載阿霉素和氧化鐵納米顆粒的微泡體外雙模式成像及對(duì)淋巴瘤細(xì)胞毒性的研究
本文關(guān)鍵詞:載阿霉素和氧化鐵納米顆粒的微泡體外雙模式成像及對(duì)淋巴瘤細(xì)胞毒性的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:制備一種載化療藥物阿霉素(adriamycin/doxorubicin, ADM/DOX)和氧化鐵納米顆粒(iron oxide nanoparticles, ION)的多功能聚合物微泡(multifunctional polymer microbubbles, MPMBs),驗(yàn)證其體外雙模式成像的效能,觀察其聯(lián)合及不聯(lián)合超聲對(duì)彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma, DLBCL)細(xì)胞株SU-DHL-4增殖和凋亡的影響,并初步探討其相關(guān)機(jī)制。方法:1以聚左旋乳酸(poly L lactic acid, PLLA)和聚乙烯醇(polyvinyl alcohol, PVA)作為膜殼材料,通過機(jī)械振蕩法制備了包裹ADM和油酸修飾的氧化鐵納米顆粒(oleic acid modified ION, OA-ION)的 MPMBs,并對(duì)其進(jìn)行粒徑、顯微形貌等結(jié)構(gòu)表征和磁性能、包封率等檢測(cè)。分別采用GE臨床超聲診斷儀、7.0T微磁共振系統(tǒng)進(jìn)行體外成像實(shí)驗(yàn),分別考察并比較生理鹽水、普通多聚物微泡(polymer microbubbles, PMBs)及MPMBs的顯影情況。2將SU-DHL-4細(xì)胞株按處理方法不同分為以下6組:對(duì)照組,單純超聲組,單純ADM組,ADM+超聲組,MPMBs組及MPMBs+超聲組。CCK-8法檢測(cè)各組細(xì)胞活力,吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)雙染法熒光顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),流式細(xì)胞學(xué)(flow cytometry,FCM)檢測(cè)細(xì)胞凋亡,Western blotting檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白:bcl-2、bax、 caspase 3等。結(jié)果:1 MPMBs磁性能良好,呈規(guī)則圓形,粒徑分布集中,主要分布區(qū)間(603.3±190.8)nm,ADM包封率為(25.41±4.52)%。MPMBs具有明顯增強(qiáng)磁共振T2*成像的能力,且較PMBs具有更好的超聲顯影效果。2分組處理48h后觀察,相對(duì)于對(duì)照組與單純超聲組而言,其余各組細(xì)胞增值抑制、細(xì)胞凋亡均有不同程度增強(qiáng),凋亡相關(guān)蛋白bcl-2表達(dá)降低,bax、caspase3表達(dá)增高。兩兩比較顯示,上述變化MPMBs聯(lián)合超聲組較單純ADM組顯著。結(jié)論:共載了ADM和OA-ION的MPMBs可提高體外磁共振及超聲顯像效果,其聯(lián)合超聲可增強(qiáng)ADM對(duì)DLBCL細(xì)胞株SU-DHL-4的毒性,為進(jìn)一步的研究提供了體外實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】:微泡 氧化鐵 多柔比星 彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤
【學(xué)位授予單位】:東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R96
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-10
- 縮略詞表10-12
- 第一章 前言12-16
- 1.1 彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤診療現(xiàn)狀12-13
- 1.2 醫(yī)學(xué)成像診斷模式現(xiàn)狀13-14
- 1.3 一體化診療醫(yī)學(xué)模式14-15
- 1.4 本課題的研究任務(wù)15-16
- 第二章 載阿霉素和氧化鐵納米顆粒的微泡制備及體外雙模式成像16-27
- 2.1 材料和方法16-23
- 2.1.1 主要試劑16
- 2.1.2 主要儀器及耗材16-17
- 2.1.3 實(shí)驗(yàn)方法17-23
- 2.1.3.1 MPMBs的制備17-21
- 2.1.3.2 MPMBs一般性質(zhì)的測(cè)定21-23
- 2.1.3.3 體外雙模式成像23
- 2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-26
- 2.2.1 MPMBs的一般性質(zhì)23-25
- 2.2.2 體外雙模式成像25-26
- 2.3 討論26-27
- 第三章 MPMBs對(duì)DLBCL細(xì)胞的影響及其與超聲的聯(lián)合作用27-41
- 3.1 材料和方法27-35
- 3.1.1 主要試劑27
- 3.1.2 主要儀器及耗材27-28
- 3.1.3 細(xì)胞來源28
- 3.1.4 試劑配制28
- 3.1.5 實(shí)驗(yàn)方法28-35
- 3.1.5.1 細(xì)胞復(fù)蘇與培養(yǎng)28-29
- 3.1.5.2 cck-8法單藥ADM對(duì)SU-DHL4細(xì)胞半抑制濃度的測(cè)定29-30
- 3.1.5.3 細(xì)胞分組干預(yù)30
- 3.1.5.4 cck-8法細(xì)胞活力檢測(cè)30-31
- 3.1.5.5 吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)雙染熒光顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)觀察31
- 3.1.5.6 Annexin V-FITC/PI流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡31-32
- 3.1.5.7 Western blotting檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白bcl-2、bax、caspase 332-35
- 3.1.5.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析35
- 3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果35-39
- 3.2.1 單藥ADM對(duì)SU-DHL4細(xì)胞IC50的測(cè)定35
- 3.2.2 cck-8法細(xì)胞活力檢測(cè)35-36
- 3.2.3 AO/EB雙染熒光顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)觀察36
- 3.2.4 分組處理SU-DHL-4細(xì)胞48 h后對(duì)細(xì)胞凋亡的影響36-38
- 3.2.5 分組處理SU-DHL-4細(xì)胞48 h后各組細(xì)胞bcl-2、bax和caspase3蛋白的表達(dá)38-39
- 3.3 討論39-41
- 第四章 全文小結(jié)與展望41-42
- 第五章 文獻(xiàn)綜述——微泡造影劑在疾病診斷治療中的研究進(jìn)展42-48
- 5.1 微泡造影劑概述42-43
- 5.2 微泡造影劑用于診斷、治療的機(jī)理43
- 5.3 微泡造影劑用于疾病診斷43-45
- 5.4 微泡造影劑用于疾病治療45-46
- 5.5 問題及展望46-48
- 參考文獻(xiàn)48-56
- 致謝56-57
- 作者簡介57
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):311832
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