浸潤。（見圖 3）圖 1.正常肝臟外觀（左）與造模 8 周時肝臟外觀（右）對比圖。

左）、MH 組（中）與 MHD 組（右）肝臟病理（*2A 高通量焦磷酸測序結(jié)果果處理主要采用 Illumina MiSeq 測序平臺對本次研究中然后通過 barcode 拆分，最后獲得其中的有效序了 3276796 條序列，測得的樣本中最大的序列為，平均測到了 45511 條序列。通過使用 Qiime2 軟，去除錯誤的序列、去除其中拼接的序列及嵌合列。所有樣本得到的 OUT 為 1820111 條，樣本中小為 18214 條，平均為 25276 條。（見圖 4）

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4 常佩亮;夏薇;張宇;張宇秋;趙秀娟;;大鼠腸道菌群對芹菜素代謝影響[J];中國公共衛(wèi)生;2008年03期

5 任林,李邦良,高仕瑛,陳超群,薛金花;甲殼低聚糖對抗生素脫污染小鼠腸道菌群的影響[J];實用預(yù)防醫(yī)學(xué);2001年01期

6 于勇;施志國;王亞平;祝小楓;藍(lán)復(fù)生;游瑞蘭;常國友;;燒傷后大鼠腸道菌群的改變及其易位[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;1989年01期

7 譚迪;李俊媛;商雪琪;馬堅妹;郭艷杰;趙子楠;辛毅;;運(yùn)動對小鼠腸道菌群的影響[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2017年11期

8 吳三林;劉芳;羅小琴;劉超;;灌服雪蓮果粉對小鼠腸道菌群的影響[J];西南師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2012年02期

9 史先振;朱圣陶;賀峰;;木糖調(diào)節(jié)小鼠腸道菌群作用的研究[J];食品科學(xué);2009年01期

10 石學(xué)魁,董艷,張義舉,劉亞威,徐曉焱;黃連水煎劑對小鼠腸道菌群的影響[J];牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2001年01期

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3 周波;王曉紅;宋儒;郭連營;張卓;徐超;;玉米紫色植株花色苷色素對小鼠腸道菌群影響的實驗研究[A];中國營養(yǎng)學(xué)會營養(yǎng)與保健食品分會第五屆學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2007年

4 廖呂燕;馬玉芳;李健;黃一帆;;“芪苓”制劑多糖對環(huán)磷酰胺免疫損傷小鼠腸道菌群的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會2010年學(xué)術(shù)年會——第二屆中國獸醫(yī)臨床大會論文集(下冊)[C];2010年

5 康超;張勇;朱曉輝;汪小蘭;陳夢婷;王斌;糜漫天;;辣椒素對高脂膳食誘導(dǎo)肥胖小鼠腸道菌群的影響[A];第十二屆全國營養(yǎng)科學(xué)大會論文匯編[C];2015年

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7 康樹敏;錢麗娟;蔣犁東;;生命早期不同環(huán)境對小鼠腸道菌群定植及其哮喘的氣道炎癥影響[A];第十三屆江浙滬兒科學(xué)術(shù)會議暨2016年浙江省醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2016年

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2 關(guān)樂;益脈顆�？箘用}粥樣硬化的療效機(jī)制研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2019年

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9 劉曉飛;腸道菌群在膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎中的作用及機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2017年

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3 周坤;連續(xù)多代飲用四種飲用水對小鼠腸道菌群影響的研究[D];南昌大學(xué);2019年

4 滕威;花鼠腸道菌群結(jié)構(gòu)的季節(jié)變化[D];東北林業(yè)大學(xué);2019年

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本文編號：2781131