【摘要】：膽固醇結(jié)石是一種多因素共同作用的復(fù)雜代謝性疾病;全外顯子組測(cè)序(Whole exome sequence,WES)作為新一代測(cè)序技術(shù),是利用序列捕獲技術(shù)將全外顯子區(qū)域的DNA捕捉并富集,然后進(jìn)行高通量測(cè)序的基因組分析技術(shù)。WES的目標(biāo)區(qū)域是包含人類80%基因致病性疾病的蛋白質(zhì)編碼區(qū)域,對(duì)常見(jiàn)和罕見(jiàn)的變異高度靈敏,能夠發(fā)現(xiàn)外顯子區(qū)域絕大部分疾病相關(guān)變異。全外顯子測(cè)序技術(shù)為探尋膽固醇結(jié)石可疑致病基因提供了契機(jī)。本研究擬以具有遺傳背景的膽固醇結(jié)石患者為對(duì)象,采用WES技術(shù),經(jīng)過(guò)和數(shù)據(jù)庫(kù)、過(guò)濾器比對(duì)結(jié)合生物信息學(xué)分析篩選出膽固醇結(jié)石可疑致病變異基因;通過(guò)核心小家系的篩選、Sanger驗(yàn)證和保守性分析對(duì)位點(diǎn)進(jìn)行驗(yàn)證;通過(guò)動(dòng)物模型初步驗(yàn)證可疑致病基因,為膽固醇結(jié)石的遺傳學(xué)發(fā)病機(jī)制研究提供新的線索;柴胡皂苷D(Saikosaponin-d,SSD),是從中藥柴胡提取的中藥單體;具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗炎、降血脂以及保肝的等藥理學(xué)作用;動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中首次將SSD用于膽固醇結(jié)石疾病領(lǐng)域,探討SSD預(yù)防膽固醇結(jié)石的有效性及可能的保護(hù)性機(jī)制,為治療膽固醇結(jié)石的新藥開(kāi)發(fā)和早期預(yù)防提供理論指導(dǎo)。第一部分:全外顯子組測(cè)序探尋膽固醇結(jié)石致病基因及功能預(yù)測(cè)目的:本研究以具有遺傳背景的膽囊膽固醇結(jié)石患者為研究對(duì)象,采用全外顯子組測(cè)序探尋與膽固醇結(jié)石發(fā)病相關(guān)的可疑致病變異基因。方法:以21例家族膽固醇結(jié)石患者和5例家系內(nèi)健康成員為研究對(duì)象,收集病例資料。采集外周靜脈血5ml,提取基因組DNA,進(jìn)行WES,經(jīng)歷嚴(yán)格的質(zhì)量控制系統(tǒng)得到產(chǎn)出數(shù)據(jù)。采用兩種篩選策略進(jìn)行數(shù)據(jù)分析:(1)基于先驗(yàn)的脂質(zhì)代謝相關(guān)基因及相關(guān)致病性變異,結(jié)合文獻(xiàn)檢索對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì)和深入挖掘,得到膽固醇結(jié)石的可疑致病突變基因。(2)基于家系和所有患病樣本的“Overlap”法,通過(guò)次要等位基因頻率(Minor allele frequency,MAF)過(guò)濾器和在線軟件SIFT、Mutation Assessor以及Poly Phen2對(duì)突變位點(diǎn)進(jìn)行功能預(yù)測(cè);同時(shí)對(duì)變異基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析包括GO(Gene ontology)基因本體功能和《京都基因與基因組百科全書(shū)》(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析。將基因列表提交到交互基因檢索工具(STRING)數(shù)據(jù)庫(kù),得到基因互作網(wǎng)絡(luò);使用Cytoscape version 3.4.0軟件將基因的相互作用網(wǎng)絡(luò)圖可視化,應(yīng)用插入式分子復(fù)合體檢測(cè)(MCODE)技術(shù)篩選出基因相互作用網(wǎng)絡(luò)模塊;結(jié)合以上生物信息學(xué)分析對(duì)得到的突變基因進(jìn)行文獻(xiàn)檢索查重,最后得到可疑致病變異基因。