【摘要】：目的:通過建立大鼠重型顱腦損傷模型,觀察大鼠血清白細胞介素(interleukin IL)-6、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor TNF-α)、S100B蛋白含量的改變,以及大鼠腦組織神經生長因子(NGF)、BCL-2蛋白、BAX蛋白的表達,探討甘草及甘草酸對重型顱腦損傷大鼠的神經保護作用。方法:將90只SPF級SD雄性大鼠隨機分為5組:正常對照組、假手術組、模型非用藥組、模型甘草水煎組、模型甘草酸組。每組各18只。建立大鼠重型顱腦損傷模型,造模成功后6h對各組大鼠進行神經功能缺損評分,甘草水煎組、甘草酸組分別予以2ml藥物灌胃,正常對照組、假手術組、模型非用藥組大鼠予以等量生理鹽水灌胃,每日一次。各組分別于灌胃后24h、72h、168h三個時間段取材,每組取6只大鼠。取材時先心臟采血4?mL,采用酶聯免疫吸附反應(ELISA)檢測血清中IL-6、TNF-α、S100B蛋白含量;內固定后斷頭取腦,光鏡下觀察大鼠腦組織病理學改變,同時采用免疫組織化學法測定大鼠腦組織NGF、BCL-2蛋白、BAX蛋白表達。結果:(1)模型非用藥組與正常組比較,在三個時間段神經功能缺損評分均明顯升高(P0.05);甘草水煎組及甘草酸組在三個時間段神經功能缺損評分與模型非用藥組比較明顯降低(P0.05),但甘草水煎組及甘草酸組神經功能缺損評分在三個時間段比較差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2)正常對照組、假手術組大鼠大腦腦組織細胞排列均勻,胞核染色為藍色,呈橢圓形,可見核仁,輪廓清楚,未見神經細胞變性壞死及炎癥細胞的浸潤。模型非用藥組可見細胞排列紊亂,細胞核固縮、碎裂明顯,同時可見明顯的組織細胞水腫及大量神經細胞壞死。甘草水煎組、甘草酸組大鼠腦組織疏松,細胞排列無序,神經細胞少見,少量的細胞核固縮、炎癥細胞浸潤,部分細胞水腫,膠質細胞增生。(3)除假手術組外,模型非用藥組、甘草水煎組和甘草酸組在三個時間段血清IL-6、TNF-α、S100B蛋白的含量均較正常組明顯增加(P0.05)。造模成功后24h,與正常對照組比較,模型非用藥組大鼠血清IL-6、TNF-α、S100B蛋白的含量即出現升高,同時在72h達到高峰,168h有所回落,但仍高于正常對照組;給予中藥甘草和甘草酸干預后,三個時間段大鼠血清IL-6、TNF-α、S100B蛋白的含量均低于模型非用藥組,差異明顯(P0.05)。但甘草水煎組和甘草酸在相同時間段比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。(4)正常組和假手術組大鼠在腦組織中均有少量NGF表達,兩組之間無差異(P0.05)。造模成功后24h,模型非用藥組大鼠腦組織中NGF表達即增加,一直持續(xù)至168h,但三個時間段差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。甘草水煎組和甘草酸組在24h與模型非用藥組比較NGF表達無差異,在第72h兩組表達明顯增加,差異顯著(P0.05),在168h達到高峰,但兩組之間差異無統(tǒng)計學意義。(5)除假手術組外,模型非用藥組、甘草水煎組和甘草酸組在各個時間段BCL-2蛋白的表達均增高,差異明顯(P0.05)。在模型非用藥組中,在72h中表達稍有回落,但三個時間段的差異不明顯(P0.05)。甘草水煎組在第24h即增加,并在168h達到高峰。甘草酸組在24h與模型非用藥組表達無差異,但在72h開始表達增加,一直持續(xù)至168h(P0.05)。甘草水煎組和甘草酸組在24h大鼠腦組織BCL-2蛋白陽性細胞的表達無差異(P0.05),但在第72h、168h,甘草水煎組BCL-2蛋白陽性細胞表達明顯增加(P0.05)。(6)正常組、假手術組大鼠腦組織均有少量BAX蛋白表達,兩組之間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),模型非用藥組、甘草水煎組和甘草酸組三個時間段BAX蛋白表達明顯增高(P0.05)。造模成功后第24h模型非用藥組大鼠即出現BAX蛋白表達,在72h達到高峰,在168h稍有回落。甘草水煎組和甘草酸組亦在72h出現高值,但較模型非用藥組明顯降低(P0.05),并且隨著用藥時間的延長在第168h明顯降低(P0.05)。但甘草水煎組和甘草酸組內比較無差異(P0.05)結論:甘草及甘草酸對重型顱腦損傷大鼠均具有神經保護作用,其機制與降低繼發(fā)性炎癥反應、抑制細胞凋亡有關;與甘草酸相比,甘草的神經保護作用更明顯,提示甘草中還有其他活性成分參與對受損神經細胞的保護作用。
【圖文】：

21圖 1 HE 染色 200x 倍光鏡大鼠腦組織病理表現：A：正常組；B：假手術組；C：模型非用藥組 72h；D：甘草水煎組 72h；E：甘草酸組 72h；Figurel 1 HE staining×200,The result of brain tissue pathology examinations: A: normal control group;B:sham operation group;C: model group at 72h;D: The liquorice water decoction group at 72h;E: Theglycyrrhizic acid group at 72h.

25圖 2 各組大鼠 NGF 表達比較（SP 法，Χ200 倍）：A：正常組；B：假手術組；C：模型非用藥組 72hD：甘草水煎組 72h；E：甘草酸組 72h。Figurel 2 Immunohistochemical staining，×200,The result of brain tissue pathology examinations: Anormal control group;B: sham operation group;C: model group at 72h;D: The liquorice water decoctiogroup at 72h;E: The glycyrrhizic acid groupgroup at 72h.7 甘草和甘草酸在顱腦損傷大鼠腦組織 BCL-2 蛋白表達除假手術組外，模型非用藥組、甘草水煎組和甘草酸組在各個時間段BCL-2 蛋白的表達均增高，差異明顯（P<0.05）。在模型非用藥組中，在 72表達稍有回落，，但三個時間段的差異不明顯（P>0.05）。甘草水煎組在第 24即增加，并在 168h 達到高峰。甘草酸組在 24h 與模型非用藥組表達無差異
【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

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本文編號：2687316