【摘要】：海洋特殊的環(huán)境使其成為了天然產(chǎn)物的重要寶庫。海綿作為地球上最古老的無脊椎動物,不僅種類繁多,而且分布廣泛,是海洋生物重要的組成部分。海綿體內(nèi)體表附著著包括真菌在內(nèi)的大量微生物,這些共附生微生物具有豐富的生物多樣性和化學(xué)多樣性,是天然先導(dǎo)藥物的重要來源之一。本論文以群海綿MNP-2015及其共附生真菌為研究對象,系統(tǒng)開展了其次級代謝產(chǎn)物及其體外生物活性研究。群海綿MNP-2015用甲醇浸提,并用乙酸乙酯萃取后獲得粗提物Ⅰ。從該海綿中分離得到5株共附生真菌(L1-2、L2-1、L4、L8-1和L14),通過抗菌活性篩選,得到一株活性較好的菌株L14;結(jié)合形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定結(jié)果,確定菌L14為曲霉(Aspergillus sp.),GeneBank Accession編號為MF093522。通過擴大培養(yǎng)和萃取,獲得菌L14發(fā)酵液粗提物Ⅱ。以活性追蹤為導(dǎo)向,采用現(xiàn)代色譜技術(shù)(pre-HPLC、semiprep-HPLC等),對粗提物Ⅰ和Ⅱ進行系統(tǒng)分離,共得到了 9個單體化合物(1-9),其中粗提物Ⅰ來源有5個(1-5),粗提物Ⅱ來源有4個(6-9)。運用現(xiàn)代波譜技術(shù)(NMR、MS等)和文獻對照,共鑒定了 7 個化合物,分別為 4-bromo-1H-pyrrole-2-carboxamide(1)、4-bromo-1H-pyrrole-3-carboxamide(2)和 5-bromo-N-(methox-ymethyl)-1H-pyrrole-2-carboxamide(3)、methyl 2-(4-hydroxyphenyl)acetate(6)、methyl 2-(2,5-dihydroxyphenyl)acetate(7)、dibutyl phthalate(8)和bis(6-methylheptyl)phthalate(9)。體外抗菌研究結(jié)果表明,化合物1-9體外抑制白色念珠菌(CandidaalbicansAY 204006)、大腸桿菌(Escherichia coli AB 94012)和金黃色葡萄球菌(StaphyloccocusaureusAB2010021)能力都較弱,MIC值不低于100μg/mL。
【學(xué)位授予單位】：浙江工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R284
【圖文】：

素Ｂ邋ＧＯＯｐｇ／ｍＬ）作為陽性對照，每組實驗做３３０°Ｃ正置培養(yǎng)４８邋ｈ后，觀察結(jié)果。逡逑性實驗逡逑備方法同上。上層用培養(yǎng)好的細菌菌液代替真菌菌陰性對照，等體積的氨芐青霉素鈉溶液（２００邋Ｍｇ／ｍ次平行實驗。３ＣＴＣ正置于恒溫培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)２４邋ｈ，果表明，粗提物Ｉ的抗菌活性既好又廣（圖２－１、較明顯的抑菌效果，尤其是對金黃色葡萄球菌，ｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ時都具有較好的抑制作用，抑菌２２ｍｍ。對于大腸桿菌和白色念珠菌，在樣品濃抑菌圈直徑分別達１３ｍｍ、２０ｍｍ與１５ｍｍ、２１ｍ

ＭＲ譜圖可以看出，群海綿粗提物Ｉ化合物較為豐富，點，本課題選用該群海綿粗提物Ｉ開展后續(xù)的天然產(chǎn)新穎、活性較好的天然產(chǎn)物。逡逑物的分離逡逑的預(yù)分離逡逑甲醇完全溶解，濃度約為３００邋ｍｇ／ｍＬ，再將溶液用孔徑進行濾過后，制備得到澄清的溶液。采用ｐｒｅｐ－ＨＰＬＣ制備高效液相色譜柱（ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＧｅｍｉｎｉ－ＮＸ，５0ｘ動相，將粗提物Ｉ分為Ｆｉ－Ｆｆｔ共６段組分，再分別進），并對６段物質(zhì)進行抑菌活性追蹤，最后根據(jù)抑菌活

【參考文獻】

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本文編號：2731100