本文關(guān)鍵詞：紫杉醇PLGA口服納米粒的制備及生物利用度的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】： 紫杉醇(Paclitaxel,TAX)是抗腫瘤藥物,在臨床上已得到廣泛應(yīng)用,特別是對乳腺癌、卵巢癌的治療作用明顯。由于其水溶性差,臨床使用的紫杉醇注射液中的紫杉醇是靠聚氧乙烯蓖麻油(CremophorEL)與無水乙醇以1:1的混合液來穩(wěn)定和溶解。但聚氧乙烯蓖麻油可促進(jìn)組胺釋放,常引起嚴(yán)重的過敏反應(yīng)和其他不良反應(yīng)。為了解決上述問題,研究不含Cremophor EL并能提高紫杉醇生物利用度的制劑成為當(dāng)前的熱點。把紫杉醇制備成口服納米給藥系統(tǒng)后,則不僅能減少毒副作用,增加其穩(wěn)定性,而且方便儲存和運輸。本文制備了紫杉醇納米粒(TAX-NPs),優(yōu)化了其處方和制備工藝,并對其進(jìn)行了體內(nèi)外評價。主要內(nèi)容和結(jié)果如下: 1.建立了紫杉醇樣品HPLC測定方法,并對其線性范圍、精密度、回收率等進(jìn)行了驗證,結(jié)果表明該方法符合分析要求。 以生物可降解聚合物——聚丙交酯乙交酯共聚物(PLGA)為載體,采用乳化-分散法制備了TAX-NPs;以納米粒的粒徑和包封率為評價指標(biāo),考察了處方及其工藝因素對制劑質(zhì)量的影響;對TAX-NPs的基本性質(zhì),體外穩(wěn)定性和釋藥特征進(jìn)行了考察;用差示掃描量熱法(DSC)及X射線粉末衍射(XRD)分析了紫杉醇在納米粒中的存在狀態(tài),TAX-NPs的平均粒徑為(99±7.6)nm,Zeta電位為(78.3±5.87)mV,包封率和載藥量分別為(56.99±0.29)%和(7.04±0.13)%。凍干TAX-NPs在4℃放置6個月穩(wěn)定性良好。DSC及XRD表明TAX以分子形態(tài)被有效地包裹在納米粒中。TAX-NPs在兩種不同的pH值PBS釋放介質(zhì)中進(jìn)行體外釋放,以模擬生物體內(nèi)環(huán)境,在pH值越低的條件下,藥物釋放越快,這對于載藥納米粒在偏酸性的腫瘤環(huán)境下發(fā)揮抗腫瘤作用非常有利。 2.研究Caco-2細(xì)胞對納米粒的攝取及其影響因素,以評價此種納米粒作為口服抗腫瘤藥物載體的可行性。通過包裹疏水性熒光探針香豆素-6(Coumarin-6,Cou-6)標(biāo)記納米粒,采用熒光酶標(biāo)儀檢測細(xì)胞內(nèi)Cou-6的熒光強(qiáng)度,研究粒徑,、孵育時間,、納米粒濃度,、納米粒的表面性質(zhì)對Caco-2細(xì)胞攝取納米粒的影響。采用激光共聚焦顯微鏡觀察Caco-2細(xì)胞對納米粒的攝取。與聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol,PVA)做乳化劑制備的納米粒相比,雙十二烷基二甲基溴化銨(Didodecyldimethyl ammonium bromide,DMAB)作為乳化劑制備的納米粒顯著增加了Caco-2細(xì)胞對納米粒的攝取率,細(xì)胞對粒徑為100 nm左右的納米粒的攝取率最高。結(jié)果證明納米�？山�(jīng)胃腸道給藥吸收入血。 3.利用大鼠在體腸吸收動力學(xué)實驗,研究了紫杉醇納米粒及其原料藥在腸道的吸收情況,吸收動力學(xué)方程分別為:紫杉醇納米粒lnX_(剩余)=lnX_0-0.154×t;紫杉醇原料藥:lnX_(剩余)=lnX_0-0.0023×t,相關(guān)系數(shù)r分別為0.9460和0.9102。二者的吸收具有顯著性差異(P＜0.05),紫杉醇納米粒在小腸中的吸收速率常數(shù)明顯大于紫杉醇原料藥。 4.建立了紫杉醇的血藥濃度測定方法。色譜條件為:色譜柱:Diamonsil C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm);流動相:乙腈/水(47:53,v/v);柱溫:30℃;檢測波長:227nm;流速:1.0ml/min;進(jìn)樣量:20μl。高、中、低濃度回收率分別為91.23%、92.68%、89.38%。日內(nèi)RSD分別為3.81%、3.49%、2.89%,日間RSD分別為5.12%、4.59%、3.48%。最低定量濃度為0.02μg/ml。所建立方法適合紫杉醇血藥濃度的測定。 以健康的SD大鼠為受試對象,紫杉醇注射液為參比制劑,采用隨機(jī)對照方法,研究納米粒在動物體內(nèi)的生物利用度。實驗結(jié)果表明紫杉醇納米粒絕對生物利用度為19.5%,說明用納米載藥系統(tǒng)傳輸紫杉醇促進(jìn)了紫杉醇的吸收,提高了其口服生物利用度。
