【摘要】：昆蟲藥材是中藥材動物藥材的重要組成部分,斑蝥是傳統(tǒng)的昆蟲藥材,藥典收載品種芫青科昆蟲南方大斑蝥Mylabris phalerata Pallas或黃黑小斑蝥Mylabris cichorii Linnaeus是斑蝥素提取的主要來源;隨著斑蝥素的需求量越來越大,尋找斑蝥素的新資源也是從事動物藥研究和開發(fā)的科技工作者必須思考的問題,該論文根據(jù)以上思路設(shè)計了整個論文的實驗內(nèi)容。論文選擇了北方常見但鮮有研究的品種綠芫菁來開展了以下幾方面研究:1.藥典斑蝥品種資源初步調(diào)查該調(diào)查是結(jié)合課題組承擔(dān)的國家林業(yè)局全國陸生野生動物第二次調(diào)查來開展的。主要目的是借用該機會訓(xùn)練研究生的實驗樣本采集技能。調(diào)查結(jié)果顯示,在玉林市興業(yè)縣和南寧市共12個地區(qū)調(diào)查到了大斑芫菁及眼斑芫菁分布,且數(shù)量較大。2.綠芫菁昆蟲斑蝥素提取該部分將綠芫菁與藥典收載的兩個品種做了比較。2015版藥典中對大斑芫菁和眼斑芫菁的提取方法采用氯仿超聲提取法,本論文使用藥典規(guī)定的超聲提取法,但溶劑為丙酮。為確定兩種溶劑提取率的差異,對比對綠芫菁斑蝥素提取效率影響,本試驗按照2015版藥典含量測定方法對綠芫菁和藥典收載的兩個品種進(jìn)行對比試驗,對比二者出峰情況、峰面積和提取率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)綠芫菁斑蝥素含量為0.932%(大斑芫菁斑蝥素的含量為1.014%,眼斑芫菁斑蝥素含量為0.9%),中國藥典規(guī)定斑蝥素含量不低于0.35%,由此可見綠芫菁可作為斑蝥素潛在的來源。3.UPLC-QTOF-MS高分辨質(zhì)譜定性分析通過UPLC-QTOF-MS高分辨質(zhì)譜定性分析綠芫菁,共得到144個成分;所有數(shù)據(jù)采用Mass Lynx 4.1(Waters Corporation,Milford,MA,USA)軟件進(jìn)行分析處理,其中包含很多同分異構(gòu)體。再次經(jīng)過UNIFI圖譜庫比對和查閱參考文獻(xiàn),共鑒別分出49種成分,并得到其名稱。其中,就目前分析推測出的物質(zhì)來看,綠芫菁所含的活性物質(zhì)較為豐富,這些物質(zhì)的作用和影響,有待未來更深入的研究。由于對斑蝥藥材成分分析方面的研究報道少,缺少更深入的照圖譜來對比分析,使得綠芫菁藥材中仍有大量物質(zhì)成分僅僅通過質(zhì)譜還無法鑒定,今后還需要結(jié)合多種方法來開展研究和探索。4.斑蝥素和部分衍生物抗腫瘤、抗菌活性分析廣西是鼻咽癌高發(fā)的地區(qū),該論文主要選取了高分化鼻咽癌細(xì)胞(CNE1)和低分化鼻咽癌細(xì)胞(CNE2)再同時選取了宮頸癌細(xì)胞(HELA)、人前列腺癌細(xì)胞系(DU145)開展了抗腫瘤、抗菌活性分析。選擇一株人胚腎細(xì)胞系(293T)正常細(xì)胞株作為對比。通過MTT法和CCK8法,選取四種綜合對比研究較少的甲基斑蝥胺、斑蝥素、去甲斑蝥素和去甲斑蝥酸鈉,對所選四株腫瘤細(xì)胞進(jìn)行體外抑制實驗。結(jié)果表明,斑蝥素、去甲斑蝥素和去甲斑蝥酸鈉對腫瘤細(xì)胞的抑制作用明顯,且IC50值均小于17,但對人體正常細(xì)胞均有一定危害,其中斑蝥素最為顯著。甲基斑蝥胺對四種腫瘤細(xì)胞的抑制效果不明顯,其對人正常細(xì)胞的危害均小于同濃度下斑蝥素、去甲斑蝥素和去甲斑蝥酸鈉。斑蝥素及衍生物在抑菌方面一直少有報道。針對臨床常見的一些耐藥菌,本文開展了部分抑菌研究。實驗中選取斑蝥素、去甲斑蝥素、去甲斑蝥酸鈉和甲基斑蝥胺四種,針對變形桿菌(Proteusbacillus vulgaris)、腸道沙門氏菌(Salmonella enterica)、綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa)、枯草桿菌(Bacillus subtilis)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大腸桿菌(Escherichiacoli)六種常見臨床耐藥性細(xì)菌進(jìn)行抑菌活性測試,實驗結(jié)果均為陰性。
【學(xué)位授予單位】：廣西師范學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：O657.63;R284;R285
【圖文】：

