【摘要】：第一章文獻(xiàn)綜述本章分別對(duì)乳香、沒(méi)藥及二者配伍效應(yīng)成分群的現(xiàn)代研究進(jìn)行了較為系統(tǒng)的歸納整理,并綜述了乳香-沒(méi)藥配伍抗腫瘤活性的研究進(jìn)展,為乳香-沒(méi)藥配伍抗腫瘤作用的深入研究和現(xiàn)代臨床應(yīng)用提供了基礎(chǔ)和依據(jù)。第二章乳香、沒(méi)藥及其藥對(duì)總萜部位的制備與分析本章采用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(UPLC-TQ/MS)技術(shù),對(duì)乳香、沒(méi)藥配伍前后萜類成分的溶出量進(jìn)行分析與評(píng)價(jià),以期從化學(xué)成分溶出的角度探討乳香-沒(méi)藥配伍的合理性;對(duì)乳香-沒(méi)藥藥對(duì)總萜部位的制備工藝進(jìn)行優(yōu)化,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)樣品的制備方法提供參考,結(jié)果如下:1.乳香、沒(méi)藥配伍前后萜類成分溶出量測(cè)定結(jié)果顯示,10個(gè)萜類成分在單味藥材中的總?cè)艹隽繛?.02%,在配伍后總?cè)艹隽匡@著增加至3.40%。配伍后除松香酸的溶出量低于在沒(méi)藥單味藥中的溶出量外,其余9個(gè)萜類成分的溶出量普遍增加,其中以3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸、β-乳香酸和乙酰11α-甲氧基-β-乳香酸的溶出量增加最為顯著,與配伍前比較分別增加0.54%、0.33%和0.24%。2.制備工藝優(yōu)化研究結(jié)果顯示,乳香-沒(méi)藥藥對(duì)中萜類成分的最佳提取工藝為95%的乙醇12倍量回流提取2 h,共2次,在此條件下萜類成分的總含量為1.70%。純化工藝優(yōu)化結(jié)果顯示,萜類成分的最佳純化工藝為:200-300目硅膠1:20上樣,50:1的石油醚:乙酸乙酯2 BV除雜,4:1的石油醚:乙酸乙酯洗脫,收集第4-6 BV的洗脫液。在此條件下萜類成分總含量為26.60%。3.參照優(yōu)化的提取、純化工藝分別制備乳香、沒(méi)藥及其藥對(duì)供試樣品,并對(duì)各樣品萜類成分的含量進(jìn)行分析。結(jié)果顯示,乳香醇提物、沒(méi)藥醇提物、藥對(duì)醇提物、乳香水提物、沒(méi)藥水提物、藥對(duì)水提物和藥對(duì)總萜部位中萜類成分的總含量分別為8.84,11.34,17.00,0.36,1.02,0.69,266.11 mg·g~(-1),為后續(xù)實(shí)驗(yàn)供試樣品提供了保障。第三章乳香、沒(méi)藥及其藥對(duì)體外抗腫瘤活性評(píng)價(jià)與機(jī)制探討本章圍繞乳香-沒(méi)藥配伍的抗腫瘤活性,以多發(fā)性骨髓瘤為研究對(duì)象,以U266和RPMI8226多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株為細(xì)胞模型,結(jié)合傳統(tǒng)分子生物學(xué)和代謝組學(xué)技術(shù)探討乳香、沒(méi)藥配伍對(duì)多發(fā)性骨髓瘤的抑制效應(yīng)及作用機(jī)理,以期為乳香、沒(méi)藥的臨床應(yīng)用與開(kāi)發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。1.以U266和RPMI 8226多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株為研究對(duì)象,對(duì)乳香醇提物、沒(méi)藥醇提物、乳香-沒(méi)藥藥對(duì)醇提物、乳香-沒(méi)藥藥對(duì)總萜部位及主要效應(yīng)成分的抗多發(fā)性骨髓瘤功效進(jìn)行評(píng)價(jià)。結(jié)果表明,3個(gè)提取物和藥對(duì)總萜在濃度大于25μg·mL~(-1)時(shí)均能顯著抑制U266和RPMI 8226細(xì)胞的增殖。