結(jié)果:基于先驗(yàn)的深入挖掘認(rèn)為基因LRP2、LRP5、PLTP、OSBPL10、MUC5B、ABCA1、ABCB11和TGR5可能在膽固醇結(jié)石的發(fā)病中占據(jù)重要地位;基于“Overlap”篩選原則和生物信息學(xué)分析得到PHLPP2、NOTCH1、INTS1、SMARCA4和HUWE1以及泛素介導(dǎo)的蛋白水解途徑和蛋白質(zhì)消化吸收信號(hào)通路可能在膽固醇結(jié)石疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮作用。結(jié)論:通過(guò)WES得到龐大數(shù)目的變異基因,結(jié)合篩選策略和生物信息學(xué)分析最終定位13個(gè)可以致病變異基因(基于先驗(yàn)的LRP2、LRP5、PLTP、OSBPL10、MUC5B、ABCA1、ABCB11和TGR5;基于“Overlap”篩選的PHLPP2、NOTCH1、INTS1、SMARCA4和HUWE1)以及泛素介導(dǎo)的蛋白水解途徑和蛋白質(zhì)消化吸收信號(hào)通路,這些基因突變和信號(hào)通路可能在膽固醇結(jié)石的形成中發(fā)揮作用。第二部分:一個(gè)膽固醇結(jié)石家系的全外顯子組測(cè)序及致病基因的定位研究目的:探索一個(gè)膽固醇結(jié)石家系的可疑致病基因,比對(duì)第一章節(jié)的致病變異,驗(yàn)證結(jié)果的準(zhǔn)確性。方法:首先通過(guò)收集病史資料和腹部超聲對(duì)膽固醇結(jié)石的家系進(jìn)行膽結(jié)石篩查,并留取6名成員的外周靜脈血提基因組DNA,進(jìn)行WES,通過(guò)質(zhì)控系統(tǒng)輸出數(shù)據(jù);比對(duì)千人計(jì)劃數(shù)據(jù)庫(kù)、db SNP141和EAS數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行變異篩查,排除數(shù)據(jù)庫(kù)中的已知變異保留患者共有并正常人沒(méi)有的突變;結(jié)合Mutation Assessor、SIFT以及Poly Phen2對(duì)致病突變進(jìn)行預(yù)測(cè),選出可能性較大的致病突變基因;運(yùn)用聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增和Sanger法將候選致病基因位點(diǎn)(INTS1和SOCS6)在家系內(nèi)進(jìn)行共分離驗(yàn)證,并在Pub Med和Google scholar中檢索、查重以明確是否為新發(fā)變異。結(jié)果:在家族性膽石病家系中發(fā)現(xiàn)INTS1基因變異(p.Arg1522His/c.4565GA)與膽固醇結(jié)石疾病發(fā)生共分離。該基因變異是一個(gè)新發(fā)突變。結(jié)論:本家系中發(fā)現(xiàn)并驗(yàn)證了基因INTS1上新發(fā)的致病突變p.R1522H。WES可以快速準(zhǔn)確的鑒定家族性膽固醇結(jié)石疾病的致病基因。第三部分:柴胡皂苷D預(yù)防膽固醇結(jié)石的實(shí)驗(yàn)研究目的:通過(guò)建立動(dòng)物膽固醇結(jié)石模型,對(duì)先驗(yàn)挖掘得到的ABCA1、ABCB11和TGR5基因進(jìn)行PCR驗(yàn)證;同時(shí)觀察柴胡皂苷D(Saikosaponin-d,SSD)對(duì)飲食誘導(dǎo)的C57BL/6鼠膽固醇結(jié)石形成的影響,檢測(cè)ABCA1、ABCB11和TGR5的轉(zhuǎn)錄水平變化、檢測(cè)膽汁成分的變化并進(jìn)一步探究SSD對(duì)LKB1/AMPK信號(hào)通路的影響。方法:在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中,采用高脂高膽固醇飼養(yǎng)法構(gòu)建C57BL/6膽固醇結(jié)石模型。