【摘要】：目的:以中醫(yī)“腎藏精,主骨生髓”為理論基礎(chǔ),通過實驗觀察右歸丸含藥血清對體外培養(yǎng)大鼠BMSCs向成骨細胞增殖分化及細胞中GPR48、ATF4、BSP、BMP7、TGF-β、BGP蛋白表達的變化,探究右歸丸防治腎虛骨質(zhì)疏松癥的作用機制,為臨床治療骨質(zhì)疏松癥提供科學依據(jù)。材料與方法:本實驗采用血清藥理學方法,將SPF級3月齡未曾交配的SD雌性大鼠,體重190-220g隨機分組為正常組、誘導液組、右歸丸組、福善美組、骨疏康組,每組8只,共40只。實驗大鼠連續(xù)灌胃一周,每日灌胃1次,一周后將大鼠脫頸處死,并進行取材,留存各組含藥血清。取雙側(cè)股骨及脛骨,分離提取BMSCs,培養(yǎng)及傳代純化。選取MTT法測定細胞增殖情況,采取ELISA法檢測細胞中ALP、GPR48、ATF4、BSP、BMP7、TGF-β、BGP的蛋白表達情況。運用SPSS統(tǒng)計軟件對所得實驗數(shù)據(jù)結(jié)果進行分析比較,觀察各組含藥血清對BMSCs向成骨細胞分化的影響,探討右歸丸對骨質(zhì)疏松癥的防治機制。結(jié)果:1.各實驗組對細胞中MTT調(diào)控結(jié)果顯示:與正常組比較,右歸丸組顯著增長(P0.01);與誘導液組、骨疏康組、福善美組相比,右歸丸組有顯著差異(P0.01)。2.各實驗組對細胞中ALP活性調(diào)控結(jié)果顯示:右歸丸組與正常組比較,有顯著差異(p0.01);右歸丸組與福善美組、骨疏康組陽性對照組相比有顯著差異(P0.01)。3.各組含藥血清對大鼠BMSCs培養(yǎng)中GPR48、ATF4、BSP、BMP7、TGF-β、BGP的蛋白含量調(diào)控結(jié)果顯示:與正常組相比,誘導液組、骨疏康組、福善美組、右歸丸組均有明顯提升(P0.01)。結(jié)論:1.正常大鼠BMSCs中可以表達GPR48、ATF4、BSP、BMP7、TGF-β、BGP,表明大鼠中存在GPR48、ATF4、BSP、BMP7、TGF-β、BGP信號因子。2.右歸丸可以上調(diào)大鼠BMSCs中GPR48、ATF4、BSP、BMP7、TGF-β、BGP的蛋白含量,表明右歸丸可能是通過調(diào)節(jié)GPR48、ATF4、BSP、BMP7、TGF-β、BGP蛋白表達水平以達到防治骨質(zhì)疏松癥的目的。3.右歸丸含藥血清可以促進大鼠BMSCs向成骨細胞分化,詮釋了中醫(yī)“腎藏精,主骨生髓”理論的科學性。
【學位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5

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本文編號：2760324