【摘要】：[目的]體外及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)探討天麻素(Gastrodin,Gas)是否通過調(diào)控Notch信號(hào)通路抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘導(dǎo)的BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞和新生3天斯?jié)娎鄹瘛ざ嗬?SpragueDawley,SD)大鼠胼胝體區(qū)小膠質(zhì)細(xì)胞炎性蛋白酶的表達(dá)。為臨床應(yīng)用天麻素治療與神經(jīng)炎癥相關(guān)的神經(jīng)退行性疾病提供理論依據(jù)。[方法]體外實(shí)驗(yàn)采用LPS誘導(dǎo)BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞構(gòu)建炎癥模型,分為空白對(duì)照組、LPS(1μg/ml,6h或2h)處理組及不同濃度天麻素(10、20、50和100μmol/L)預(yù)處理(1 h)+LPS共同處理組;采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)、蛋白免疫印跡(Western blotting)和細(xì)胞免疫熒光染色技術(shù)檢測(cè)BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase,COX-2)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(induced nitric oxide synthase,iNOS)、Notch信號(hào)通路受體Notch-1、重組結(jié)合蛋白抑制子(recombining binding protein suppressor of hairless,RBP-Jk)、發(fā)狀分裂相關(guān)增強(qiáng)子 1(hairy and enhancer of split-1,Hes-1)mRNA 及 COX-2、iNOS、Notch-1、Notch 受體蛋白胞內(nèi)段(intracellμlar Notch receptor domain,NICD)、RBP-Jk、Hes-1蛋白表達(dá)變化。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)采用LPS誘導(dǎo)40只健康新生3天SD大鼠構(gòu)建炎癥模型,隨機(jī)分為空白對(duì)照組、LPS(lmg/kg,6h)處理組、不同劑量天麻素(50、100、200 mg/kg)預(yù)處理(2 h)+LPS 共同處理組;采用 RT-PCR、Western blotting及組織免疫熒光染色檢測(cè)胼胝體區(qū)小膠質(zhì)細(xì)胞COX-2、iNOS、Notch-1、RBP-JK、Hes-1 mRNA 及 COX-2、iNOS、Notch-1、NICD、RBP-JK、Hes-1 蛋白表達(dá)變化。[結(jié)果]體外及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果均發(fā)現(xiàn),與空白對(duì)照組相比LPS處理組COX-2、iNOS、Notch-1、RBP-Jk、Hes-1mRNA、蛋白表達(dá)以及 NICD 核轉(zhuǎn)位水平上調(diào)(P0.05);與LPS處理組相比天麻素預(yù)處理+LPS共同處理組COX-2、iNOS、Notch-1、RBP-Jk、Hes-1mRNA、蛋白表達(dá)以及NICD核轉(zhuǎn)位水平下調(diào)(P0.05)。[結(jié)論]天麻素可通過抑制Notch信號(hào)通路抑制LPS誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞炎性反應(yīng)。為臨床應(yīng)用天麻素預(yù)防和治療與神經(jīng)炎癥相關(guān)的神經(jīng)退行性疾病提供理論依據(jù)。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R285.5
【圖文】：

圖２天麻素化學(xué)結(jié)構(gòu)逡逑Ｆｉｇ．２邋Ｃｈｅｍｉｃａｌ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ邋ｏｆ邋Ｇａｓｔｒｏｄｉｎ逡逑材料與方法逡逑ｉ實(shí)驗(yàn)材料逡逑ｉ．ｉ實(shí)驗(yàn)細(xì)胞逡逑ＢＶ－２小膠質(zhì)細(xì)胞由新加坡國(guó)立大學(xué)解剖系林榮安教授惠贈(zèng)。逡逑１．２實(shí)驗(yàn)動(dòng)物逡逑健康新生３天ＳＤ大鼠４０只，雌雄不限，由昆明醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部提供。逡逑１．３主要儀器和設(shè)備逡逑（１）邐－８０°Ｃ超低溫冰箱：Ｔｈｅｒｍｏ邋Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ公司，美國(guó)逡逑

逡逑圖１逡逑Ａ邐Ｂ逡逑ＬＰＳ（６ｈ，邋ｌｊｉｇ／ｍｌ）邋－邋＋邋＋邋＋邋＋邋＋邐ＬＰＳ（６ｈ，邋ｌｊｉｇ／ｍｌ）邋■邋＋邋＋邋＋邋＋邋＋逡逑Ｇａｓ（ｊｊｍｏｌ／Ｌ）邋－邋１０邋２０邋ＳＯ邋１００邐Ｇａｓ（｜ｘｍｏｌ／Ｌ）邋？邋－邋１０邋２０邋５０邋１００逡逑ＣＯＸ－２邐ｃｏｘ．２邋？？？？＿邋？逡逑ｆａｃｔｉｎ邐ｐ－ａｃｔｉｎ逡逑Ｃ邋Ｍ邋0■＿邐ＬＰＳ＿＿逡逑a舍伲咤義希恚恚礤義希停澹潁紓邋澹桑В哄危保海掊澹翦危粒澹劍鰣義賢跡保遙裕校茫義澹ǎ粒�、Ｗｅｓｔｅ}鑠澹猓歟錚簦簦椋睿玨澹ǎ攏┘跋赴庖哂猓ǎ茫┘際跫觳獠煌ǘ忍炻樗囟藻義希蹋校蛹せ畹模攏鄭蠶赴茫希兀脖澩锏撓跋�。＃与空白组相比较，测犾有统计学意义（尸［E埃埃擔(dān)誨義希耄蹋校喲磣橄啾冉希鉅煊型臣蒲б庖澹ǎ校跡埃埃擔(dān)╁義希疲椋紓戾澹校幔睿澹戾澹鈴澹螅瑁錚鰨簀澹簦瑁邋澹遙裕校茫義澹椋恚幔紓邋澹媯錚蟈澹恚遙危鈴澹澹穡潁澹螅螅椋錚鑠澹錚駑澹茫希兀玻澹校幔睿澹戾澹洛澹螅瑁錚鰨簀澹簦瑁邋義希祝澹螅簦澹潁鑠澹猓歟錚簦簦椋睿玨澹椋恚幔紓邋澹媯錚蟈澹悖錚潁潁澹螅穡錚睿洌椋睿玨澹穡潁錚簦澹椋睿澹校幔睿澹戾澹緬澹螅瑁錚鰨簀澹簦瑁邋澹椋恚恚酰睿錚媯歟酰錚潁澹螅悖澹睿悖邋澹椋恚幔紓澹簀義希媯錚蟈澹穡潁錚簦澹椋鑠澹澹穡潁澹螅螅椋錚鑠澹錚駑澹茫希兀玻澹裕瑁邋澹猓歟酰邋澹媯歟酰錚潁澹螅悖澹睿悖邋澹鰨幔簀澹模粒校桑歟幔猓澹歟澹溴澹睿酰悖歟澹

本文編號(hào)：2754270