本文關(guān)鍵詞：高仿真殼聚糖神經(jīng)支架的制備及其橋接神經(jīng)缺損的實(shí)驗(yàn)研究

  更多相關(guān)文章： 仿真 殼聚糖 神經(jīng)缺損 組織工程 神經(jīng)再生

【摘要】： 周圍神經(jīng)缺損是平時(shí)與戰(zhàn)時(shí)最常見的創(chuàng)傷類型之一,常導(dǎo)致患者感覺和運(yùn)動(dòng)功能喪失,是目前尚未解決的臨床難題之一。自體神經(jīng)移植是治療周圍神經(jīng)缺損的金標(biāo)準(zhǔn),主要優(yōu)勢是其修復(fù)效果明確,但供體來源有限、供區(qū)功能損害以及供體和受體神經(jīng)尺寸和類型不匹配等原因限制了自體神經(jīng)移植的應(yīng)用。組織工程學(xué)的發(fā)展為神經(jīng)缺損的治療帶來了希望。目前已經(jīng)有各種超微結(jié)構(gòu)的神經(jīng)支架被相繼開發(fā),并被嘗試應(yīng)用于神經(jīng)缺損的治療之中,但可惜的是其在體修復(fù)效果均不甚理想,主要的原因之一是神經(jīng)支架的內(nèi)部結(jié)構(gòu)與正常神經(jīng)的超微結(jié)構(gòu)相差較大。目前國際公認(rèn)的最理想的神經(jīng)支架應(yīng)該具有與正常神經(jīng)基底膜高度仿真的軸向微管樣結(jié)構(gòu)。鑒于此,本研究以殼聚糖為主要原料,通過前期已獲國家發(fā)明專利的梯度冷淋技術(shù),成功構(gòu)建了高仿真神經(jīng)支架,并在大鼠坐骨神經(jīng)缺損模型中,從形態(tài)學(xué)和功能學(xué)兩方面將高仿真支架與自體神經(jīng)移植進(jìn)行對比,綜合評估其修復(fù)效果。全文共分為三部分: 第一部分:高仿真殼聚糖支架材料的制備 目的:構(gòu)建在超微結(jié)構(gòu)上與正常神經(jīng)基底膜結(jié)構(gòu)高度仿真的組織工程神經(jīng)支架。 方法:以殼聚糖為原料,應(yīng)用改良的梯度冷淋技術(shù)制備高仿真神經(jīng)支架,掃描電鏡觀察其內(nèi)部結(jié)構(gòu)。 結(jié)果:本實(shí)驗(yàn)制備的殼聚糖神經(jīng)支架在縱截面上為相互平行的微管樣結(jié)構(gòu),微管相對均一,管徑為54.26±12.1μm (范圍:45 ~ 75μm);神經(jīng)支架的橫截面類似于蜂窩樣結(jié)構(gòu)。 結(jié)論:利用前期開發(fā)的梯度冷淋技術(shù)制備的神經(jīng)支架的超微結(jié)構(gòu)高度仿真于正常神經(jīng)的基底膜結(jié)構(gòu),有望成為神經(jīng)缺損修復(fù)中自體神經(jīng)的替代物。 第二部分:高仿真殼聚糖支架的基本性能測定 目的:對殼聚糖支架的性能進(jìn)行優(yōu)化和改進(jìn),并測定殼聚糖支架的相關(guān)特征和參數(shù)。 方法:測定殼聚糖支架的孔隙率、表觀密度,在此基礎(chǔ)上利用京尼平(genipin)對殼聚糖支架進(jìn)行交聯(lián),確定殼聚糖材料的交聯(lián)度與交聯(lián)時(shí)間以及交聯(lián)劑濃度的關(guān)系,同時(shí)評價(jià)交聯(lián)后殼聚糖材料的細(xì)胞相容性,對比殼聚糖支架交聯(lián)前后的降解性以及力學(xué)性能,以全面了解高仿真殼聚糖神經(jīng)支架的基本性能。 結(jié)果:殼聚糖神經(jīng)支架的孔隙率為85.13±2.89%,表觀密度為0.0623±0.0242mg/mm3;應(yīng)用京尼平交聯(lián)殼聚糖材料,材料的交聯(lián)度隨交聯(lián)時(shí)間延長而增加,隨交聯(lián)劑濃度增大而增加。此外,殼聚糖支架經(jīng)京尼平交聯(lián)后,降解性以及力學(xué)強(qiáng)度有了明顯改善,同時(shí)交聯(lián)后的材料具有良好的細(xì)胞相容性,可以滿足在體修復(fù)神經(jīng)缺損的要求。 結(jié)論:殼聚糖支架經(jīng)京尼平交聯(lián)后,可以滿足在體移植的要求。 第三部分:殼聚糖支架修復(fù)坐骨神經(jīng)缺損的有效性評價(jià) 目的:評價(jià)高仿真殼聚糖支架在體橋接大鼠15mm坐骨神經(jīng)缺損的修復(fù)效果。 方法:以前期制備的高仿真神經(jīng)支架修復(fù)大鼠15mm坐骨神經(jīng)缺損,應(yīng)用形態(tài)計(jì)量學(xué)、逆行示蹤、神經(jīng)電生理以及行為學(xué)檢測評價(jià)該高仿真支架的修復(fù)效果。 結(jié)果:本實(shí)驗(yàn)構(gòu)建的殼聚糖支架具有軸向平行排列的微管樣超微結(jié)構(gòu),該結(jié)構(gòu)高度仿真于正常神經(jīng)基底膜結(jié)構(gòu)。在橋接大鼠15mm坐骨神經(jīng)缺損的實(shí)驗(yàn)中,該仿真支架可取得與自體神經(jīng)移植相似的修復(fù)效果。 結(jié)論:高仿真殼聚糖神經(jīng)支架在體修復(fù)效果與自體神經(jīng)移植相似,有望成為自體神經(jīng)移植的替代產(chǎn)品。
【關(guān)鍵詞】：仿真 殼聚糖 神經(jīng)缺損 組織工程 神經(jīng)再生
【學(xué)位授予單位】：第四軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R651.3;R82
【目錄】：

• 縮略語表5-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-13
• 前言13-14
• 文獻(xiàn)回顧14-29
• 正文29-56
• 第一部分：高仿真殼聚糖支架材料的制備29-36
• 1 材料和方法29-31
• 2 結(jié)果31-32
• 3 討論32-36
• 第二部分：高仿真殼聚糖支架的基本性能測定36-46
• 1 材料和方法36-39
• 2 結(jié)果39-42
• 3. 討論42-46
• 第三部分：殼聚糖支架修復(fù)坐骨神經(jīng)缺損有效性評價(jià)46-56
• 1 材料和方法46-49
• 2 結(jié)果49-53
• 3 討論53-56
• 小結(jié)56-57
• 參考文獻(xiàn)57-65
• 個(gè)人簡歷和研究成果65-66
• 致謝66

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本文編號：953670