在乳香、沒(méi)藥的效應(yīng)成分中以3-O-乙酰-α-乳香酸、3-乙�；�-11-酮基-β-乳香酸和11-酮基-β-乳香酸的抗多發(fā)性骨髓瘤增殖效應(yīng)最為顯著。乳香-沒(méi)藥配伍的抗腫瘤作用機(jī)理可能與抑制細(xì)胞IL-6和VEGF的分泌及抑制JAK/STAT信號(hào)通路的激活相關(guān)。2.基于代謝組學(xué)方法探討乳香、沒(méi)藥及其藥對(duì)對(duì)U266細(xì)胞代謝輪廓的調(diào)節(jié)作用,借助UPLC-TOF/MS技術(shù)對(duì)內(nèi)源性代謝產(chǎn)物進(jìn)行分析鑒定。各供試樣品均顯著調(diào)節(jié)U266細(xì)胞的代謝輪廓;在乳香醇提物、沒(méi)藥醇提物、乳香-沒(méi)藥藥對(duì)醇提物和藥對(duì)總萜部位處理組細(xì)胞中分別鑒定出11,8,7,7個(gè)內(nèi)源性代謝物及2,2,3,0條靶標(biāo)通路,涉及維生素代謝、花生四烯酸代謝、氨基酸代謝和脂質(zhì)代謝等代謝通路,說(shuō)明乳香-沒(méi)藥配伍效應(yīng)成分可能通過(guò)調(diào)節(jié)U266細(xì)胞代謝從而發(fā)揮體外抗腫瘤作用。第四章乳香、沒(méi)藥及其藥對(duì)主要效應(yīng)成分的體內(nèi)吸收與代謝產(chǎn)物研究為進(jìn)一步分析乳香-沒(méi)藥配伍對(duì)效應(yīng)成分的體內(nèi)吸收與代謝的影響,本章通過(guò)建立UPLC-TQ/MS和UHPLC-LTQ-Orbitrap-MS分析方法,對(duì)乳香、沒(méi)藥配伍前后3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸、11-酮基-β-乳香酸和2-甲氧基-8,12-環(huán)氧吉瑪-1(10)-7,11-烯-6-酮的藥代動(dòng)力學(xué)特征及其代謝產(chǎn)物進(jìn)行分析與評(píng)價(jià),以此闡明乳香、沒(méi)藥配伍前后效應(yīng)成分在體內(nèi)的吸收和代謝機(jī)制,為進(jìn)一步深入研究提供科學(xué)依據(jù),結(jié)果如下:1.乳香、沒(méi)藥及其藥對(duì)主要效應(yīng)成分的藥代動(dòng)力學(xué)研究基于UPLC-TQ/MS技術(shù)比較分析乳香、沒(méi)藥及其藥對(duì)給藥后大鼠血清中3-乙�；�-11-酮基-β-乳香酸、11-酮基-β-乳香酸和2-甲氧基-8,12-環(huán)氧吉瑪-1(10)-7,11-烯-6-酮的含量變化及藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。結(jié)果顯示,3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸、11-酮基-β-乳香酸和2-甲氧基-8,12-環(huán)氧吉瑪-1(10)-7,11-烯-6-酮分別在2 h、2 h和15 min左右達(dá)到最高血藥濃度,配伍后3個(gè)成分的AUC_(0-t)和t_(1/2)有不同程度的增加,同時(shí)CL/F顯著降低,表明乳香-沒(méi)藥配伍改善了效應(yīng)成分在大鼠體內(nèi)的吸收。2.乳香、沒(méi)藥及其藥對(duì)主要效應(yīng)成分的體內(nèi)代謝產(chǎn)物分析對(duì)3-乙�；�-11-酮基-β-乳香酸、11-酮基-β-乳香酸和2-甲氧基-8,12-環(huán)氧吉瑪-1(10)-7,11-烯-6-酮在大鼠血漿中的代謝產(chǎn)物進(jìn)行鑒定,并對(duì)其在乳香、沒(méi)藥配伍前后代謝產(chǎn)物的差異性進(jìn)行分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸、11-酮基-β-乳香酸和2-甲氧基-8,12-環(huán)氧吉瑪-1(10)-7,11-烯-6-酮在大鼠體內(nèi)存在多種I相和II相代謝產(chǎn)物,且配伍前后代謝產(chǎn)物有一定程度的差別,主要形式包括原型、還原、氧化、脫水、水解、脫乙�；�、脫烷基、羥化、乙�；�、葡萄糖醛酸化、氨基酸結(jié)合物等。
