本文關(guān)鍵詞：哈爾滿的體內(nèi)外代謝與藥代動(dòng)力學(xué)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:駱駝蓬總生物堿中的哈爾滿堿是治療阿爾茨海默癥(Alzheimer’s disease,AD)的潛在藥物,因此在前期研究的基礎(chǔ)上進(jìn)行哈爾滿生物堿在大鼠的體內(nèi)外代謝與藥代動(dòng)力學(xué)研究。方法:1)采用差速離心法制備大鼠肝微粒體,并對(duì)所制備的大鼠肝微粒體進(jìn)行蛋白含量測(cè)定。2)采用UPLC-ESI-MS/MS法同時(shí)測(cè)定9種探針代謝產(chǎn)物的濃度,對(duì)大鼠肝微粒體中9種細(xì)胞色素P450酶的活性進(jìn)行標(biāo)定,并對(duì)大鼠肝微粒體中9種細(xì)胞色素P450亞型酶的代謝動(dòng)力學(xué)進(jìn)行了研究。3)采用UPLC-ESI-MS/MS法,對(duì)大鼠肝微粒體中II相葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶的活性進(jìn)行標(biāo)定。4)采用超高效液相串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜儀,對(duì)哈爾滿生物堿在大鼠肝微粒體及肝S9中的I、II相代謝產(chǎn)物進(jìn)行鑒定與研究。5)采用超高效液相串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜儀,對(duì)哈爾滿生物堿在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物進(jìn)行鑒定與研究。6)采用UPLC-ESI-MS/MS法,對(duì)哈爾滿生物堿及其代謝產(chǎn)物在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究。結(jié)果:1)采用差速離心法,經(jīng)過勻漿、兩次離心及洗滌,成功制備得到了大鼠肝微粒體。經(jīng)計(jì)算,所得的大鼠肝微粒體的得率為32mg microsome protein/g liver。2)在優(yōu)化的色譜及質(zhì)譜條件下,對(duì)9種細(xì)胞色素P450酶催化產(chǎn)生的探針代謝產(chǎn)物進(jìn)行了分析與測(cè)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明大鼠肝微粒體內(nèi)沒有CYP2A6亞型酶的活性。此外,在對(duì)大鼠肝微粒體中9種細(xì)胞色素P450亞型酶的代謝動(dòng)力學(xué)的研究中,采用GraphPad(Prism 5)進(jìn)行數(shù)據(jù)擬合后,計(jì)算得到各亞型酶催化探針反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)參數(shù)Km和Vmax值及其酶促動(dòng)力學(xué)曲線。根據(jù)Eadie-Hofstee作圖,可以得出,CYP3A4催化的睪酮羥基化符合希爾方程描述的動(dòng)力學(xué)特征,而其他7種亞型酶催化的反應(yīng)均符合米氏方程所描述的典型的酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)特征。3)在優(yōu)化的色譜及質(zhì)譜條件下,我們對(duì)大鼠肝微粒體內(nèi)II相代謝酶UGT2B7催化產(chǎn)生的探針代謝產(chǎn)物進(jìn)行了分析與測(cè)定,結(jié)果表明本實(shí)驗(yàn)室所制備的大鼠肝微粒體具有UGT2B7亞型酶的活性。4)采用超高效液相串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜儀,對(duì)哈爾滿生物堿在大鼠肝微粒體及肝S9中的I、II相代謝產(chǎn)物進(jìn)行鑒定與研究,研究結(jié)果顯示,一共鑒定了9個(gè)體外代謝產(chǎn)物,其中包括4個(gè)I相代謝產(chǎn)物,5個(gè)II相代謝產(chǎn)物(3個(gè)葡萄糖醛酸化物和2個(gè)硫酸化物)。5)采用超高效液相串聯(lián)飛行時(shí)間質(zhì)譜儀,對(duì)哈爾滿生物堿在大鼠體內(nèi)的I、II相代謝產(chǎn)物進(jìn)行鑒定與研究,研究結(jié)果顯示,一共鑒定了20個(gè)體內(nèi)代謝產(chǎn)物,其中尿液中11個(gè)代謝產(chǎn)物,糞便中16個(gè)代謝產(chǎn)物,膽汁中16個(gè)代謝產(chǎn)物以及血漿中10個(gè)代謝產(chǎn)物;此外,結(jié)果還顯示膽汁和糞便清除是主要的排泄途徑。6)哈爾滿生物堿及其代謝產(chǎn)物在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究結(jié)果表明,在靜脈(1.0mg/kg)和口服(30.0mg/kg)給予哈爾滿生物堿后,哈爾滿及其10個(gè)代謝產(chǎn)物同時(shí)被檢測(cè)。本研究中,通過半定量方法計(jì)算代謝產(chǎn)物的濃度,成功計(jì)算得到哈爾滿及其10個(gè)代謝產(chǎn)物的藥時(shí)曲線及藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。此外,計(jì)算所得哈爾滿的絕對(duì)生物利用度為19.41%。研究還結(jié)果表明,硫酸化是哈爾滿生物堿在大鼠體內(nèi)的主要代謝途徑。結(jié)論:通過數(shù)據(jù)整合與代謝輪廓分析,推測(cè)得到了哈爾滿生物堿在大鼠的體內(nèi)外過程與代謝途徑,體內(nèi)外一共鑒定了21個(gè)哈爾滿堿的代謝產(chǎn)物(I相和II相),并了解了哈爾滿生物堿及其10個(gè)代謝產(chǎn)物在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)過程。
【關(guān)鍵詞】：哈爾滿 大鼠肝微粒體 代謝 藥代動(dòng)力學(xué)
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R96
【目錄】：

