本文關(guān)鍵詞：三氧化二砷納米粒對(duì)人乳腺癌MGF-7細(xì)胞的體外抗腫瘤作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]乳腺癌是危害女性生命健康的常見惡性腫瘤,嚴(yán)重影響了女性的生活質(zhì)量和健康。三氧化二砷作為化學(xué)輔助治療乳腺癌的重要藥物,近年來受到越來越多學(xué)者的關(guān)注與研究。納米給藥系統(tǒng)因其具有緩釋、靶向、降低腫瘤多藥耐藥性的產(chǎn)生等多種優(yōu)點(diǎn),被作為一種新型的載藥系統(tǒng)應(yīng)用到抗腫瘤藥物的研究中。本實(shí)驗(yàn)選擇三氧化二砷納米粒為模型藥物,主要考察其對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用、對(duì)細(xì)胞周期的影響、對(duì)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用的影響以及MCF-7細(xì)胞對(duì)三氧化二砷納米粒攝取情況的分析,探究以納米粒為載體的三氧化二砷藥物在體外對(duì)乳腺癌MCF-7細(xì)胞的抗腫瘤作用效果。為此藥物將來進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究和臨床應(yīng)用提供初步依據(jù)。[方法]采用MTT法測定不同濃度游離三氧化二砷藥物、空白納米粒、三氧化二砷納米粒對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的細(xì)胞毒作用；采用PI單染流式細(xì)胞術(shù)檢測三氧化二砷納米粒各細(xì)胞周期細(xì)胞比例；采用Annexin V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測三氧化二砷納米粒誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用；運(yùn)用熒光顯微鏡對(duì)MCF-7細(xì)胞攝取三氧化二砷納米粒定性分析,運(yùn)用流式細(xì)胞儀對(duì)影響攝取結(jié)果的因素進(jìn)行定量分析。[結(jié)果]作用24h后,游離藥物對(duì)細(xì)胞生長的抑制率大于相同濃度下的三氧化二砷納米粒藥物,作用48h后,游離藥物對(duì)細(xì)胞生長的抑制率小于相同濃度下三氧化二砷納米粒藥物；當(dāng)給藥濃度分別為1μg/mL、3μg/mL時(shí),三氧化二砷納米粒作用24h后,G0/G1期細(xì)胞所占比例隨著濃度增加而增加,S期細(xì)胞所占比例隨著濃度增加而下降；三氧化二砷納米粒作用48h后,G0/G1期細(xì)胞所占比例隨濃度增加而增加更明顯,S期細(xì)胞所占比例隨濃度增加而降低更明顯；當(dāng)給藥濃度分別為1μg/mL、3μg/mL時(shí)，三氧化二砷納米粒作用24h后,隨著濃度的增高,對(duì)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡率逐漸升高；作用48h后,誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡率也隨濃度增高而升高,并且均高于相同濃度下作用24h后的凋亡率；熒光顯微鏡顯示MCF-7細(xì)胞對(duì)三氧化二砷納米粒發(fā)生了攝取,且流式細(xì)胞儀定量顯示：隨著用藥劑量的增加細(xì)胞對(duì)藥物的攝取率增加,隨著溫度的升高,細(xì)胞對(duì)藥物的攝取率增加,隨著作用時(shí)間的增加,細(xì)胞對(duì)藥物的攝取率增加。[結(jié)論]納米粒作為載體顯示無細(xì)胞毒性,對(duì)細(xì)胞生長不產(chǎn)生抑制作用；三氧化二砷納米粒具有緩釋作用,其細(xì)胞毒性與藥物劑量、用藥時(shí)間呈正相關(guān)；三氧化二砷納米粒通過誘導(dǎo)細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期,發(fā)揮了抑制細(xì)胞增殖的作用；三氧化二砷納米粒在誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡方面,細(xì)胞凋亡率表現(xiàn)出了與用藥劑量、用藥時(shí)間正相關(guān)的關(guān)系；人乳腺癌MCF-7細(xì)胞對(duì)三氧化二砷納米粒的攝取率也表現(xiàn)出了與用藥劑量、溫度、用藥時(shí)間呈正相關(guān)的趨勢,還能說明MCF-7對(duì)藥物具有主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)的過程,此過程需要消耗能量。
【關(guān)鍵詞】：三氧化二砷納米粒 細(xì)胞毒 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞攝取
【學(xué)位授予單位】：黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R96
【目錄】：

• 縮略語表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 引言10-11
• 文獻(xiàn)綜述11-21
• 第一章 三氧化二砷納米粒的細(xì)胞毒性研究21-32
• 1 實(shí)驗(yàn)儀器與材料21
• 1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑21
• 1.2 實(shí)驗(yàn)用藥21
• 1.3 細(xì)胞株21
• 2 實(shí)驗(yàn)方法21-25
• 2.1 實(shí)驗(yàn)溶液的配制21-22
• 2.2 細(xì)胞培養(yǎng)22-23
• 2.3 細(xì)胞生長曲線測定23-24
• 2.4 細(xì)胞毒性試驗(yàn)24
• 2.5 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察24-25
• 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法25
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-31
• 3.1 細(xì)胞生長曲線的繪制25-26
• 3.2 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-30
• 3.3 As_2O_3-EGF-NP對(duì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響30-31
• 4 小結(jié)與討論31-32
• 第二章 三氧化二砷納米粒對(duì)細(xì)胞周期的影響32-37
• 1 材料與細(xì)胞32
• 1.1 儀器和試劑32
• 2 實(shí)驗(yàn)方法32-33
• 2.1 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備32-33
• 2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法33
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-36
• 3.1 三氧化二砷納米粒作用24h后結(jié)果33-35
• 3.2 三氧化二砷納米粒作用48h后結(jié)果35-36
• 4 小結(jié)與討論36-37
• 第三章 三氧化二砷納米粒誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的研究37-43
• 1 實(shí)驗(yàn)原理37
• 2 材料與細(xì)胞37-38
• 2.1 儀器和試劑37-38
• 2.2 細(xì)胞38
• 3 實(shí)驗(yàn)方法38-39
• 3.1 細(xì)胞樣品制備38
• 3.2 凋亡試劑處理細(xì)胞樣品38
• 3.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法38-39
• 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果39-41
• 4.1 不同濃度的三氧化二砷納米粒作用24小時(shí)結(jié)果39-40
• 4.2 不同濃度的三氧化二砷納米粒作用48小時(shí)結(jié)果40
• 4.3 細(xì)胞凋亡率與時(shí)間、As_2O_3-EGF-NP濃度的關(guān)系40-41
• 5 小結(jié)與討論41-43
• 第四章 三氧化二砷納米粒的細(xì)胞攝取研究43-50
• 1 材料與細(xì)胞43
• 1.1 儀器與試劑43
• 1.2 細(xì)胞43
• 2 實(shí)驗(yàn)方法43-44
• 2.1 FITC標(biāo)記的As_2O_3-EGF-NP的制備43-44
• 2.2 熒光顯微鏡檢測細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)44
• 2.3 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)44
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果44-49
• 3.1 熒光顯微鏡檢測細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)結(jié)果44-45
• 3.2 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞攝取實(shí)驗(yàn)結(jié)果45-49
• 4 小結(jié)與討論49-50
• 結(jié)論50-51
• 參考文獻(xiàn)51-56
• 致謝56-57
• 發(fā)表論文情況57-60
• 個(gè)人簡歷60

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：383729