發(fā)布時(shí)間：2017-04-21 06:43

  本文關(guān)鍵詞：染料木素對(duì)Aβ誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞線粒體功能異常的保護(hù)作用及機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：染料木素（Genistein，Gen）是大豆異黃酮苷元的主要成份之一，，廣泛存在于豆科植物中。染料木素被稱為植物雌激素，在人體內(nèi)可與雌激素受體結(jié)合發(fā)揮弱雌激素樣作用和抗雌激素活性。研究表明，染料木素不僅對(duì)心血管疾病、骨質(zhì)疏松、腫瘤等均具有防治作用，而且對(duì)AD等神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病具有一定的預(yù)防和治療作用，現(xiàn)廣泛應(yīng)用于制藥、營(yíng)養(yǎng)保健品等領(lǐng)域。本課題組前期研究表明，染料木素可作用于海馬神經(jīng)細(xì)胞，通過蛋白激酶C(Protein kinase C， PKC)快速信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路進(jìn)而調(diào)節(jié)α、β-分泌酶活性，抑制Aβ形成與沉積，降低細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度，提高Bcl-2/Bax的比值，從而抑制Aβ神經(jīng)毒性，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。目前，有關(guān)染料木素的神經(jīng)保護(hù)作用研究比較深入，但更為深入的機(jī)制研究如有關(guān)線粒體介導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路報(bào)道較少。本論文將繼續(xù)在細(xì)胞水平就染料木素的細(xì)胞保護(hù)作用及其分子機(jī)制作進(jìn)一步的研究。具體內(nèi)容如下： 1.染料木素對(duì)Aβ誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞線粒體形態(tài)及活力的影響研究：以Aβ25-35毒素誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷，構(gòu)建細(xì)胞損傷模型，用不同濃度的Gen預(yù)處理2h后，再加入Aβ25-35繼續(xù)孵育24h， MTT法檢測(cè)PC12細(xì)胞存活率；MitoTracker Green FM線粒體熒光探針檢測(cè)線粒體形態(tài)變化；2，6-二氯苯酚靛酚鈉（2，6-DPIP）還原法測(cè)定琥珀酸脫氫酶（SDH）活力；分光光度法測(cè)定Na+-K+-ATP酶活力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)Gen能改善Aβ25-35誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞線粒體形態(tài)，提高線粒體琥珀酸脫氫酶活力及Na+-K+-ATP酶活力。 2.染料木素對(duì)Aβ誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞自由基清除及氧化應(yīng)激的影響研究：DCFH-DA熒光探針檢測(cè)活性氧（ROS）生成；硫代巴比妥酸（TBA）法測(cè)定丙二醛（MDA）含量；黃嘌呤氧化法測(cè)定超氧化物歧化酶（SOD）活力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)Gen能減少Aβ25-35誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞活性氧生成量，降低MDA含量，提高SOD活性的功能。 3.染料木素對(duì)Aβ誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞線粒體膜電位及膜通透性的影響研究：羅丹明123熒光染料檢測(cè)線粒體跨膜電位（△ψm）；ELISA雙抗體夾心法測(cè)定胞內(nèi)細(xì)胞色素C濃度；分光光度法檢測(cè)Caspase-3活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)Gen能穩(wěn)定Aβ25-35誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞線粒體跨膜電位，減少細(xì)胞色素C的釋放，抑制Caspase-3活性。 研究結(jié)果表明，染料木素通過改善PC12細(xì)胞線粒體形態(tài)、穩(wěn)定線粒體膜電位及膜通透性、提高細(xì)胞活力以及自由基清除和氧化應(yīng)激能力，從而抑制Aβ誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損傷和線粒體功能異常。
【關(guān)鍵詞】：染料木素 阿爾茨海默病 β淀粉樣蛋白 線粒體
【學(xué)位授予單位】：廣東藥學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R96
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-19
• 一、 β淀粉樣蛋白神經(jīng)毒性與線粒體功能異常研究10-15
• 1. Aβ的形成與其神經(jīng)毒性10-11
• 2. Aβ神經(jīng)毒性與線粒體功能異常11-15
• 二、 染料木素研究概況15-17
• 1. 神經(jīng)保護(hù)及治療神經(jīng)退行性疾病15
• 2. 抗腫瘤作用15-16
• 3. 抗氧化作用16
• 4. 降血脂16
• 5. 防治骨質(zhì)疏松癥16-17
• 6. 預(yù)防心血管疾病17
• 三、 本研究的目的與意義17-19
• 第一章 染料木素對(duì) PC12 細(xì)胞線粒體形態(tài)及活力的影響研究19-33
• 第一節(jié) 不同濃度 Gen 對(duì) Aβ誘導(dǎo)損傷的 PC12 細(xì)胞活力的影響19-24
• 1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器19-21
• 2 PC12 細(xì)胞培養(yǎng)21
• 3. 細(xì)胞活性測(cè)定21-22
• 4. 統(tǒng)計(jì)分析22
• 5. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果22-23
• 6. 討論23-24
• 第二節(jié) 染料木素對(duì) PC12 細(xì)胞線粒體形態(tài)及活力的影響24-31
• 1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器24-26
• 2. 實(shí)驗(yàn)分組26
• 3． PC12 細(xì)胞線粒體形態(tài)的觀察26
• 4. PC12 細(xì)胞線粒體的提取分離26
• 5. PC12 細(xì)胞線粒體琥珀酸脫氫酶的測(cè)定26-27
• 6. PC12 細(xì)胞線粒體 Na+-K+-ATP 酶測(cè)定27
• 7. 統(tǒng)計(jì)分析27
• 8. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-30
• 9. 討論30-31
• 小結(jié)31-33
• 第二章 染料木素對(duì) PC12 細(xì)胞自由基清除及氧化應(yīng)激的影響研究33-43
• 1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器33-35
• 2.實(shí)驗(yàn)分組35
• 3. PC12 細(xì)胞活性氧的測(cè)定35
• 4. PC12 細(xì)胞丙二醛的測(cè)定35-36
• 5. PC12 細(xì)胞超氧化物歧化酶的活性測(cè)定36
• 6. 統(tǒng)計(jì)分析36
• 7. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果36-40
• 8.討論40-42
• 小結(jié)42-43
• 第三章 染料木素對(duì) PC12 細(xì)胞膜電位及膜通透性的影響研究43-54
• 1 實(shí)驗(yàn)材料和儀器43-45
• 2. 實(shí)驗(yàn)分組45
• 3. PC12 細(xì)胞膜電位的測(cè)定45
• 4. PC12 細(xì)胞細(xì)胞色素 C 檢測(cè)45-46
• 5. PC12 細(xì)胞 Caspase-3 活性的測(cè)定46-47
• 6.統(tǒng)計(jì)分析47
• 7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果47-52
• 8.討論52-54
• 小結(jié)54
• 總結(jié)與展望54-56
• 參與文獻(xiàn)56-63
• 附錄 縮寫詞注釋63-64
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文及成果64-65
• 致謝65

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前5條

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  本文關(guān)鍵詞：染料木素對(duì)Aβ誘導(dǎo)的神經(jīng)細(xì)胞線粒體功能異常的保護(hù)作用及機(jī)制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：319743