【摘要】：目的本文針對(duì)家蠶中與治療糖尿病相關(guān)的抗氧化活性成分進(jìn)行分析與表征。為家蠶治療糖尿病的臨床應(yīng)用提供化學(xué)依據(jù),為其降糖物質(zhì)基礎(chǔ)研究提供新的方法。方法利用抗氧化成分能夠使KMnO4褪色的原理,采取分光光度法檢測(cè)家蠶、家蠶不同提取物及家蠶的含藥血清中的抗氧化活性成分的含量;再將TLC、HPLC等色譜及色質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)與抗氧化活性分析相結(jié)合,進(jìn)一步研究家蠶治療糖尿病的有效部位、有效成分,來分析確認(rèn)與治療糖尿病的家蠶抗氧化藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。最后對(duì)家蠶的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制進(jìn)行初步探討。結(jié)果家蠶抗氧化活性成分的含量測(cè)定結(jié)果:不同產(chǎn)地的家蠶樣品中抗氧化活性成分含量依次為:福建江西浙江;相同產(chǎn)地的同一品種家蠶各部位抗氧化活性成分含量依次為:70%乙醇部位正丁醇部位乙酸乙酯部位石油醚部位。家蠶中抗氧化活性成分隨著入血時(shí)間的增加含量逐漸增大。家蠶中的抗氧化活性成分與KMn04發(fā)生反應(yīng),在硅膠G版上呈現(xiàn)褪色斑點(diǎn)。以此為依據(jù),分別借助HPLC圖譜的對(duì)比及LC-MS的定性分析,發(fā)現(xiàn)蠶體內(nèi)代謝物的特征性色譜峰。對(duì)家蠶降血糖成分的GC-MS表征結(jié)果表明:家蠶70%部位的化合物有288個(gè),已鑒定的化合物有64個(gè)。家蠶乙醇總提物的化合物有277個(gè),已鑒定的化合物有61個(gè)。分別利用TLC、UV等方法,初步建立相關(guān)的家蠶質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制方法。結(jié)論通過本實(shí)驗(yàn),證實(shí)家蠶中具有潛在的抗氧化活性成分。在此過程中,建立薄層色譜法分析其抗氧化成分,利用HPLC、LC/MS-QTOF技術(shù)對(duì)其中潛在的抗氧化活性成分進(jìn)行了初步分析與鑒定,并初步建立相關(guān)的家蠶質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制方法。本論文的研究結(jié)果為家蠶的應(yīng)用開發(fā)奠定基礎(chǔ),為家蠶治療糖尿病的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R284.1
【圖文】：

圖１－９桑葉、蠶體內(nèi)代謝物、蠶沙的薄層色譜圖逡逑１．蘆丁邋２．槲皮素３．山奈素４．桑葉５．蠶體內(nèi)代謝物６．香沙逡逑從圖１－９可以看出桑葉、蠶體內(nèi)代謝物、蠶沙各樣品在石油醚－丙酮（１０：４）、逡逑氯仿－甲醇（１０：１）、甲苯－乙酸乙酯－甲酸（５：２：１）三種不同展開系統(tǒng)中均可以得逡逑到良好的分離，在經(jīng)過ＫＭｎ０４顯色后可以看到在各硅膠Ｇ版上蠶體內(nèi)代謝物均出逡逑現(xiàn)褪色斑點(diǎn)；在展開系統(tǒng)石油醚－丙酮（１０：４）的條件下尤為明顯。另外從圖中逡逑可以看出Ａ、Ｂ兩個(gè)斑點(diǎn)只有在蠶體內(nèi)代謝物的樣品中才有顯現(xiàn)，可用來區(qū)別桑逡逑葉與蠶沙，且隨著展開系統(tǒng)極性的增大而往上展開。當(dāng)用１０％硫酸乙醇顯色時(shí)，逡逑褪色斑點(diǎn)呈現(xiàn)紫紅色斑點(diǎn)，與三萜類或留體類化合物的薄層顯色行為一致。接著逡逑采用上述的薄層條件對(duì)不同年份產(chǎn)地的家蠶、僵蠶、桑葉、蠶沙、蠶蛹進(jìn)行測(cè)定。逡逑如圖１－１０。逡逑１９逡逑

逡逑從圖１－１０可以看出家蠶、桑葉、蠶沙、蠶蛹各樣品在石油醚－丙酮（１０：４）、逡逑氯仿－甲醇（１０：１）、甲苯－乙酸乙酯－甲酸（５：２：１）三種不同展開系統(tǒng)中均可以得逡逑到很好的區(qū)分，各樣品自身的分離度也很好，在經(jīng)過ＫＭｎ０４顯色后可以看到家逡逑蠶具有很好的抗氧化活性效果。展開系統(tǒng)石油醚－丙酮（１０：４）可以非常清晰的逡逑顯現(xiàn)出抗氧化活性斑點(diǎn)。逡逑３討論逡逑本節(jié)采用硅膠Ｇ為固定相，以石油醚－丙酮（１０：４）、甲苯－乙酸乙酯－甲酸逡逑（５：２：１）、氯仿－甲醇（１０：１）為展開劑為展開系統(tǒng)，其中前兩個(gè)展開系統(tǒng)展開前逡逑用鹽酸飽和，后一展開系統(tǒng)以所用展開劑飽和，桑葉、蠶體內(nèi)代謝物、蠶沙供試逡逑品斑點(diǎn)在有鹽酸飽的條件下，斑點(diǎn)更清晰，在桑葉、蠶體內(nèi)代謝物、蠶沙樣品在逡逑所優(yōu)化的展開系統(tǒng)中均得到很好的分離；氯仿－甲醇（１０：１）不可用鹽酸飽和，逡逑因?yàn)槁确驴膳c鹽酸反應(yīng)，致使供試品斑點(diǎn)模糊、產(chǎn)生明顯的拖尾。逡逑在采用ＫＭｎ0４為顯色劑時(shí)

桑葉、蠶體內(nèi)代謝物、蠶沙280nm的HPLC圖

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2770601