本文關鍵詞：紅蕓豆植物凝集素（RKBL）終止小鼠中期妊娠作用機理的初步研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：凝集素是一種無免疫原性的蛋白質,廣泛存在于動物、植物和微生物中。植物凝集素不僅具有凝集細胞的作用,并且參與體內一些重要的生理過程,已經廣泛應用于農業(yè)、畜牧業(yè)及醫(yī)藥等行業(yè)。凝集素受體是存在于細胞膜表面的糖蛋白或糖脂,可以與相應的凝集素發(fā)生特異性的結合。許多實驗證據表明,凝集素受體在受精、妊娠等生殖過程中有具有重要的影響和作用。蕓豆植物凝集素(kidney bean lectin,KBL)是從蕓豆中提取的糖蛋白,其特異性結合糖為β-半乳糖、α-甘露糖和α-乙酰葡萄糖胺。本實驗室以往的研究發(fā)現KBL具有抑制受精、終止不同時期妊娠的作用,但對其機理還缺乏較為系統(tǒng)和全面的研究。因此,本研究從整體、組織、細胞及分子水平進行了一些相關的研究。目的:探究KBL在終止小鼠妊娠過程中對相關性激素、胎盤和子宮的影響,為研究KBL終止妊娠的機制提供實驗依據。同時,考慮將來的臨床應用,也研究了不同性別的小鼠對KBL的耐受性。以期為生殖醫(yī)學和研究新型避孕藥提供基礎實驗依據。方法:1、通過非手術法子宮給藥的方式觀察紅蕓豆植物凝集素(Red kidney bean lectin,RKBL)在終止昆明小鼠妊娠過程中對生殖內分泌激素的影響。2、對RKBL處理的小鼠胎盤進行形態(tài)學觀察、臺盼藍染色、甲基綠-派諾寧染色、DNA電泳、TUNEL檢測,8-異前列腺素F2α的測定,了解RKBL在終止小鼠妊娠過程中對胎盤的影響。3、通過測定并比較培養(yǎng)乳酸菌和盤基網柄菌前后的培養(yǎng)基中RKBL的凝集活性和分子的完整性。4、選用經口(限量試驗)和經腹腔(LD50測定)兩種方式對RKBL進行了急性毒性試驗。結果:1、在性激素變化方面,應用RKBL終止妊娠過程中孕鼠血清中E2、FSH、LH和T無明顯變化;P和PRL在注射RKBL后呈先升高后降低的趨勢,并且在對照組與實驗組間差異顯著;胎盤勻漿的8-iso-PGF2α水平無明顯變化,而子宮勻漿8-iso-PGF2α水平在給藥后明顯下降。2、在組織水平,RKBL可導致妊娠小鼠胎盤出現充血和壞死的現象,胎盤邊緣有明顯臺盼藍染色;3、在細胞和分子水平,甲基綠-派諾寧染色與TUNEL檢測、DNA電泳條帶顯示胎盤出現壞死和凋亡現象;4、在作用方式上,RKBL在促進乳酸菌和盤基網柄菌增殖的同時其凝集活性和含量不會降低。5、不同性別的急性毒性試驗結果表明,腹腔單次注射RKBL,雌鼠LD50為743.242 mg/kg,其95%可信區(qū)間為658.053~848.953 mg/kg;雄鼠LD50為535.452 mg/kg,其95%可信區(qū)間為480.961~598.818 mg/kg;限量試驗結果大于5000 mg/kg。結論:1、使用RKBL終止小鼠中期妊娠時不改變孕鼠體內的E2、FSH、LH、T和8-異前列腺素F2α水平,而對P和PRL有較大影響,提示RKBL終止小鼠妊娠不是通過影響整體神經內分泌軸(下丘腦-垂體-靶腺軸)的下丘腦及垂體水平而實現。2、注射RKBL后引起小鼠胎盤壞死、凋亡或副凋亡,提示RKBL終止妊娠主要是通過引起胎盤壞死、凋亡或副凋亡途徑實現的。3、RKBL能夠在細胞外促進乳酸菌和盤基網柄菌增殖,且這種增殖作用主要是通過細胞外信號傳遞方式,RKBL本身不會作為能源物質被利用或降解。4、RKBL的屬于低毒,對不同性別的昆明小鼠具有量效作用差異。單次腹腔注射RKBL,雌鼠的耐受性高于雄鼠。
【關鍵詞】：紅蕓豆植物凝集素 小鼠 終止妊娠 機理 性別 毒性
【學位授予單位】：云南師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R965
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-8
• 縮略詞表8-13
• 第1章 引言13-30
• 1.1 研究的目的與意義13
• 1.2 問題的提出13
• 1.3 選題背景13-14
• 1.4 文獻綜述14-28
• 1.4.1 植物凝集素概述14-21
• 1.4.1.1 植物凝集素的發(fā)現與定義14
• 1.4.1.2 植物凝集素的結構14-16
• 1.4.1.3 植物凝集素的分類16-19
• 1.4.1.4 植物凝集素的特性19-21
• 1.4.2 植物凝集素的毒性21-22
• 1.4.3 植物凝集素的應用22-27
• 1.4.3.1 植物凝集素與植物體22-23
• 1.4.3.2 植物凝集素在生物學研究中的作用23
