本文關鍵詞：染料木素對Aβ誘導的神經(jīng)細胞線粒體功能異常的保護作用及機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：染料木素（Genistein，Gen）是大豆異黃酮苷元的主要成份之一，，廣泛存在于豆科植物中。染料木素被稱為植物雌激素，在人體內(nèi)可與雌激素受體結(jié)合發(fā)揮弱雌激素樣作用和抗雌激素活性。研究表明，染料木素不僅對心血管疾病、骨質(zhì)疏松、腫瘤等均具有防治作用，而且對AD等神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病具有一定的預防和治療作用，現(xiàn)廣泛應用于制藥、營養(yǎng)保健品等領域。本課題組前期研究表明，染料木素可作用于海馬神經(jīng)細胞，通過蛋白激酶C(Protein kinase C， PKC)快速信號轉(zhuǎn)導通路進而調(diào)節(jié)α、β-分泌酶活性，抑制Aβ形成與沉積，降低細胞內(nèi)Ca2+濃度，提高Bcl-2/Bax的比值，從而抑制Aβ神經(jīng)毒性，發(fā)揮神經(jīng)保護作用。目前，有關染料木素的神經(jīng)保護作用研究比較深入，但更為深入的機制研究如有關線粒體介導的神經(jīng)細胞凋亡信號轉(zhuǎn)導通路報道較少。本論文將繼續(xù)在細胞水平就染料木素的細胞保護作用及其分子機制作進一步的研究。具體內(nèi)容如下： 1.染料木素對Aβ誘導的PC12細胞線粒體形態(tài)及活力的影響研究：以Aβ25-35毒素誘導PC12細胞損傷，構(gòu)建細胞損傷模型，用不同濃度的Gen預處理2h后，再加入Aβ25-35繼續(xù)孵育24h， MTT法檢測PC12細胞存活率；MitoTracker Green FM線粒體熒光探針檢測線粒體形態(tài)變化；2，6-二氯苯酚靛酚鈉（2，6-DPIP）還原法測定琥珀酸脫氫酶（SDH）活力；分光光度法測定Na+-K+-ATP酶活力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)Gen能改善Aβ25-35誘導的PC12細胞線粒體形態(tài)，提高線粒體琥珀酸脫氫酶活力及Na+-K+-ATP酶活力。 2.染料木素對Aβ誘導的PC12細胞自由基清除及氧化應激的影響研究：DCFH-DA熒光探針檢測活性氧（ROS）生成；硫代巴比妥酸（TBA）法測定丙二醛（MDA）含量；黃嘌呤氧化法測定超氧化物歧化酶（SOD）活力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)Gen能減少Aβ25-35誘導的PC12細胞活性氧生成量，降低MDA含量，提高SOD活性的功能。 3.染料木素對Aβ誘導的PC12細胞線粒體膜電位及膜通透性的影響研究：羅丹明123熒光染料檢測線粒體跨膜電位（△ψm）；ELISA雙抗體夾心法測定胞內(nèi)細胞色素C濃度；分光光度法檢測Caspase-3活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)Gen能穩(wěn)定Aβ25-35誘導的PC12細胞線粒體跨膜電位，減少細胞色素C的釋放，抑制Caspase-3活性。 研究結(jié)果表明，染料木素通過改善PC12細胞線粒體形態(tài)、穩(wěn)定線粒體膜電位及膜通透性、提高細胞活力以及自由基清除和氧化應激能力，從而抑制Aβ誘導的PC12細胞損傷和線粒體功能異常。
【關鍵詞】：染料木素 阿爾茨海默病 β淀粉樣蛋白 線粒體
【學位授予單位】：廣東藥學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R96
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-19
• 一、 β淀粉樣蛋白神經(jīng)毒性與線粒體功能異常研究10-15
• 1. Aβ的形成與其神經(jīng)毒性10-11
• 2. Aβ神經(jīng)毒性與線粒體功能異常11-15
• 二、 染料木素研究概況15-17
• 1. 神經(jīng)保護及治療神經(jīng)退行性疾病15
• 2. 抗腫瘤作用15-16
• 3. 抗氧化作用16
• 4. 降血脂16
• 5. 防治骨質(zhì)疏松癥16-17
• 6. 預防心血管疾病17
• 三、 本研究的目的與意義17-19
• 第一章 染料木素對 PC12 細胞線粒體形態(tài)及活力的影響研究19-33
• 第一節(jié) 不同濃度 Gen 對 Aβ誘導損傷的 PC12 細胞活力的影響19-24
• 1 實驗材料和儀器19-21
• 2 PC12 細胞培養(yǎng)21
• 3. 細胞活性測定21-22
• 4. 統(tǒng)計分析22
• 5. 實驗結(jié)果22-23
• 6. 討論23-24
• 第二節(jié) 染料木素對 PC12 細胞線粒體形態(tài)及活力的影響24-31
• 1 實驗材料和儀器24-26
• 2. 實驗分組26
• 3． PC12 細胞線粒體形態(tài)的觀察26
• 4. PC12 細胞線粒體的提取分離26
• 5. PC12 細胞線粒體琥珀酸脫氫酶的測定26-27
• 6. PC12 細胞線粒體 Na+-K+-ATP 酶測定27
• 7. 統(tǒng)計分析27
• 8. 實驗結(jié)果27-30
• 9. 討論30-31
• 小結(jié)31-33
• 第二章 染料木素對 PC12 細胞自由基清除及氧化應激的影響研究33-43
• 1 實驗材料和儀器33-35
• 2.實驗分組35
• 3. PC12 細胞活性氧的測定35
• 4. PC12 細胞丙二醛的測定35-36
• 5. PC12 細胞超氧化物歧化酶的活性測定36
• 6. 統(tǒng)計分析36
• 7. 實驗結(jié)果36-40
• 8.討論40-42
• 小結(jié)42-43
• 第三章 染料木素對 PC12 細胞膜電位及膜通透性的影響研究43-54
• 1 實驗材料和儀器43-45
• 2. 實驗分組45
• 3. PC12 細胞膜電位的測定45
• 4. PC12 細胞細胞色素 C 檢測45-46
• 5. PC12 細胞 Caspase-3 活性的測定46-47
• 6.統(tǒng)計分析47
• 7.實驗結(jié)果47-52
• 8.討論52-54
• 小結(jié)54
• 總結(jié)與展望54-56
• 參與文獻56-63
• 附錄 縮寫詞注釋63-64
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文及成果64-65
• 致謝65

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 趙黔魯,柴錫慶;魚藤酮致PC12細胞線粒體功能及超微結(jié)構(gòu)的影響[J];第三軍醫(yī)大學學報;2005年07期

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  本文關鍵詞：染料木素對Aβ誘導的神經(jīng)細胞線粒體功能異常的保護作用及機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：319743