【摘要】：目的:應用青蒿琥酯(ART)處理高糖條件下血管內(nèi)皮細胞,以探討青蒿琥酯對高糖條件下血管內(nèi)皮細胞ICAM-1和MMP-9蛋白表達的影響。方法:將人臍靜脈內(nèi)皮細胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)作為實驗對象,分為葡萄糖(Glucose,G)組、40mmol/L G+ART(G40+ART)組,甘露醇(Mannitol,M)對照組、G40+二甲基亞砜(DMSO)對照組,其中葡萄糖組濃度梯度分為5.5mmol/L G(G5.5)、25mmol/L G(G25)、40mmol/L G(G40);甘露醇對照組濃度梯度為5.5 mmol/L G+19.5 mmol/L M(M25),5.5 mmol/L G+34.5mmol/L M(M40),G40+ART組中依據(jù)ART濃度梯度分為G40+10ug/ml ART(10A)、G40+20ug/ml ART(20A)、G40+40ug/ml ART(40A);DMSO對照組中DMSO用量與40A組中溶解ART所用DMSO體積相同。采用Western blot、細胞免疫熒光技術分別檢測各組細胞間黏附分子-1(ICAM-1)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表達情況。結(jié)果:1.高糖條件對HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表達的影響,及ART對高糖條件下HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表達的影響。應用G5.5,G25,G40的培養(yǎng)液處理細胞,Western blot結(jié)果表明ICAM-1、MMP-9蛋白在G25組較G5.5組表達升高,且G40組較G25組表達升高,差異有統(tǒng)計學意義(均為P0.01)。細胞免疫熒光檢測結(jié)果表明,ICAM-1、MMP-9蛋白在G25組較G5.5組表達升高,且G40組較G25組表達升高。應用10A,20A,40A三種藥物濃度對細胞進行處理,同時保證細胞培養(yǎng)過程中藥物濃度以外的其他培養(yǎng)條件相同。Western blot結(jié)果表明ICAM-1、MMP-9蛋白在G40+ART組較G40組表達下降,其中,10A組低于G40組,20A組低10A組,40A組低于20A組,差異有統(tǒng)計學意義(均為P0.01),細胞免疫熒光檢測結(jié)果表明,ICAM-1、MMP-9蛋白在G40+ART組較G40組表達下降,其中,10A組低于G40組,20A組低10A組,40A組低于20A組。2.高滲透壓對HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表達的影響。對于M對照組,應用含有5.5 mmol/L G+19.5 mmol/L M(M25),5.5 mmol/L G+34.5 mmol/L M(M40)的培養(yǎng)液處理細胞,分別與G25組、G40組相比,Western blot結(jié)果顯示ICAM-1、MMP-9蛋白表達在G25組較M25組表達升高,G40組較M40組表達升高,差異有統(tǒng)計學意義(均為P0.01)。細胞免疫熒光檢測結(jié)果表明,ICAM-1、MMP-9蛋白表達在G25組較M25組表達升高,G40組較M40組表達升高。3.為進一步證明ART對高糖條件下HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表達的影響,設置DMSO對照組。DMSO對照組中DMSO用量與40A組中溶解ART所用DMSO體積相同,Western blot結(jié)果顯示G40+ART組ICAM-1、MMP-9蛋白表達低于DMSO組,差異有統(tǒng)計學意義(均為P0.01)。細胞免疫熒光檢測結(jié)果顯示G40+ART組ICAM-1、MMP-9蛋白表達低于DMSO組。結(jié)論:1.ICAM-1和MMP-9蛋白在高糖條件下表達升高,且具有濃度依賴性。2.高滲透壓對HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表達無明顯影響。3.ART可抑制高糖條件下血管內(nèi)皮細胞ICAM-1和MMP-9蛋白的表達,且具有濃度依賴性。4.本實驗在細胞水平證明ART可抑制高糖條件下血管內(nèi)皮細胞ICAM-1和MMP-9蛋白的表達,為進一步研究ART抑制視網(wǎng)膜新生血管形成和滲漏的機制中ICAM-1和MMP-9表達變化奠定基礎
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5
【圖文】：

結(jié)果糖條件對 HUVEC ICAM-1、MMP-9 蛋白表達的影響，及 ART 對高 HUVEC ICAM-1、MMP-9 蛋白表達的影響。用 G5.5，G25，G40 的培養(yǎng)液處理細胞，運用 Western blot、細胞免疫CAM-1、MMP-9 蛋白表達。結(jié)果表明 ICAM-1、MMP-9 蛋白在 G25 組較 G5.5 ，且 G40 組較 G25 組表達升高，差異有統(tǒng)計學意義（均為 P＜0.01）。0A，40A 三種藥物濃度對細胞進行處理，運用 Western blot、細胞免疫CAM-1、MMP-9 蛋白表達，結(jié)果表明 ICAM-1、MMP-9 蛋白在 G40+ART 組較下降，其中，10A 組低于 G40 組，20A 組低 10A 組，40A 組低于 20A 組，有統(tǒng)計學意義（均為 P＜0.01）（如圖 1 A、B、C、D）。

青島大學碩士學位論文2 高滲透壓對 HUVEC ICAM-1、MMP-9 蛋白表達的影響。對于 M 對照組，應用 Western blot、細胞免疫熒光檢測 HUVEC ICAM-1、MM白表達情況，結(jié)果顯示 ICAM-1、MMP-9 蛋白表達在 G25 組較 M25 組表達升0 組較 M40 組表達升高，差異有統(tǒng)計學意義（均為 P＜0.01）（圖 2 A、B、C、D

3.A、B 、C、D Western blot、細胞免疫熒光結(jié)果顯示 ART 組 ICAM-1、MMP-9 蛋白表于 DMSO 組（*表示與 10A、20A、40A 組相比均為 P＜0.01）。

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本文編號：2760718