本文關鍵詞：共載阿霉素和MiR-34a的硬脂酰多肽膠束構建及其抗前列腺癌作用研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：前列腺癌是目前歐美國家中發(fā)病率最高的生殖系統(tǒng)惡性腫瘤。近年來隨著我國人民生活水平的提高,前列腺癌在我國的發(fā)病率也越來越高。前列腺癌初期是激素依賴型的,此時一般采用內(nèi)分泌療法。隨著治療的進行,激素依賴型的前列腺癌逐漸轉變?yōu)榧に胤且蕾囆颓傲邢侔τ诩に胤且蕾囆颓傲邢侔?目前還沒有十分有效的治療方法。化療藥物和基因藥物聯(lián)用是當前腫瘤治療的熱門方向,本課題選用廣譜抗癌藥阿霉素和基因藥物miR-34a,通過硬脂酰多肽膠束介導,研究其抗激素非依賴型前列腺癌體內(nèi)外作用。本課題的第一部分報道了共載阿霉素和miR-34a的硬脂酰多肽膠束構建及表征。通過固相合成法合成了含有聚精氨酸、組氨酸和硬脂酸的多肽單體,通過制備液相進行純化以及高效液相和質(zhì)譜檢測純度符合實驗要求。利用半胱氨酸在低濃度的雙氧水環(huán)境中引發(fā)多肽單體發(fā)生氧化反應,通過二硫鍵形成多肽聚合物。核磁氫譜以及GPC檢測合成成功。接著通過多肽聚合物的自組裝形成多肽膠束,利用其疏水性空腔和富含陽離子親水端聚精氨酸分別包載化療藥物阿霉素和基因藥物miR-34a。表征后發(fā)現(xiàn)膠束粒徑約為160 nm,電位約為20 mV,載藥量約為22.81%。本課題第二部分報道了共載阿霉素和miR-34a的硬脂酰多肽膠束抗激素非依賴型前列腺癌體外評價。激素非依賴型前列腺癌細胞DU145可以對膠束高效攝取,載藥膠束進入細胞后,阿霉素釋放進入胞核,基因藥物miR-34a分布在胞質(zhì)。體外細胞實驗表明,硬脂酰多肽膠束可以有效介導miR-34a在DU145細胞內(nèi)表達并抑制沉默信息調(diào)節(jié)因子1,最終阿霉素和miR-34a協(xié)同抗激素非依賴型前列腺癌細胞增殖并促進細胞凋亡。本課題第三部分報道了通過體內(nèi)實驗來驗證共載阿霉素和miR-34a的硬脂酰多肽膠束抗激素非依賴型前列腺癌作用。實驗成功構建了DU145前列腺癌裸鼠移植瘤模型,通過熒光標記多肽膠束發(fā)現(xiàn)其在體內(nèi)可躲避網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬,在腫瘤部位實現(xiàn)靶向聚集。腫瘤生長抑制實驗和腫瘤組織的HE染色切片觀察顯示,阿霉素和miR-34a在硬脂酰多肽膠束介導下,可以協(xié)同抑制移植瘤的生長。安全性結果顯示,該多肽膠束沒有全身毒副作用,可以降低阿霉素對心臟的損害。通過本課題研究,以硬脂酰多肽膠束為載體,共載化療藥物和基因藥物。為臨床治療激素非依賴型前列腺癌和其他腫瘤提供了參考和有益借鑒。
【關鍵詞】：硬脂酰多肽膠束 阿霉素 miR-34a 共載 前列腺癌
【學位授予單位】：第二軍醫(yī)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R943;R96
【目錄】：