【關(guān)鍵詞】：紫杉醇 聚丙交酯乙交酯共聚物 納米粒 Caco-2細(xì)胞 在體腸吸收 生物利用度
【學(xué)位授予單位】：江蘇大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2010
【分類號】：R943
【目錄】：

• 摘要5-8
• ABSTRACT8-16
• 第一章 緒論16-46
• 1.抗腫瘤藥物紫杉醇的研究16-24
• 1.1 歷史與現(xiàn)狀16-17
• 1.2 紫杉醇的抗癌機(jī)理17
• 1.3 紫杉醇制劑研究進(jìn)展17-21
• 1.4 臨床應(yīng)用21-24
• 2.納米粒給藥系統(tǒng)24-36
• 2.1 納米粒用作藥物載體的顯著優(yōu)點24-25
• 2.2 納米粒的種類25-26
• 2.3.納米粒的制備方法26-32
• 2.4 納米粒在醫(yī)藥領(lǐng)域中的應(yīng)用32-36
• 3.本課題的立題依據(jù)及研究意義36-38
• 參考文獻(xiàn)38-46
• 第二章 紫杉醇口服納米粒的制備及特性研究46-65
• 1 材料與儀器46-47
• 1.1 材料46
• 1.2 儀器46-47
• 2 實驗方法47-52
• 2.1 TAX的基本性質(zhì)47
• 2.2 體外分析方法的確立47-48
• 2.2.1 檢測波長的選擇47
• 2.2.2 色譜條件47
• 2.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備47
• 2.2.4 精密度47-48
• 2.2.5 最低檢出限與最低定量限48
• 2.3 TAX-NPs的制備48
• 2.4 冷凍干燥工藝考察48
• 2.5 納米粒的載藥量與包封率的測定48-49
• 2.5.1 測定方法48-49
• 2.5.2 液相色譜系統(tǒng)的可行性驗證49
• 2.5.3 方法回收率49
• 2.6 正交設(shè)計49-50
• 2.6.1 單因素實驗49-50
• 2.6.2 正交優(yōu)化設(shè)計50
• 2.6.3 最優(yōu)處方工藝驗證50
• 2.7 TAX-NPs的基本性質(zhì)考察50-51
• 2.7.1 形態(tài)觀察50-51
• 2.7.2 粒徑和Zeta電位測定51
• 2.7.3 包封率與載藥量的測定51
• 2.7.4 X-射線粉末衍射分析51
• 2.7.5 差示掃描量熱法分析51
• 2.8 TAX-NPs體外穩(wěn)定性考察51
• 2.9 TAX-NPs體外釋藥特征考察51-52
• 3 結(jié)果與討論52-64
• 3.1 體外分析方法的確立52-53
• 3.1.1 檢測波長的選擇52
• 3.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備52
• 3.1.3 精密度52-53
• 3.2 冷凍干燥工藝考察53
• 3.2.1 添加劑種類的影響53
• 3.2.2 添加劑濃度的影響53
• 3.3 納米粒的載藥量與包封率的測定53-54
• 3.3.1 液相色譜系統(tǒng)的可行性驗證53-54
• 3.3.2 方法回收率54
• 3.4 正交優(yōu)化設(shè)計54-58
• 3.4.1 單因素實驗54-57
• 3.4.2 正交優(yōu)化設(shè)計57-58
• 3.4.3 最優(yōu)處方工藝驗證58
• 3.4 TAX-NPs的基本性質(zhì)58-64
• 3.4.1 TAX-NPs的粒徑、Zeta電位與形態(tài)58-60
• 3.4.2 包封率與載藥量的測定60
• 3.4.3 X-射線粉末衍射(X-)分析60-61
• 3.4.4 差示掃描量熱法分析61-62
• 3.4.5 TAX-NPs體外穩(wěn)定性考察62
