本文關鍵詞：全天麻膠囊及天麻素聯合卡馬西平抗癲癇機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 考察全天麻膠囊及天麻素聯合卡馬西平對青霉素誘導的癲癇大鼠抑制作用；研究天麻素與卡馬西平在青霉素誘導的癲癇大鼠體內藥動學之間的相互影響；通過免疫組化和Western-blot方法研究全天麻膠囊及天麻素聯合卡馬西平,對癲癇大鼠海馬體P-gP表達的影響；通過實時定量熒光PCR研究全天麻膠囊及天麻素聯合卡馬西平,對癲癇大鼠海馬體中MDR1和Abcc1基因表達的影響。 方法 1、將SD大鼠分為6組,每組6只,分別為空白對照組,卡馬西平組、卡馬西平聯合全天麻膠囊組、卡馬西平聯合天麻素組、全天麻膠囊組、天麻素組。空白對照組大鼠給予生理鹽水,其它各組給予對應藥物,每日一次,連續(xù)給藥7天,腹腔注射720萬單位/kg青霉素,連續(xù)2h觀察各組大鼠癲癇發(fā)作情況,并記錄發(fā)作的等級、持續(xù)時間,潛伏時間,死亡率。 2、將青霉素誘導癲癇SD大鼠分為5組,每組18只,即為卡馬西平組、卡馬西平聯合全天麻膠囊組、卡馬西平聯合天麻素組、全天麻膠囊組、天麻素組,在灌胃第一天、第七天、第十五天,在各組大鼠中隨機選取6只大鼠,在規(guī)定的時間點采集血樣和腦組織,處理后用HPLC分析血藥濃度和腦藥濃度,用DAS2.0藥動學軟件計算各組大鼠藥動學參數。 3、將青霉素誘導癲癇SD大鼠分為6組,每組18只,分別為空白模型對照組,卡馬西平組、卡馬西平聯合全天麻膠囊組、卡馬西平聯合天麻素組、全天麻膠囊組、天麻素組,另選取正常組大鼠6只為空白對照組,給予生理鹽水和相對應的藥物灌胃處理,在灌胃第一天、第七天、第十五天,在各組大鼠中隨機選取6只,用規(guī)定的方法處理,分離大鼠海馬體,進行免疫組化、wetern-blot、實時定量熒光PCR和普通病理學分析。結果 1、卡馬西平聯合全天麻膠囊及天麻素對青霉素誘導的癲癇大鼠的發(fā)作級別、潛伏時間、持續(xù)時間、死亡率均有顯著影響,聯合組優(yōu)于單用組,研究發(fā)現聯合全天麻膠囊組比聯合天麻素組抑制效果更加明顯,全天麻膠囊組、天麻素組較卡馬西平組抑制效果差,其中全天麻膠囊組抑制效果優(yōu)于天麻素組。 2、全天麻膠囊及天麻素對卡馬西平體內藥動學參數有影響,卡馬西平對天麻素的體內血藥藥動學數據有影響。隨著給藥天數的增加,卡馬西平最大血藥濃度和腦藥濃度呈下降趨勢,聯合應用全天麻膠囊后這種下降趨勢減弱�？R西平腦內濃度受全天麻膠囊影響,天麻素腦內濃度不受卡馬西平影響。 3、灌胃給予卡馬西平,青霉素誘導的癲癇大鼠海馬體P-糖蛋白表達量增加,聯合應用全天麻膠囊組,P-糖蛋白表達較卡馬西平組、天麻素組降低；普通病理學研究發(fā)現,卡馬西平對于青霉素誘導的癲癇大鼠損傷細胞無修復作用,聯合應用全天麻膠囊后,修復作用明顯,天麻素無修復作用。 4、癲癇大鼠海馬體P-gp表達較正常大鼠增加；隨著給藥時間增加,卡馬西平組、天麻素組及兩者合用組,P-gp表達增加,天麻素誘導P-gp表達增加明顯弱于卡馬西平,加入全天麻膠囊后,P-gp的表達增加的趨勢明顯減弱。 5、隨著給藥時間增加,卡馬西平組、卡馬西平聯合天麻素組、天麻素組MDR1a基因表達增加,給藥第七天,MDR1b基因下降,在第十五天,增加。全天麻膠囊調低MDR1a及MDR1b基因,天麻素則調高MDR1a及MDR1b基因水平。隨著給藥時間的增加各組MRP1/Abcc1基因表達上調,卡馬西平組上調顯著。 結論 全天麻膠囊及天麻素聯合卡馬西平,對青霉素誘導的癲癇大鼠有顯著抑制作用,抑制效果較卡馬西平組好；全天麻膠囊及天麻素對卡馬西平的藥動學數據有影響,可促進卡馬西平在大鼠體內分布。全天麻膠囊對青霉素誘導的癲癇大鼠海馬體損傷細胞有修復作用。全天麻膠囊能影響海馬體中P-gp的表達,及MDR1和MRP1/Abcc1基因表達。這對研究抗癲癇中藥作用機制,提供新的思路和理論支撐。
【關鍵詞】：卡馬西平 全天麻膠囊 天麻素 青霉素 癲癇模型 P-GP 藥代動力學 Western-blot 實時定量熒光PCR 免疫組織化學法
【學位授予單位】：蘭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R742.1;R965
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-12
• 引言12-18
• 1 多藥耐藥研究進展12-14
• 2 中醫(yī)藥治療癲癇研究進展14-16
• 3 中西藥聯合治療癲癇研究進展16-18
• 第二章 立題依據與研究內容18-22
• 2.1 立題依據18-20
