本文關(guān)鍵詞：模擬失重對(duì)大鼠骨折愈合的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】： 前言 模擬失重條件下細(xì)胞的生長(zhǎng)與分裂受到影響，細(xì)胞間的接觸減弱，骨髓脫礦物鹽，造成骨質(zhì)疏松或骨萎縮，不利于骨折愈合及創(chuàng)傷組織的再生。骨短距蛋白是機(jī)體自身骨組織產(chǎn)生的一種具有局部調(diào)節(jié)作用的活性物質(zhì)，在骨骼的構(gòu)建與重塑中起到了非常重要的作用，如骨形成蛋白(BMP)、骨鈣素(OC)、骨橋素(OPN)等。對(duì)骨短距蛋白進(jìn)行深入研究，有助于揭示骨代謝異常機(jī)理。已有研究證明，在失重條件下，某些蛋白的活性及形成會(huì)受到影響，進(jìn)而導(dǎo)致在骨骼結(jié)構(gòu)功能方面產(chǎn)生變化。目前研究較多的是OC，許多文獻(xiàn)報(bào)道在失重條件下骨和血清OC含量顯著降低；但對(duì)BMP的研究卻不多。此外，目前國(guó)內(nèi)外研究資料表明，大鼠頭低尾部懸吊的動(dòng)物模型是比較理想的模擬失重動(dòng)物模型，已在醫(yī)學(xué)界廣泛加以采用。故本研究主要應(yīng)用組織化學(xué)、分子生物學(xué)的技術(shù)，，觀察后肢骨折的大鼠在模擬失重情況下的愈合過(guò)程、組織形態(tài)和細(xì)胞因子的變化及其特點(diǎn)。闡明模擬失重影響骨折的機(jī)理，為今后航空航天醫(yī)學(xué)的發(fā)展應(yīng)用提供一定的參考意義。 材料與方法 本研究將64只大鼠隨機(jī)分為八組：失重1組(A)：骨折形成后立即對(duì)動(dòng)物頭低位尾懸吊7天取材；失重2組(B)：骨折形成后立即對(duì)動(dòng)物頭低位尾懸吊14天取材；失重3組(C)：骨折形成后立即對(duì)動(dòng)物頭低位尾懸吊21天取材；失重4組(D)：骨折形成后立即對(duì)動(dòng)物頭低位尾懸吊28天取材；對(duì)照1組(E)：骨折形成后動(dòng)物自由活動(dòng)7天取材；對(duì)照2組(F)：骨折形成后動(dòng)物自由活動(dòng) 14天取材；對(duì)照3組（G＊骨折形成后動(dòng)物自由活動(dòng)21天取材；對(duì) 照4組（H廠骨折形成后動(dòng)物自由活動(dòng)28天取材。各組研究對(duì)象 年齡、體重＼性別、營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)匹配。 首先建立大鼠骨折模型：麻醉方法采用氯胺酮ketamine和 846液，注射途徑采用腹腔內(nèi)注射。手術(shù)方法是隨機(jī)選擇大鼠的 單側(cè)后肢（左或右廠將大鼠單側(cè)跳骨中段用剪刀剪斷，再縫合傷 口，完成骨折模型的建立。然后建立骨折大鼠失重模型：在麻醉狀 態(tài)下，將大鼠尾部使用氧化鋅膠布固定在鼠籠頂壁，上肢可活動(dòng)并 觸及籠底。鼠與鼠之間及鼠與籠壁間保持足夠的距離以免影響頭 低尾懸吊模型的建立。常規(guī)喂養(yǎng)并定期檢查及清理。最后使用頸 部折斷法處死大鼠，按病理科要求取得臟骨標(biāo)本并固定。使用二 步法免疫組化檢測(cè)BMP。同時(shí)行透射電鏡觀察標(biāo)本。 實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果 一、免疫組化的定量標(biāo)準(zhǔn)：隨機(jī)選取10個(gè)高倍鏡視野，平均陽(yáng) 性細(xì)胞＜10個(gè)，定為陰性（一人平均陽(yáng)性細(xì)胞10－50，為陽(yáng)性 （十八平均陽(yáng)性細(xì)胞＞50個(gè)，為強(qiáng)陽(yáng)性（－H－－－－－－－一人 1．A組與 E組相 匕，X‘＝1．640（P＞0．05），無(wú)顯著性差異。 2．B組與 F組相 匕，X‘＝3．000（0．05＜P＜0．門(mén)，有顯著性差 異。 