• 3.4.6 TAX-NPs體外釋藥特征考察62-64
• 4 本章小結(jié)64-65
• 第三章 Caco-2細(xì)胞對納米粒的攝取研究65-72
• 1 材料與儀器65-66
• 1.1 材料65-66
• 1.2 儀器66
• 2 實驗方法66-67
• 2.1 Cou-6-PLGA-NPs的制備66
• 2.2 Caco-2細(xì)胞的培養(yǎng)66
• 2.3 細(xì)胞對納米粒的攝取66-67
• 2.4 激光共聚焦掃描顯微鏡67
• 3 結(jié)果與討論67-70
• 3.1 細(xì)胞對納米粒的攝取研究67-70
• 3.2 激光掃描共聚焦70
• 4 本章小結(jié)70-72
• 第四章 紫杉醇納米粒大鼠在體腸吸收試驗研究72-77
• 1 材料與儀器72
• 1.1 材料72
• 1.2 儀器72
• 2 實驗方法72-74
• 2.1 供試液與酚紅液的配制72-73
• 2.2 劑量的選擇73
• 2.3 腸循環(huán)液中酚紅濃度的測定73
• 2.4 腸循環(huán)液中紫杉醇的含量測定73
• 2.5 在體腸吸收試驗影響因素73-74
• 2.6 在體腸吸收試驗74
• 3 結(jié)果與討論74-76
• 3.1 酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備74
• 3.2 液相色譜系統(tǒng)的可行性驗證74-75
• 3.3 在體腸吸收試驗75-76
• 4 本章小結(jié)76-77
• 第五章 紫杉醇口服納米粒大鼠體內(nèi)生物利用度研究77-84
• 1 材料與儀器77
• 1.1 材料77
• 1.2 儀器77
• 2 實驗方法77-79
• 2.1 血漿中紫杉醇測定方法的建立77-79
• 2.1.1 色譜條件77
• 2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制77-78
• 2.1.3 血樣供試品的處理78
• 2.1.4 方法專屬性考察78
• 2.1.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備78
• 2.1.6 精密度試驗78
• 2.1.7 提取回收率試驗78-79
• 2.1.8 穩(wěn)定性試驗79
• 2.2 大鼠體內(nèi)生物利用度研究79
• 3 結(jié)果與討論79-83
• 3.1 血漿中紫杉醇測定方法的建立79-81
• 3.1.1 方法專屬性考察79-80
• 3.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線和線性范圍80
• 3.1.3 精密度80-81
• 3.1.4 提取回收率81
• 3.1.5 穩(wěn)定性81
• 3.2 大鼠體內(nèi)生物利用度研究81-83
• 4 本章小結(jié)83-84
• 全文總結(jié)84-86
• 參考文獻(xiàn)86-89
• 致謝89-90
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的相關(guān)論文目錄90

【引證文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 應(yīng)景艷;徐愛仁;徐錦龍;馬衛(wèi)成;;紫杉醇PLGA納米粒注射劑對小鼠肺轉(zhuǎn)移黑色素瘤的治療作用[J];醫(yī)藥導(dǎo)報;2012年07期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 薛靜;聚（乳酸—羥基乙酸）共聚物納米粒藥物載體的制備及性能研究[D];華南理工大學(xué);2011年

2 楊曉燕;透明質(zhì)酸修飾載紫杉醇納米脂質(zhì)載體的研究[D];山東大學(xué);2012年

3 江偉民;新型聚乙二醇接枝聚乳酸納米粒作為親水和疏水類藥物載藥系統(tǒng)的研究[D];重慶大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：紫杉醇PLGA口服納米粒的制備及生物利用度的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：411849