圖 1-1 斑蝥素目（Coleoptera）芫菁科（Meloidae）的昆蟲蝥素，故被我國及西方醫(yī)學(xué)運用已有一定歷考查了我國 5 省區(qū)內(nèi)的芫菁資源，并對這 含量進(jìn)行了測定[18]。袁鋒等選取陜西省分布探索其內(nèi)部斑蝥素含量，同時對含斑蝥素類的研究報道表明，大斑芫菁和眼斑芫菁以及是比較廣泛的，從北方到南方均有分布，產(chǎn)這五個地區(qū)；斑蝥成蟲喜歡吃荔枝、龍眼和錄的含有斑蝥素的昆蟲一共有 14 屬 150 余蟬科（Fulgoridae）的 3 屬；擬天�？疲�

所以實驗選用230nm為檢測波長。色譜柱為安捷倫公司的C18色譜柱（250mm×4.6mm，5.0μm）；流動相為甲醇：水=23:77；流速為1.0mL/min；檢測波長為230mm，見圖3-1；斑蝥素的理論板數(shù)應(yīng)當(dāng)大于等于3000（按斑蝥素峰值計算）；柱溫為35℃；進(jìn)樣量為10μL。圖 3-1 綠芫菁的紫外吸收光譜圖

圖 3-3 綠芫菁含量測定譜圖表 3-9 樣品含量測定實驗結(jié)果序號 斑蝥素峰面積 平均峰面積 含量（%） 平均含量1 252.243255.1940.9272 258.595 0.9000.933 254.744 0.969表 3-10 藥典方法下樣品含量測定實驗結(jié)果序號 斑蝥素峰面積 平均峰面積 含量（%） 平均含量1 173.241174.4400.8032 178.735 0.7910.793

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 邵帥;王春燕;李寧;茍巧;田梅;鄭輝;;去甲斑蝥酸鈉脂質(zhì)微球注射液對荷人肺癌A549移植瘤裸鼠腫瘤生長的抑制作用[J];癌變·畸變·突變;2015年04期

2 杜洪飛;曾瑤波;張毅;劉曉玲;;斑蝥類化合物及其衍生物的基本概況和研究進(jìn)展[J];世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化;2014年04期

3 劉亞楠;;中藥斑蝥研究進(jìn)展[J];中藥與臨床;2013年04期

4 李曉飛;晏容;劉云;婁方明;;大斑芫菁揮發(fā)性成分的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析[J];湖北農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年13期

5 孫文博;劉中一;張雅林;;去甲斑蝥素酰胺類衍生物的合成及殺蟲活性[J];西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2013年07期

6 劉小松;張一方;國光梅;汪冶;;斑蝥乙酸乙酯部位化學(xué)成分研究[J];山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報;2013年02期

7 岳麗紅;李巖巖;陳鳳嵐;隋樹杰;頓圓圓;羅志文;;佳木斯地區(qū)綠芫菁生物學(xué)特性及其藥用價值分析[J];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技;2012年05期

8 李俊;苑紅燕;王軍;劉江云;蔡培烈;楊世林;;斑蝥中斑蝥素提取工藝研究[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2011年02期

9 孫國祥;趙梓余;雒翠霞;;復(fù)方斑蝥膠囊高效液相色譜數(shù)字化指紋圖譜研究[J];中南藥學(xué);2010年09期

10 王賢英;楊瓊芳;謝香菊;;不同提取方法對斑蝥中斑蝥素含量測定的影響[J];中成藥;2010年05期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 蔣文娟;去甲斑蝥酸鈉對鼻咽癌CNE-2細(xì)胞株體外放射敏感性的影響[D];中南大學(xué);2012年

2 汪威;斑蝥纖溶活性蛋白的提取純化及其作用性質(zhì)研究[D];廣東工業(yè)大學(xué);2011年

3 柴衛(wèi)利;僵蠶提取物、斑蝥素及其衍生物的抑菌活性研究[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2010年

本文編號：2780746