【摘要】：目的:青光眼是世界第二致盲眼病,濾過性手術(shù)現(xiàn)今仍是臨床上治療青光眼主要的手術(shù)方式。而濾過泡瘢痕形成是青光眼濾過性手術(shù)失敗的主要原因,其病理改變主要是由于Tenon囊和球結(jié)膜之間成纖維細(xì)胞增生、膠原合成增加,導(dǎo)致結(jié)膜下組織纖維化及其瘢痕收縮。研究顯示,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β在青光眼術(shù)后濾過泡瘢痕形成中起著重要作用。雷公藤甲素(Triptolide,TP)是我國(guó)傳統(tǒng)中藥雷公藤的有效成分,具有多種藥理作用包括抗炎、免疫調(diào)節(jié)和抑制細(xì)胞增殖等。本研究探討雷公藤甲素對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-β誘導(dǎo)人Tennon囊成纖維細(xì)胞(HTFs)收縮及產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)的影響。方法:Ⅰ型膠原三維凝膠培養(yǎng)人Tenon囊成纖維細(xì)胞,TGF-β及雷公藤甲素進(jìn)行干預(yù)培養(yǎng)。通過測(cè)量三維凝膠的直徑來評(píng)估Tenon囊成纖維細(xì)胞的收縮變化;收集三維凝膠培養(yǎng)的Tenon囊成纖維細(xì)胞,通過免疫印跡法(Western blot)檢測(cè)肌球蛋白輕鏈磷酸化(MLC)、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)的變化并收集上清,通過ELISA法檢測(cè)細(xì)胞外基質(zhì)纖維粘連蛋白(FN)的產(chǎn)生。結(jié)果:雷公藤甲素抑制TGF-β誘導(dǎo)的由Tenon囊成纖維細(xì)胞介導(dǎo)的Ⅰ型膠原三維凝膠的收縮,并呈現(xiàn)時(shí)間及計(jì)量依賴性。雷公藤甲素抑制了TGF-β誘導(dǎo)的三維凝膠培養(yǎng)的Tenon囊成纖維細(xì)胞內(nèi)MLC磷酸化,而對(duì)細(xì)胞內(nèi)α-SMA表達(dá)沒有影響。此外,雷公藤甲素還抑制了細(xì)胞外基質(zhì)FN的產(chǎn)生。實(shí)驗(yàn)濃度下的TP對(duì)細(xì)胞沒有毒性。結(jié)論:本研究顯示雷公藤有效成分雷公藤甲素(TP)能抑制Tenon囊成纖維細(xì)胞的收縮,其機(jī)制可能涉及對(duì)細(xì)胞內(nèi)MLC磷酸化的抑制;此外雷公藤甲素還抑制了細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生。因此,雷公藤甲素可能通過影響細(xì)胞外基質(zhì)的重塑而抑制青光眼濾過術(shù)后濾過道處結(jié)膜組織的瘢痕形成。
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285
【圖文】：

TP 對(duì)未添加 TGF-β 的三維凝膠收縮沒有明顯作用（○）。圖 4.1B 為人 Tenon 囊成纖維細(xì)胞的介導(dǎo)的三位凝膠收縮三天時(shí)的實(shí)物照。圖4.1 不同濃度的TP 對(duì)三維凝膠培養(yǎng)人Tenon囊成纖維細(xì)胞收縮的影響○ 表示 None+TP ● 表示 TGF-β+TP

圖 4.2 TP 對(duì)三維凝膠培養(yǎng)人Tenon囊成纖維細(xì)胞收縮的影○表示 None+TGF-β ●表示 TGF-β+TP.3 TP 對(duì)三維凝膠培養(yǎng)的人 Tenon 囊成纖維細(xì)胞的毒將 4.1.1 中收集的培養(yǎng)上清用于細(xì)胞毒性檢測(cè)。結(jié)果顯示本實(shí)驗(yàn) TP 對(duì)三維凝膠培養(yǎng)的人 Tenon 囊成纖維細(xì)胞無(wú)毒性作用； 照（圖 4.3）。

賴作用膠培養(yǎng)人 Tenon 囊成纖維細(xì)胞分為對(duì)照組（無(wú) TP /L 濃度 TP），添加 1 ng/ml TGF-β 后培養(yǎng)三天，每天膠原凝膠收縮程度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：添加 TGF-β 可纖維細(xì)胞介導(dǎo)的三維凝膠的收縮（○），這種作用隨時(shí)nmol/L 濃度 TP 培養(yǎng)后， TP 可明顯抑制 TGF-β 所誘，這種抑制作用在 2 天時(shí)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其抑制作.2）。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

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本文編號(hào)：2780791