• 2.2 研究內容20-22
• 第三章 全天麻膠囊及天麻素聯合應用卡馬西平對青霉素所致癲癇模型小鼠的抑制作用22-25
• 1 材料與方法22
• 1.1 材料22
• 2 方法22-23
• 2.1 分組23
• 2.2 給藥23
• 2.3 造模23
• 2.4 癲癇模型發(fā)作等級評判23
• 2.5 統(tǒng)計學處理23
• 3 實驗結果23-24
• 3.1 對癲癇模型的抑制作用結果23-24
• 4 討論24-25
• 第四章 全天麻膠囊及天麻素聯合應用卡馬西平的藥動學25-40
• 1 材料及方法25-26
• 1.1 實驗動物25
• 1.2 實驗藥物25
• 1.3 實驗儀器25-26
• 2 實驗方法26-27
• 2.1 分組26
• 2.2 造模26
• 2.3 給藥方法26
• 2.4 樣品采集26-27
• 3 HPLC法測定大鼠血液及腦組織中天麻素及卡馬西平方法學考察27-30
• 3.1 色譜條件27
• 3.2 大鼠血液前處理27
• 3.3 大鼠腦組織前處理27
• 3.4 對照品溶液的制備27-28
• 3.5 線性關系考察28-29
• 3.6 方法專屬性29
• 3.7 精密度29-30
• 3.8 加樣回收率30
• 3.9 統(tǒng)計學分析軟件30
• 4 結果30-38
• 4.1 HPLC法測定大鼠血液及腦組織中天麻素及卡馬西平方法學考察結果31-38
• 5 討論38-40
• 第五章 免疫組織化學法檢測全天麻膠囊及天麻素聯合應用卡馬西平對于青霉素誘導的癲癇大鼠海馬體P-糖蛋白表達的影響及普通病理學檢查40-52
• 1 實驗材料和試劑40-41
• 1.1 實驗動物40
• 1.2 實驗藥物及試劑40
• 1.3 實驗儀器40-41
• 2 實驗方法41-42
• 2.1 實驗分組41
• 2.2 造模41
• 2.3 給藥方法41
• 2.4 標本采集41-42
• 3 免疫組織化學法檢測全天麻膠囊及天麻素聯合應用卡馬西平對于青霉素誘導的癲癇大鼠海馬體P-糖蛋白表達的影響42-44
• 3.1 石蠟片的制備42-43
• 3.2 海馬體組織免疫組織化學染色43
• 3.3 結果判定43
• 3.4 統(tǒng)計學分析43-44
• 4 病理學檢查44
• 5 結果44-52
• 5.1 大鼠海馬體免疫組織化學法檢查結果44-46
• 5.2 p-gp陽性產物在各組大鼠海馬體內的表達的光密度平均值46-48
• 5.3 病理學檢查結果48-52
• 第六章 蛋白免疫印跡法檢測全天麻膠囊及天麻素聯合應用卡馬西平對于青霉素誘導的癲癇大鼠海馬體P-糖蛋白表達的影響52-59
• 1 實驗材料和方法52-53
• 1.1 實驗動物52
• 1.2 實驗藥品及試劑52-53
• 1.3 相關試液配置53
• 1.4 實驗儀器53
• 2 實驗方法53-56
• 2.1 實驗分組53
• 2.2 造模53
• 2.3 給藥方法53-54
• 2.4 標本采集54
• 2.5 蛋白質的提取54-55
• 2.6 蛋白質聚丙烯酰胺電泳55-56
• 3 結果56-58
• 3.1 各組大鼠海馬體P-gp表達Western blot圖譜56
• 3.2 各組大鼠海馬體P-gp表達量56-58
• 4 討論58-59
• 第七章 全天麻膠囊及天麻素與卡馬西平聯用后對于青霉素誘導的癲癇大鼠海體多藥耐藥基因MDR1和Abcc1表達的影響59-67
• 1 實驗材料和方法59-60
• 1.1 實驗動物59
• 1.2 實驗藥品及試劑59
• 1.3 實驗儀器59-60
• 2 實驗方法60-63
• 2.1 實驗分組：同實驗第六章60
• 2.2 造模：同實驗第六章60
• 2.3 給藥方法：同實驗第六章60
• 2.4 標本采集：同實驗第六章60
• 2.5 組織總RNA提取60
• 2.7 實時定量PCR實驗60-63
• 3 結果63-67
• 3.1 熒光實時定量PCR檢測MDR1基因表達結果63-65
• 3.2 熒光實時定量PCR檢測Abcc1基因表達結果65-67
• 4 討論67
• 參考文獻67-71
• 研究結論71-72
• 在學期間的研究成果72-73
• 致謝73

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

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  本文關鍵詞：全天麻膠囊及天麻素聯合卡馬西平抗癲癇機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：387047