【摘要】：目的:應(yīng)用青蒿琥酯(ART)處理高糖條件下血管內(nèi)皮細(xì)胞,以探討青蒿琥酯對(duì)高糖條件下血管內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1和MMP-9蛋白表達(dá)的影響。方法:將人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,分為葡萄糖(Glucose,G)組、40mmol/L G+ART(G40+ART)組,甘露醇(Mannitol,M)對(duì)照組、G40+二甲基亞砜(DMSO)對(duì)照組,其中葡萄糖組濃度梯度分為5.5mmol/L G(G5.5)、25mmol/L G(G25)、40mmol/L G(G40);甘露醇對(duì)照組濃度梯度為5.5 mmol/L G+19.5 mmol/L M(M25),5.5 mmol/L G+34.5mmol/L M(M40),G40+ART組中依據(jù)ART濃度梯度分為G40+10ug/ml ART(10A)、G40+20ug/ml ART(20A)、G40+40ug/ml ART(40A);DMSO對(duì)照組中DMSO用量與40A組中溶解ART所用DMSO體積相同。采用Western blot、細(xì)胞免疫熒光技術(shù)分別檢測(cè)各組細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表達(dá)情況。結(jié)果:1.高糖條件對(duì)HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表達(dá)的影響,及ART對(duì)高糖條件下HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表達(dá)的影響。應(yīng)用G5.5,G25,G40的培養(yǎng)液處理細(xì)胞,Western blot結(jié)果表明ICAM-1、MMP-9蛋白在G25組較G5.5組表達(dá)升高,且G40組較G25組表達(dá)升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P0.01)。細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)結(jié)果表明,ICAM-1、MMP-9蛋白在G25組較G5.5組表達(dá)升高,且G40組較G25組表達(dá)升高。應(yīng)用10A,20A,40A三種藥物濃度對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理,同時(shí)保證細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中藥物濃度以外的其他培養(yǎng)條件相同。Western blot結(jié)果表明ICAM-1、MMP-9蛋白在G40+ART組較G40組表達(dá)下降,其中,10A組低于G40組,20A組低10A組,40A組低于20A組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P0.01),細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)結(jié)果表明,ICAM-1、MMP-9蛋白在G40+ART組較G40組表達(dá)下降,其中,10A組低于G40組,20A組低10A組,40A組低于20A組。2.高滲透壓對(duì)HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表達(dá)的影響。對(duì)于M對(duì)照組,應(yīng)用含有5.5 mmol/L G+19.5 mmol/L M(M25),5.5 mmol/L G+34.5 mmol/L M(M40)的培養(yǎng)液處理細(xì)胞,分別與G25組、G40組相比,Western blot結(jié)果顯示ICAM-1、MMP-9蛋白表達(dá)在G25組較M25組表達(dá)升高,G40組較M40組表達(dá)升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P0.01)。細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)結(jié)果表明,ICAM-1、MMP-9蛋白表達(dá)在G25組較M25組表達(dá)升高,G40組較M40組表達(dá)升高。3.為進(jìn)一步證明ART對(duì)高糖條件下HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表達(dá)的影響,設(shè)置DMSO對(duì)照組。DMSO對(duì)照組中DMSO用量與40A組中溶解ART所用DMSO體積相同,Western blot結(jié)果顯示G40+ART組ICAM-1、MMP-9蛋白表達(dá)低于DMSO組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均為P0.01)。細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)結(jié)果顯示G40+ART組ICAM-1、MMP-9蛋白表達(dá)低于DMSO組。結(jié)論:1.ICAM-1和MMP-9蛋白在高糖條件下表達(dá)升高,且具有濃度依賴性。2.高滲透壓對(duì)HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表達(dá)無(wú)明顯影響。3.ART可抑制高糖條件下血管內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1和MMP-9蛋白的表達(dá),且具有濃度依賴性。4.本實(shí)驗(yàn)在細(xì)胞水平證明ART可抑制高糖條件下血管內(nèi)皮細(xì)胞ICAM-1和MMP-9蛋白的表達(dá),為進(jìn)一步研究ART抑制視網(wǎng)膜新生血管形成和滲漏的機(jī)制中ICAM-1和MMP-9表達(dá)變化奠定基礎(chǔ)
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

結(jié)果糖條件對(duì) HUVEC ICAM-1、MMP-9 蛋白表達(dá)的影響，及 ART 對(duì)高 HUVEC ICAM-1、MMP-9 蛋白表達(dá)的影響。用 G5.5，G25，G40 的培養(yǎng)液處理細(xì)胞，運(yùn)用 Western blot、細(xì)胞免疫CAM-1、MMP-9 蛋白表達(dá)。結(jié)果表明 ICAM-1、MMP-9 蛋白在 G25 組較 G5.5 ，且 G40 組較 G25 組表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均為 P＜0.01）。0A，40A 三種藥物濃度對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理，運(yùn)用 Western blot、細(xì)胞免疫CAM-1、MMP-9 蛋白表達(dá)，結(jié)果表明 ICAM-1、MMP-9 蛋白在 G40+ART 組較下降，其中，10A 組低于 G40 組，20A 組低 10A 組，40A 組低于 20A 組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均為 P＜0.01）（如圖 1 A、B、C、D）。

青島大學(xué)碩士學(xué)位論文2 高滲透壓對(duì) HUVEC ICAM-1、MMP-9 蛋白表達(dá)的影響。對(duì)于 M 對(duì)照組，應(yīng)用 Western blot、細(xì)胞免疫熒光檢測(cè) HUVEC ICAM-1、MM白表達(dá)情況，結(jié)果顯示 ICAM-1、MMP-9 蛋白表達(dá)在 G25 組較 M25 組表達(dá)升0 組較 M40 組表達(dá)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均為 P＜0.01）（圖 2 A、B、C、D

3.A、B 、C、D Western blot、細(xì)胞免疫熒光結(jié)果顯示 ART 組 ICAM-1、MMP-9 蛋白表于 DMSO 組（*表示與 10A、20A、40A 組相比均為 P＜0.01）。

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本文編號(hào)：2760718