• 摘要7-8
• Abstract8-10
• 縮略詞表10-11
• 前言11-13
• 第一章 共載阿霉素和MiR-34a的硬脂酰多肽膠束構建及表征13-27
• 1 儀器和材料14-15
• 1.1 儀器14
• 1.2 試劑和材料14-15
• 2 實驗方法15-19
• 2.1 硬脂酰修飾多肽的合成15-16
• 2.2 硬脂酰修飾多肽的表征16-17
• 2.3 共載阿霉素和miR-34a硬脂酰多肽膠束構建17
• 2.4 共載阿霉素和miR-34a硬脂酰多肽膠束表征17-19
• 3 結果19-25
• 3.1 HHHCRRRRRC 和 Stearyl-HHHCRRRRRC 的純度鑒定結果3.1.1 HHHCRRRRRC 的 HPLC 和 MS 圖譜19-21
• 3.2 多肽聚合物C-SHR的~1H-NMR 鑒定結果21-22
• 3.3 共載阿霉素和miR-34a硬脂酰多肽膠束粒徑電位22-23
• 3.4 載藥量和包封率23-24
• 3.5 瓊脂糖凝膠電泳實驗結果24-25
• 3.6 阿霉素體外釋放25
• 4 討論25-26
• 5 小結26-27
• 第二章 共載阿霉素和MiR-34a的硬脂酰多肽膠束抗前列腺癌作用體外評價27-41
• 1 儀器和材料27-28
• 1.1 儀器27-28
• 1.2 試劑和材料28
• 1.3 細胞株28
• 2 實驗方法28-32
• 2.1 細胞培養(yǎng)28
• 2.2 細胞攝取考察28-29
• 2.3 細胞內(nèi)分布考察29
• 2.4 抗激素非依賴型前列腺癌增殖作用考察29
• 2.5 促激素非依賴型前列腺癌凋亡作用考察29-30
• 2.6 激素非依賴型前列腺癌實時定量PCR實驗30-31
• 2.7 蛋白抑制作用考察31-32
• 2.8 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計方法32
• 3 結果32-39
• 3.1 激素非依賴型前列腺癌細胞攝取考察結果32-33
• 3.2 激素非依賴型前列腺癌細胞內(nèi)分布考察結果33-34
• 3.3 抗激素非依賴型前列腺癌增殖作用結果34-36
• 3.4 促激素非依賴型前列腺癌凋亡作用結果36-37
• 3.5 多肽膠束介導miR-34a表達結果37-38
• 3.6 蛋白抑制作用結果38-39
• 4 討論39-40
• 5 小結40-41
• 第三章 共載阿霉素和MiR-34a的硬脂酰多肽膠束抗前列腺癌作用體內(nèi)評價41-55
• 1 儀器和材料41-42
• 1.1 儀器41
• 1.2 試劑和材料41-42
• 1.3 細胞株42
• 1.4 實驗動物42
• 2 實驗方法42-45
• 2.1 細胞培養(yǎng)42
• 2.2 人前列腺癌細胞裸鼠移植瘤模型的構建42
• 2.3 共載阿霉素和miR-34a硬脂酰多肽膠束體內(nèi)分布考察42-43
• 2.4 共載阿霉素和miR-34a硬脂酰多肽膠束體內(nèi)藥效考察43-44
• 2.5 共載阿霉素和miR-34a硬脂酰多肽膠束安全性評價44
• 2.6 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計方法44-45
• 3 結果45-52
• 3.1 動物造模實驗結果45-46
• 3.2 體內(nèi)分布考察結果46-48
• 3.3 腫瘤生長抑制及腫瘤重量考察結果48-49
• 3.4 腫瘤內(nèi)SIRT1表達情況考察結果49-50
• 3.5 安全性考察結果50-52
• 3.6 裸鼠移植瘤組織切片觀察結果52
• 4 討論52-54
• 5 小結54-55
• 全文總結55-56
• 參考文獻56-62
• 特色與創(chuàng)新之處62-63
• 綜述63-71
• 參考文獻68-71
• 科研工作簡介71-73
• 致謝73

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 符友偉;吳蕾;;多肽固相合成法中的3個關鍵點[J];化學工業(yè)與工程;2010年04期

2 王良友,潘和平,陳正英;多肽合成中幾種形成二硫鍵方法的介紹[J];有機化學;1998年06期

  本文關鍵詞：共載阿霉素和MiR-34a的硬脂酰多肽膠束構建及其抗前列腺癌作用研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：343848