【摘要】：淋巴瘤是一種淋巴造血系統(tǒng)的惡性腫瘤,患者全身各組織器官均可受損,并伴隨著發(fā)熱、盜汗、消瘦等全身的癥狀。目前淋巴瘤發(fā)病的主要原因包括自身免疫因素、物理因素等,但淋巴瘤的發(fā)病機(jī)理尚不清楚。本實(shí)驗通過研究U937淋巴細(xì)胞初步探索槐耳清膏的免疫調(diào)節(jié)作用,通過CD4~+CD25~+Treg細(xì)胞深入研究淋巴瘤發(fā)展過程,為淋巴瘤治療提供理論依據(jù)。首先本實(shí)驗采用U937淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)小鼠淋巴瘤模型,通過對小鼠肺、肝臟和腎檢測以及對小鼠體內(nèi)細(xì)胞因子的分析來探究槐耳清膏的初步免疫作用,結(jié)果表明槐耳清膏預(yù)處理能減輕淋巴瘤小鼠的肺、肝臟和腎組織損傷,減少淋巴瘤小鼠體內(nèi)T_H1型和T_H2型細(xì)胞因子分泌,且槐耳清膏預(yù)處理對淋巴瘤小鼠的治療效果比醋酸波尼松片更顯著。其次,為了探究槐耳清膏對淋巴細(xì)胞U937的免疫調(diào)節(jié)作用,我們研究了槐耳清膏對淋巴細(xì)胞活力的影響,發(fā)現(xiàn)槐耳清膏對淋巴細(xì)胞增殖有抑制作用。同時從轉(zhuǎn)錄水平對IFN-γ和IL-10進(jìn)行分析,結(jié)果表明兩種細(xì)胞因子的表達(dá)水平與槐耳清膏的濃度呈正相關(guān)。此外我們也用ELISA方法對胞內(nèi)蛋白進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)U937細(xì)胞能表達(dá)高水平的IFN-γ和低水平IL-10。同時線粒體作為調(diào)節(jié)干擾素的控制中心,隨著槐耳清膏濃度的不斷增加,線粒體膜電位下降,線粒體的完整性遭到了破壞。最后,為了進(jìn)一步探究淋巴瘤具體的發(fā)病機(jī)制,我們使用A20細(xì)胞誘導(dǎo)移植腫瘤模型,重點(diǎn)探究槐耳清膏對CD4~+CD25~+Treg細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用。在模型組中,IL-6和IL-10表達(dá)水平顯著提高,意味著CD4~+CD25~+Treg細(xì)胞可能對IL-10和IL-6進(jìn)行上調(diào)。作為CD4~+CD25~+Treg細(xì)胞的輔助標(biāo)記物Foxp3蛋白,我們發(fā)現(xiàn)了模型組中Foxp3的表達(dá)量在胸腺內(nèi)顯著增加。同時通過磁珠篩選得到淋巴瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg細(xì)胞的含量在胸腺和肝臟內(nèi)增加,外周血和脾臟內(nèi)減少,這表明CD4~+CD25~+Treg細(xì)胞在外周血和脾臟內(nèi)的減少可能導(dǎo)致淋巴瘤。以上結(jié)果表明,槐耳清膏預(yù)處理對淋巴瘤小鼠的治療效果比醋酸波尼松片更顯著,槐耳清膏能抑制淋巴細(xì)胞的增殖,增加外周血和脾的CD4~+CD25~+Treg細(xì)胞的數(shù)量,減少肝臟和胸腺的CD4~+CD25~+Treg細(xì)胞的數(shù)量,表明CD4~+CD25~+Treg細(xì)胞與淋巴瘤的生長和增殖密切相關(guān)。這些結(jié)果表明了槐耳清膏能抑制淋巴瘤的發(fā)生和發(fā)展,為淋巴瘤的治療提供更好的依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：大連理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2772874