• 中英文縮略詞對(duì)照表5-8
• 摘要8-10
• ABSTRACT10-12
• 前言12-15
• 研究?jī)?nèi)容15-87
• 1 大鼠肝微粒體的制備及蛋白含量的測(cè)定15-18
• 1.1 儀器與試藥15-16
• 1.2 方法與結(jié)果16-17
• 1.3 討論17-18
• 2 大鼠肝微粒體中細(xì)胞色素P450酶的反應(yīng)表征及活性標(biāo)定18-28
• 2.1 儀器與試藥19
• 2.2 方法與結(jié)果19-23
• 2.3 討論23-28
• 3 大鼠肝微粒體中葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶的反應(yīng)表征及活性標(biāo)定28-31
• 3.1 儀器與試藥28-29
• 3.2 方法與結(jié)果29-30
• 3.3 討論30-31
• 4 大鼠肝微粒體及肝S9中哈爾滿生物堿代謝產(chǎn)物的鑒定31-48
• 4.1 儀器與試藥31-32
• 4.2 方法與結(jié)果32-47
• 4.3 討論47-48
• 5 哈爾滿生物堿在大鼠體內(nèi)代謝產(chǎn)物的鑒定48-65
• 5.1 儀器與試藥48-49
• 5.2 方法與結(jié)果49-64
• 5.3 討論64-65
• 6 哈爾滿生物堿在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究65-87
• 6.1 儀器與試藥65-66
• 6.2 方法與結(jié)果66-81
• 6.3 討論81-87
• 小結(jié)87-88
• 致謝88-89
• 參考文獻(xiàn)89-96
• 綜述96-132
• 參考文獻(xiàn)114-132
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文132-133
• 導(dǎo)師評(píng)閱表133

【共引文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 李靜;;認(rèn)知功能障礙老年人血清性激素水平檢測(cè)[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2007年05期

2 李婷婷;;何首烏對(duì)增強(qiáng)青少年記憶、抗疲勞作用進(jìn)行研究的文獻(xiàn)再評(píng)價(jià)[J];中外醫(yī)療;2011年14期

3 羅紅波;楊金升;石向群;李蕓;楊期東;張志強(qiáng);尹榕;;Aβ誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激性凋亡通路的啟動(dòng)及二苯乙烯苷的影響[J];東南大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2011年06期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

1 牟淑慧;大黃素-8-O-β-D-葡萄糖苷制備方法的探索[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2007年

2 胡亞萍;加味溫膽湯含藥腦脊液對(duì)Aβ_（25～35）誘導(dǎo)的NG108-15細(xì)胞損傷保護(hù)作用機(jī)理的研究[D];湖北中醫(yī)學(xué)院;2007年

3 李春偉;中藥復(fù)方治療老年癡呆的臨床文獻(xiàn)研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2010年

4 王晶;補(bǔ)元聰腦湯對(duì)老年性癡呆大鼠行為學(xué)及膽堿能系統(tǒng)的干預(yù)作用[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2010年

5 陳俊;腦肽對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶的改善作用及機(jī)制初探[D];沈陽(yáng)藥科大學(xué);2008年

  本文關(guān)鍵詞：哈爾滿的體內(nèi)外代謝與藥代動(dòng)力學(xué)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：364915