【摘要】：目的使用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)誘導BV2小膠質細胞來建立慢性神經退行性疾病的炎癥反應的細胞模型,通過采用細胞生物學、分子生物學、免疫組化等實驗方法來探究青蒿素(Artemisinin,ART)對該模型炎癥介質釋放的影響,旨在研究青蒿素對慢性神經退行性疾病神經細胞炎癥反應的抑制作用及其機制。方法常規(guī)培養(yǎng)傳代小鼠BV2小膠質細胞,將處于對數期生長狀態(tài)良好的BV2細胞用于進一步的實驗。使用不同濃度的青蒿素(ART)來處理經過脂多糖(LPS)誘導的BV2小膠質細胞。采用CCK8法來檢測ART對BV2小膠質細胞的作用濃度。通過ELISA來檢測ART對促炎因子白細胞介素1β(IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的分泌水平的影響。采用Western blot來檢測NF-κB蛋白(P65)、IKBα的表達水平,以及ART對誘導型一氧化氮合酶(i NOS)和環(huán)氧合酶2(COX-2)的基因表達的影響。結果通過CCK8法檢測出當ART的劑量范圍為0.1至10μmol/L時其對BV2小膠質細胞不具有明顯的毒性作用,為方便進一步的實驗操作,因此選擇1μmol/L作為ART的有效作用濃度。ELISA實驗結果表明,在使用ART預先處理過的BV2小膠質細胞中,促炎因子IL-1β、TNF-α的分泌水平顯著降低。Western blot的結果顯示,ART預處理組細胞中的NF-κB(P65)、IKBα的蛋白表達水平顯著升高,炎癥誘導酶i NOS、COX-2的表達水平則顯著降低。結論ART可以調節(jié)LPS活化的BV2小膠質細胞中炎性因子的分泌及炎癥誘導酶的表達,發(fā)揮其抗炎作用,這一抗炎作用可能是通過對NF-κB信號通路的調控來實現的。
【圖文】：

1 不同濃度的 ART 對 BV2 小膠質細胞活性的影注: * P ＜ 0.05，，與對照組相比cts of different concentrations of ART on the viability BV2 小膠質細胞內炎性因子釋放的影響測結果表明，與對照組相比，LPS 誘導后的 BV2 小TNF-α 的分泌水平明顯升高（P＜0.01）；與 LPS 組相/L）促炎因子 IL-1β、TNF-α 的分泌水平顯著降低（

圖 3 Western blot 檢測各組細胞內 P65、IKBα、iNOS、COX2 的表a、b、c、d 分別為 P65、IKBα、iNOS、COX-2 相對表達量注：* P ＜0.01 與對照組相比，**P＜0.01 與 LPS 組相比，#P＜0.05 與對比，##P＜0.05 與 LPS 組相比Fig.3 The expression levels of P65, IKBα, iNOS and COX2 in each grodetected by Western blot
【學位授予單位】：蚌埠醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R285.5

【參考文獻】

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1 抗晶晶;王輝;;蒲公英三萜類物質的抗炎作用研究進展[J];中國野生植物資源;2015年01期

本文編號：2664742