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285;R283.6
【圖文】：

圖 1-1-1 乳香中代表性乳香酸類化合物結(jié)構(gòu)Figure 1-1-1 The structures of representative boswellic acid in frankincense1.1.2 四環(huán)三萜乳香中的四環(huán)三萜以甘遂烷型為最主要的結(jié)構(gòu)形式，代表性成分為 3-羥基甘遂-8,24二烯-21-酸、3α-乙酰氧基甘遂-8,24-二烯-21-酸、3α-羥基甘遂-7,24-二烯-21-酸，化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖 1-1-2。乳香中四環(huán)三萜的分離常采用硅膠柱層析，常用鑒定方法有薄層色譜法、質(zhì)譜法和波譜法等。圖 1-1-2 乳香中代表性四環(huán)三萜類化合物結(jié)構(gòu)Figure 1-1-2 The structures of representative tetracyclic triterpenes in frankincense

圖 1-1-1 乳香中代表性乳香酸類化合物結(jié)構(gòu)Figure 1-1-1 The structures of representative boswellic acid in frankincense1.1.2 四環(huán)三萜乳香中的四環(huán)三萜以甘遂烷型為最主要的結(jié)構(gòu)形式，代表性成分為 3-羥基甘遂-8,24二烯-21-酸、3α-乙酰氧基甘遂-8,24-二烯-21-酸、3α-羥基甘遂-7,24-二烯-21-酸，化學(xué)結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖 1-1-2。乳香中四環(huán)三萜的分離常采用硅膠柱層析，常用鑒定方法有薄層色譜法、質(zhì)譜法和波譜法等。

圖 1-1-3 乳香中代表性大環(huán)二萜類化合物結(jié)構(gòu)Figure 1-1-3 The structures of representative macrocyclic diterpenoids in frankincense1.2 藥理作用通過(guò)對(duì)近十年文獻(xiàn)進(jìn)行檢索，發(fā)現(xiàn)乳香具有顯著的鎮(zhèn)痛、抗腫瘤、抗凝血、抗?jié)�、抗抑郁、抗炎和修�?fù)損傷等多種生物活性。乳香傳統(tǒng)活血化瘀、消炎鎮(zhèn)痛的功效物質(zhì)基礎(chǔ)為揮發(fā)油類和水提液，而醇提液雖然也具有一定的消炎作用，但有研究表明，乳香醇提液對(duì)小鼠耳廓腫脹程度的抑制效果顯著低于水提液[8]（水提液組抑制率 82.66%，醇提液組47.15%），這也證實(shí)了傳統(tǒng)名方如活絡(luò)效靈丹以“水煎服”的合理性。對(duì)乳香現(xiàn)代藥理作用的擴(kuò)展除基于傳統(tǒng)水提液外，還側(cè)重于乳香酸類成分的研究，發(fā)現(xiàn)了如 KBA、AKBA 等具有抗炎、抗腫瘤等多種生物活性的化合物[9-10]。詳細(xì)結(jié)果見(jiàn)表 1-1-1。表 1-1-1 乳香藥理作用及物質(zhì)基礎(chǔ)Table 1-1-1 The pharmacology and material basis of frankincense藥理作用 模型 物質(zhì)基礎(chǔ) 作用機(jī)制 參考文獻(xiàn)鎮(zhèn)痛 醋酸誘導(dǎo)的小鼠模型揮發(fā)油 尚不明確11醇提物 本身無(wú)鎮(zhèn)痛作用，但與揮發(fā)油協(xié)同增效

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本文編號(hào)：2772741