8-10周,雄性C57BL/6小鼠40只,體重18-20g,適應(yīng)性飼養(yǎng)兩周,采用隨機(jī)數(shù)字法分成四組(n=10),正常對(duì)照組(N-CON組):常規(guī)飼料喂養(yǎng);模型組(LITH組):高脂高膽固醇飼料喂養(yǎng);熊去氧膽酸膠囊組(UDCA組):高脂高膽固醇飼料喂養(yǎng),同時(shí)熊去氧膽酸膠囊灌胃處理;柴胡皂苷D組(SSD組):高脂高膽固醇飼料喂養(yǎng),同時(shí)SSD灌胃處理;實(shí)驗(yàn)周期為八周,實(shí)驗(yàn)期間觀察記錄動(dòng)物一般情況和體重變化。八周后解剖觀察各組動(dòng)物成石情況,記錄結(jié)石率;留取結(jié)石,采用紅外光譜觀察溴化鉀壓片法對(duì)結(jié)石進(jìn)行定性分析;留取膽汁,對(duì)各組膽汁脂質(zhì)成份膽固醇、膽汁酸和磷脂進(jìn)行檢測(cè)并計(jì)算膽固醇飽和指數(shù)(Cholesterol Saturation Index;CSI);肝臟組織進(jìn)行病理學(xué)HE染色對(duì)各組肝細(xì)胞損傷和脂肪浸潤(rùn)情況進(jìn)行分析;肝臟組織提取RNA,采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR檢測(cè)各組ABCA1、ABCB11和TGR5基因m RNA相對(duì)表達(dá)量;提取肝臟組織總蛋白,Western blot方法檢測(cè)肝細(xì)胞AMPK及上游蛋白LKB1蛋白的活性水平。結(jié)果:第八周LITH組體重明顯重于N-CON組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),LITH組的結(jié)石率為100%,且膽結(jié)石成份鑒定為膽固醇結(jié)石;UDCA組和SSD組的成石率分別為20%、30%,與LITH組相比明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);膽汁膽固醇和磷脂在LITH組較N-CON組明顯升高(P0.05),膽汁酸在LITH組較N-CON組明顯下降(P0.05);治療后,UDCA組和SSD組膽固醇和磷脂含量較LITH組,明顯下降(P0.05);膽汁酸濃度在UDCA組和SSD組較LITH組有所升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);LITH組CSI大于1,表明膽固醇過(guò)飽和膽汁形成,UDCA組和SSD組CSI均小于1,表明SSD和UDCA都能夠緩解過(guò)飽和膽汁的生成;蘇木素-伊紅染色(Hematoxylin Eosin;HE)N-CON組未見(jiàn)明顯異常,呈現(xiàn)正常肝組織狀態(tài),LITH組視野可見(jiàn)大量脂肪空泡,脂肪空泡充滿肝細(xì)胞胞質(zhì)可將胞核被擠壓到邊緣,胞核疏松核質(zhì)比例改變明顯,可見(jiàn)部分可見(jiàn)核脹大、核碎裂甚至雙核現(xiàn)象,肝細(xì)胞損傷嚴(yán)重;UDCA組和SSD組肝細(xì)胞損傷情況較LITH組好轉(zhuǎn),病理表現(xiàn)介于N-CON組和LITH組之間。RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示ABCA1基因m RNA相對(duì)表達(dá)水平在N-CON組、LITH組和SSD組,未見(jiàn)明顯沒(méi)有差異(P0.05);LITH組ABCB11m RNA較N-CON組表達(dá)明顯下降,TGR5m RNA表達(dá)在LITH組較N-CON組明顯升高;SSD組ABCB11和TGR5 m RNA相對(duì)表達(dá)量較LITH組明顯升高(P0.05);Western blot結(jié)果表明SSD能夠明顯增加LKB1和AMPK的磷酸化水平。結(jié)論:與正常組相比,LITH組ABCA1m RNA水平未見(jiàn)明顯改變,ABCB11m RNA水平明顯下降以及TGR5m RNA明顯升高;SSD能夠改善膽汁的脂質(zhì)成份,緩解膽固醇過(guò)飽和膽汁生成。