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壯骨止痛膠囊對(duì)成骨細(xì)胞NF-κB信號(hào)通路中NF-κB p65和IκBα蛋白的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-05-20 15:54
【摘要】:目的:觀察壯骨止痛膠囊對(duì)成骨細(xì)胞NF-κB信號(hào)通路的影響,探討其治療骨質(zhì)疏松的機(jī)制。方法:3月齡SD雌性大鼠60只,隨機(jī)分為空白組、模型組、壯骨止痛膠囊低劑量組、壯骨止痛膠囊中劑量組、壯骨止痛膠囊高劑量組和陽性對(duì)照組,每組10只。除空白組外,其余組大鼠采用雙側(cè)去卵巢法造模。術(shù)后6 d開始灌胃,連續(xù)1周。末次灌胃1 h后經(jīng)腹主動(dòng)脈采血,制備相應(yīng)組別含藥血清。取新生SD乳鼠頂骨、額骨進(jìn)行成骨細(xì)胞原代培養(yǎng),傳代后隨機(jī)分為6組:空白組、模型組、壯骨止痛膠囊低劑量組、壯骨止痛膠囊中劑量組、壯骨止痛膠囊高劑量組、陽性對(duì)照組。培養(yǎng)3代后,添加相應(yīng)含藥血清進(jìn)行干預(yù)。測(cè)定各組細(xì)胞ALP活性,茜素紅染色觀察細(xì)胞鈣化情況,免疫組化法、Western blot法測(cè)定各組細(xì)胞NF-κB p65和IκBα蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:成骨細(xì)胞經(jīng)茜素紅染色后出現(xiàn)紅色鈣結(jié)節(jié)。模型組ALP活性明顯低于空白組(P<0.01),與模型組比較,壯骨止痛膠囊低劑量組ALP活性升高(P<0.05),中劑量組與高劑量組ALP活性也顯著升高(P<0.01)。免疫組化法、Westernblot法測(cè)定蛋白表達(dá)情況,模型組NF-κB p65和IκBα蛋白表達(dá)明顯高于空白組(P<0.01),與模型組比較,壯骨止痛膠囊高劑量組與中劑量組NF-κB p65和IκBα蛋白表達(dá)顯著下降(P<0.01)。結(jié)論:壯骨止痛膠囊能提高成骨細(xì)胞ALP活性,降低成骨細(xì)胞NF-κB p65和IκBα蛋白表達(dá),發(fā)揮抗絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的作用。
【圖文】:

成骨細(xì)胞,免疫組化法,骨細(xì)胞


成骨細(xì)胞茜素紅染色(×100)
【學(xué)位授予單位】:湖南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R285.5

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本文編號(hào):2672851

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