【摘要】：目的:觀察解毒通絡(luò)方對(duì)心肌纖維化大鼠CTGF和TGF-β1表達(dá)的影響,初步探討解毒通絡(luò)方介導(dǎo)TGF-β1-CTGF途徑干預(yù)心肌纖維化的機(jī)制。方法:36只8周齡SD雄性大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組,模型組,解毒通絡(luò)方低、中、高劑量組和ACEI組,每組各6只。對(duì)照組給予5mg/kg體重生理鹽水,其余各組給予5mg/kg體重鹽酸異丙腎上腺素(ISO)腹腔注射,造成心肌缺血損傷模型,從造模當(dāng)天開(kāi)始,解毒通絡(luò)方低、中、高劑量組每只大鼠每天給予濃度為1g/ml的解毒通絡(luò)方原藥混懸液10、20、30ml/kg體重灌胃,ACEI組給予濃度為0.5mg/ml的卡托普利混懸液10ml/kg體重灌胃。CK組給予等量蒸餾水灌胃。于造模后3d,末次給藥24h后處死,取大鼠心尖部位,Masson三色染色觀察計(jì)算各組膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF),免疫組化法檢測(cè)TGF-β1和CTGF蛋白在心肌組織中的表達(dá),RT-PCR法檢測(cè)TGF-β1和CTGFmRNA的表達(dá)情況。結(jié)果:1.MF組心肌組織中TGF-β1和CTGF蛋白和mRNA的表達(dá)對(duì)比CK組顯著增高(P0.05)2.解毒通絡(luò)方高、中、低劑量組心肌組織中TGF-β1和CTGF蛋白和mRNA的表達(dá)對(duì)比MF組顯著降低(P0.05)3.解毒通絡(luò)方高、中、低劑量組組間對(duì)比無(wú)明顯差異(P0.05)。結(jié)論:解毒通絡(luò)方可能通過(guò)抑制TGF-β1和CTGF蛋白的表達(dá)減緩了心肌纖維化的發(fā)展。
【學(xué)位授予單位】：長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

心肌細(xì)胞出現(xiàn)廣泛壞死，形成明顯纖維化病灶，灶內(nèi)成纖維細(xì)胞增生，解毒通絡(luò)方各組及ACEI組心肌細(xì)胞結(jié)構(gòu)尚算完整，心肌纖維腫脹，排列疏松，偶見(jiàn)心肌細(xì)胞壞死，其中以中、高劑量組改善最為明顯。見(jiàn)圖1。圖1：大鼠心肌組織HE染色結(jié)果

藍(lán)色膠原纖維少見(jiàn)。模型組可見(jiàn)大片的藍(lán)色膠原纖維沉積，特別是壞死灶內(nèi)心機(jī)間質(zhì)膠原纖維明顯增多。解毒通絡(luò)方各劑量組及ACEI組正常心肌細(xì)胞周圍可見(jiàn)少量沉積膠原，壞死灶內(nèi)沉積明顯。見(jiàn)圖2。圖 2 大鼠 Masson 染色結(jié)果（200×）1.2.2各組大鼠每只隨機(jī)選取5張切片，選定心內(nèi)膜心肌壞死灶高發(fā)部位隨機(jī)選�。�200×）視野5個(gè)，以計(jì)算機(jī)圖像分析，計(jì)算膠 原容積分?jǐn)?shù)（CVF%），公式為：CVF%=膠原面積/視野面積×100%。與CK組相比，MF組大鼠的CVF顯著升高（p<0.01）,與MF組相比，解毒通絡(luò)方低中高劑量組和ACEI組 CVF顯著下降（p<0.05）。見(jiàn)表1。表 1 大鼠 Masson 染色心肌膠原容積分?jǐn)?shù)（% x ±s）注：與對(duì)照組比較，*P<0.01；與模型組比較，△P<0.01。組別 心肌膠原容積分?jǐn)?shù)（%）對(duì)照組 4.14±1.45模?

2.1經(jīng)免疫組化染色之后，TGF-β1蛋白在心肌細(xì)胞中以棕黃色顆粒存在，鏡下可見(jiàn)：對(duì)照組未見(jiàn)明顯的陽(yáng)性表達(dá)，模型組可見(jiàn)心內(nèi)膜周圍明顯棕黃色染色，表達(dá)強(qiáng)烈，解毒通絡(luò)方各組和ACEI組棕黃染色減少。見(jiàn)圖3、4。圖3：各組大鼠TGF-β1免疫組化染色結(jié)果（200×）圖4：各組大鼠CTGF免疫組化染色結(jié)果（200×）

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