發(fā)布時(shí)間：2020-07-23 07:19

【摘要】：野艾蒿(Artemisia lavandulaefolia)別名:蔭地蒿,野艾,小葉艾、狹葉艾,艾葉,苦艾,陳艾,多年生的草本植物。野艾蒿具有理氣行血、逐寒調(diào)經(jīng)、安胎、祛風(fēng)除濕、消腫止血等功效,可用于治療感冒、頭痛、瘧疾、皮膚瘙癢、癰腫、跌打損傷、外傷出血等癥。野艾蒿在我國分布非常廣泛,有很好的藥用價(jià)值。目前,國內(nèi)對于野艾蒿的研究工作主要集中在提取方法研究、化學(xué)成分分析、環(huán)境應(yīng)用及黃酮和揮發(fā)油的生物活性等方面。而對野艾蒿抑菌作用的研究,目前仍處于初步階段。抑菌活性研究資料表明,野艾蒿粗提物在體外對多種細(xì)菌的生長繁殖有抑制作用,但并未進(jìn)行深入的研究。本文以金黃色葡萄球菌為受試菌,對野艾蒿的抑菌活性進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究,以便為野艾蒿藥用價(jià)值的進(jìn)一步開發(fā)提供理論依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:以95%的乙醇為溶劑,采用超聲波輔助提取的方法對野艾蒿進(jìn)行提取,并以干膏得率為指標(biāo)對野艾蒿的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。得出野艾蒿醇提物的最佳提取工藝為:料液比1:20、提取時(shí)間2.5h、提取溫度為65℃、提取功率為70W,此工藝條件下的干膏得率為18.4%;所得干膏經(jīng)石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取,得到不同的萃取組分。其中石油醚萃取物得率為18%、乙酸乙酯萃取物得率為31%、正丁醇萃取物得率為13%、水相物質(zhì)得率為16%。采用水蒸氣蒸餾法對野艾蒿揮發(fā)油進(jìn)行提取,揮發(fā)油得率為1%。體外抑菌實(shí)驗(yàn)表明,野艾蒿醇提物各萃取組分及揮發(fā)油對金黃色葡萄球菌(SA)的抑菌能力大小為:乙酸乙酯萃取物正丁醇萃取物石油醚萃取物=揮發(fā)油,水相組分未測出抑菌活性。石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、揮發(fā)油對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度(MIC)依次為10mg/ml、2.5mg/ml、5mg/ml、和10mg/ml。乙酸乙酯萃取物與正丁醇萃取物對金黃色葡萄球菌的生長曲線有明顯的影響(P0.05),均能使金黃色葡萄球菌生長比較緩慢,無明顯的生長對數(shù)期。體內(nèi)抑菌實(shí)驗(yàn)表明,野艾蒿醇提物乙酸乙酯萃取物對小鼠具有體內(nèi)抑菌活性。小鼠灌入濃度為0.50g/kg的野艾蒿醇提物乙酸乙酯萃取相時(shí),體內(nèi)抑菌活性最好,小鼠的死亡率為20%,比模型組的死亡率降低了77.78%。但抑菌活性強(qiáng)弱與野艾蒿醇提物乙酸乙酯萃取相的用量之間未見正相關(guān)。抑菌機(jī)制研究結(jié)果表明,野艾蒿醇提物乙酸乙酯萃取物能增大金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁及細(xì)胞膜的通透性、降低胞內(nèi)蛋白含量和蘋果酸脫氫酶(MDH)和琥珀酸脫氫酶(SDH)比活性,能與金黃色葡萄球菌的DNA發(fā)生結(jié)合。推測其抑菌機(jī)制可能是野艾蒿醇提物乙酸乙酯萃取物與金黃色葡萄球菌的DNA發(fā)生結(jié)合后影響了DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄及蛋白質(zhì)合成,進(jìn)而使金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁及細(xì)胞膜的通透性增大,胞內(nèi)蛋白含量降低,蘋果酸脫氫酶(MDH)和琥珀酸脫氫酶(SDH)比活性降低,導(dǎo)致菌體無法正常繁殖。
【學(xué)位授予單位】：陜西科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R285
【圖文】：

1.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。抑菌圈的直徑以 X驗(yàn)，P<0.05 表示有顯著性差異。取組分對金黃色葡萄球菌的抑菌圈測定艾蒿各個(gè)組分的抑菌圈大小測定，測定結(jié)果表 3-4 野艾蒿各組分對金黃色葡萄球菌的抑菌圈microbial Circles of Staphylococcus aureus for Vari萃取物 乙酸乙酯萃取物 正丁醇萃取物 水相 40 40 40 40 ±0.51 15.6±0.57 11.6±0.55 0 + ++ + — 對照+++表示高度敏感++表示中度敏感 +表示低度

野艾蒿提取物對金黃色葡萄球菌的抑菌作用及機(jī)制研究高劑量組與中劑量沒有明顯的區(qū)別，說明野艾蒿提取物的體內(nèi)抑菌活性大小與野艾蒿提取物的劑量大小沒有線性關(guān)系。高劑量比中劑量的死亡率高，這可能是由于小鼠個(gè)體的差異及實(shí)驗(yàn)操作不當(dāng)造成的。也可能是灌入高劑量的野艾蒿乙酸乙酯相會(huì)對小鼠產(chǎn)生一定的毒副作用。郭羽[127]等研究黃芪酵母菌發(fā)酵液對金黃色葡萄球菌的體內(nèi)抑菌活性，得到高濃度劑量（2.5g/mL）的發(fā)酵液體內(nèi)抑菌效果最好，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果有一定的差異。這可能是由于所用原料的抑菌能力不同得到的結(jié)果也有差異。小鼠死亡后，取出心、肺、肝、腎培養(yǎng)，空白組各內(nèi)臟培養(yǎng)無細(xì)菌生長，模型組和給藥組的小鼠死亡后，各內(nèi)臟培養(yǎng)均有細(xì)菌生長，且菌落形態(tài)一致（如圖 3-2 所示），經(jīng)過革蘭氏染色在顯微鏡下觀察菌體為球狀被染成紫色(如圖3-3 所示），確定為金黃色葡萄球菌。進(jìn)一步說明小鼠的死亡是由于金黃色葡萄球菌感染引起的。心、肺、肝、腎培養(yǎng)后均有細(xì)菌生長，說明金黃色葡萄球菌可以感染小鼠的心、肺、肝、腎。

且菌落形態(tài)一致（如圖 3-2 所示），經(jīng)過革蘭氏染色在顯微鏡下觀察菌體為球狀被染成紫色(如圖3-3 所示），確定為金黃色葡萄球菌。進(jìn)一步說明小鼠的死亡是由于金黃色葡萄球菌感染引起的。心、肺、肝、腎培養(yǎng)后均有細(xì)菌生長，說明金黃色葡萄球菌可以感染小鼠的心、肺、肝、腎。a b c d e圖 3-2 各組小鼠死亡后心、肝、腎、肺培養(yǎng)長出的菌落Figure 3-2 Colonies of heart, liver, kidney, and lung cultures after death in each group注：a 為空白組、b 為野艾蒿萃取物高濃度組、c 為野艾蒿萃取物中濃度組、d 為野艾蒿萃取物地濃度組、e 為模型組a b c d圖 3-3 死亡小鼠心肺肝腎培養(yǎng)后的細(xì)菌革蘭氏染色照片F(xiàn)ig 3-3 Bacterial Gram stain photo of dead mice after heart, lung, liver and kidney culture注：a 心 b 肺 c 肝 d 腎

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本文編號：2767041