3．C組與 G組相匕，X丁一4．063（0．025＜P＜0．05），有顯著性 差異。 4．D組與 H組相匕，X’＝4．655（0．025＜P＜0．05），有顯著性 差異。 二、光鏡、電鏡病理結(jié)果： 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，骨折早期及晚期的愈合明顯延遲。 ·2· 討 論 失重是身體任何部分或者系統(tǒng)之間沒(méi)有壓力差，它引起骨一 肌肉形態(tài)重力負(fù)荷的消失。失重對(duì)骨骼的影響是：1．骨膜生成受 抑制，在醫(yī)骨干能端較明顯。2．出現(xiàn)生長(zhǎng)停止線。3．干能區(qū)成骨 細(xì)胞數(shù)目減少。骨的變化主要是由于代謝和功能負(fù)荷水平的改變 引起。BMP是一種與骨細(xì)胞分化有關(guān)的酸性蛋白，分子量 17500D。目前已知有 17 種，f【MPZ－17屬于 TGF－p超家族。 BMP能夠誘導(dǎo)血管周圍間充質(zhì)細(xì)胞分化為軟骨細(xì)胞和骨細(xì)胞，從 而誘導(dǎo)骨形成。BMP可由成骨細(xì)胞產(chǎn)生并主要與骨基質(zhì)結(jié)合，很 少釋放到骨外。BMP的主要生物學(xué)作用是誘導(dǎo)未分化的間質(zhì)細(xì) 胞分化形成軟骨和新生骨，還能增加 AKP活性和膠原合成。 在飛行大鼠骨折愈合的影響研究中發(fā)現(xiàn)骨折愈合被抑制，骨 癡形成甚少，碎骨片不能被充分固定，類骨質(zhì)相對(duì)容量上升，以及 與其共存的成骨細(xì)胞數(shù)量和功能下降，導(dǎo)致失重狀態(tài)下新形成骨 的礦物質(zhì)紊亂。對(duì)已骨折的脈骨和未骨折的勝骨的分析顯示，真 空失重狀態(tài)下或尾部懸吊狀態(tài)下14天可產(chǎn)生相似的變化。后肢 懸吊亦稱頭低位懸吊或尾懸吊，是一種消除后服負(fù)荷以模擬空間 微重力環(huán)境的方法。頭低位傾斜被認(rèn)為是繼研究人員發(fā)現(xiàn)在模擬 人在微重力下的情況中頭低位臥床比水平臥床要好之后的理想方 法。在這類研究中觀察到的生理變化和體液移動(dòng)改變類似于航天 員在空間飛行期問(wèn)發(fā)生的變化。除此之外，頭低位定向允許研究 人員在懸吊動(dòng)物時(shí)使其前肢保持與”地面”的接觸，而后肢被隨意 懸吊。這種姿勢(shì)可使研究深人到長(zhǎng)期去負(fù)載對(duì)承重骨和與運(yùn)動(dòng)和 狀態(tài)相關(guān)的骨骼生理和形態(tài)的影響。目前，大鼠頭低尾部懸吊的 動(dòng)物模型是較為理想的模擬失重的動(dòng)物模型。 有研究顯示太空飛行期間骨折愈合拖延。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)尾吊組 ·3· 骨質(zhì)和骨膜中陽(yáng)性著色明顯弱于對(duì)照組，且骨髓細(xì)胞中BMP一二
【關(guān)鍵詞】：模擬失重 骨形成蛋白 透射電鏡 大鼠
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號(hào)】：R85
【目錄】：

• 一、 中文摘要3-7
• 二、 英文摘要7-12
• 三、 英文縮略語(yǔ)12-13
• 四、 前言13-14
• 五、 實(shí)驗(yàn)材料14-15
• 六、 實(shí)驗(yàn)方法15-16
• 七、 實(shí)驗(yàn)結(jié)果16-24
• 八、 討論24-27
• 九、 結(jié)論27-28
• 十、 參考文獻(xiàn)28-30
• 十一、 致謝30-31
• 十二、 個(gè)人簡(jiǎn)介31

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 崔偉;骨短距蛋白與骨再建[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;1991年04期

本文編號(hào)：588738