SSD通過(guò)激活LKB1-AMPK信號(hào)通路,從而起到預(yù)防膽固醇結(jié)石形成的作用;其中ABCB11和TGR5可能是效應(yīng)靶點(diǎn)。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文顯子組捕獲，Agilent 公司的全外顯子捕獲試劑盒（Agilent ll Exon v5 kit;50M ）捕獲可達(dá) 50Mb。Illumina Hiseq 2000 作.1 基因組 DNA 文庫(kù)建立 Agilent v5（50M）捕獲平臺(tái)進(jìn)行全外顯子組捕獲，采用美國(guó)對(duì)基因組 DNA 樣本制備試劑盒，建立基因組 DNA 文庫(kù)。DN圖 1.1。

圖 1.2 全外顯子組測(cè)序信息分析流程圖1.1.4.7.3 數(shù)據(jù)過(guò)濾器為了確保測(cè)序數(shù)據(jù)的質(zhì)量、去除干擾測(cè)序數(shù)據(jù)的異質(zhì)性噪音， 首先對(duì)測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行過(guò)濾。過(guò)濾方法如下：(1) 首先過(guò)濾除掉 reads 的接頭序列；(2) 當(dāng)單端測(cè)序結(jié)果 reads 內(nèi)含有低質(zhì)量堿基數(shù)目超過(guò)這條 reads 的一半時(shí)，應(yīng)該刪除這一組 reads；(3) 當(dāng)單端測(cè)序結(jié)果 reads 內(nèi)含有的 N 堿基數(shù)目超過(guò)這條 reads 的十分之一時(shí)，需要?jiǎng)h除這一組 reads；經(jīng)過(guò)過(guò)濾器后，得到"Clean data"，并且對(duì)測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，內(nèi)容包括測(cè)序數(shù)目、數(shù)據(jù)產(chǎn)量和質(zhì)量值分布等。1.1.4.7.4 原始數(shù)據(jù)比對(duì)Burrows-Wheeler Aligner 數(shù)據(jù)比對(duì)軟件（BWA V0.7.15)，采用 BWA-MEM的比對(duì)方法將 cleanreads 比對(duì)到人參考基因組上(GRCh37/HG19)。分別對(duì)每一個(gè)lane 的測(cè)序數(shù)據(jù)比對(duì)，并且在比對(duì)的結(jié)果中添加 read group ID。使用 Picard-

天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文C3 296.2 50 14.81 合格，輕微降解H2 45.4 45 2.043 合格，輕微降解H1 92.8 45 4.176 合格，輕微降解H3 87.5 45 3.9375 合格，輕微降解G3 216.7 45 9.7515 合格，輕微降解G2 337.5 45 15.1875 合格，輕微降解G1 174.9 45 7.8705 合格，輕微降解F1 290 45 13.05 合格，輕微降解F4 223.3 45 10.0485 合格，輕微降解E2 210.2 45 9.459 合格，輕微降解E1 207.9 45 9.355 合格，輕微降解

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8 梁穎;利膽排石湯抗實(shí)驗(yàn)性膽固醇結(jié)石作用及作用機(jī)理的研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2007年

9 陳小微;選擇性環(huán)氧合酶-2抑制劑在膽固醇結(jié)石形成中作用的研究[D];浙江大學(xué);2003年

10 廖介;C57BL/6J小鼠血高脂聯(lián)素與膽囊膽固醇結(jié)石及血脂質(zhì)異常相關(guān)性分析[D];川北醫(yī)學(xué)院;2013年

本文編號(hào)：2766178