• 1.4.3.3 植物凝集素在醫(yī)學研究中的作用23-25
• 1.4.3.4 植物凝集素與生殖25-26
• 1.4.3.5 植物凝集素的抗HIV特性26-27
• 1.4.4 植物凝集素的作用機理27-28
• 1.5 論文結構安排28-30
• 第2章 紅蕓豆植物凝集素終止小鼠中期妊娠中的相關生殖激素變化研究30-39
• 2.1 材料與方法30-31
• 2.1.1 試劑30-31
• 2.1.2 實驗動物31
• 2.1.3 實驗儀器31
• 2.2 實驗方法31-32
• 2.2.1 孕鼠的建立31
• 2.2.2 分組及給藥方法31
• 2.2.3 取材31-32
• 2.2.4 檢測與分析32
• 2.2.5 統(tǒng)計學方法32
• 2.3 結果32-36
• 2.3.1 兩組妊娠結局比較32
• 2.3.2 激素水平比較32-36
• 2.4 討論36-39
• 第3章 RKBL終止小鼠中期妊娠的部分細胞及分子機理研究39-50
• 3.1 實驗材料39-40
• 3.1.1 試劑39-40
• 3.1.2 實驗動物40
• 3.1.3 實驗儀器40
• 3.2 實驗方法40-41
• 3.2.1 孕鼠的建立40
• 3.2.2 給藥40
• 3.2.3 取材40
• 3.2.4 檢測與分析40-41
• 3.2.4.1 子宮及胎盤臺盼藍染色41
• 3.2.4.2 孕鼠子宮及胎盤核酸電泳41
• 3.2.4.3 孕鼠子宮及胎盤甲基綠-派諾寧染色41
• 3.2.4.4 胎盤的TUNEL檢測41
• 3.2.4.5 子宮、胎盤及血清 8-異前列腺素F2_α測定41
• 3.3 結果41-48
• 3.3.1 妊娠結局41-42
• 3.3.2 染色結果42-44
• 3.3.3 TUNEL檢測結果44-45
• 3.3.4 電泳結果45-46
• 3.3.5 8-異前列腺素檢測結果46-48
• 3.4 討論48-50
• 第4章 RKBL作用方式的研究——以乳酸菌和盤基網柄菌為模式生物50-65
• 4.1 RKBL對乳酸菌作用機理的初步研究50-56
• 4.1.1 材料與方法50-53
• 4.1.1.1 材料50-51
• 4.1.1.2 試劑與儀器51
• 4.1.1.3 培養(yǎng)基的配制51-52
• 4.1.1.4 乳酸菌的活化傳代及接種擴培52
• 4.1.1.5 方法52-53
• 4.1.2 結果53-56
• 4.2 RKBL對盤基網柄菌作用機理初步研究56-62
• 4.2.1 材料與方法56-59
• 4.2.1.1 材料56-57
• 4.2.1.2 培養(yǎng)基的配制57-58
• 4.2.1.3 實驗方法58-59
• 4.2.2 結果59-62
• 4.3 討論62-63
• 4.4 結論63-65
• 第5章 紅蕓豆凝集素急性毒性研究65-72
• 5.1 實驗材料65
• 5.1.1 藥品65
• 5.1.2 實驗動物65
• 5.2 實驗方法65-66
• 5.2.1 分組65-66
• 5.2.1.1 LD_(50)測定65-66
• 5.2.1.2 限量試驗66
• 5.2.2 給藥66
• 5.2.2.1 LD_(50)測定66
• 5.2.2.2 限量試驗66
• 5.2.3 觀察與統(tǒng)計66
• 5.3 實驗結果66-70
• 5.3.1 LD_(50)測定結果66-70
• 5.3.2 限量試驗結果70
• 5.4 討論70-72
• 第6章 結論72-74
• 6.1 RKBL終止小鼠中期妊娠中的相關生殖激素變化72
• 6.2 RKBL終止小鼠中期妊娠的部分細胞及分子機理72
• 6.3 RKBL作用方式的研究——以乳酸菌和盤基網柄菌為模式生物72-73
• 6.4 RKBL的急性毒性試驗73-74
• 參考文獻74-83
• 攻讀學位期間發(fā)表的學術論文和研究成果83-84
• 致謝84

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前3條

1 張麗芬;王昌梅;楊明潔;張?zhí)?王敏康;;蕓豆植物凝集素對小鼠體外受精的影響[J];中國計劃生育學雜志;2011年02期

2 崔貞福,吳孟超,虞紫茜,張世民,殷正豐;內源性凝集素介導的MTX-擬糖蛋白對肝癌細胞的靶向殺傷作用[J];中國腫瘤生物治療雜志;1997年03期

3 劉慧慧,李太武,蘇秀榕;植物凝集素及其在生殖細胞表面糖復合物檢測中的應用[J];自然雜志;2003年06期

  本文關鍵詞：紅蕓豆植物凝集素（RKBL）終止小鼠中期妊娠作用機理的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：386831