本文關(guān)鍵詞：羥基酪醇前體藥物的制備及體外活性評價，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的設(shè)計、合成羥基酪醇前體藥物,研究其對腫瘤細(xì)胞的抑制作用及誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,考察其在體外腫瘤細(xì)胞作用下能否釋放出原藥,為其今后的體內(nèi)研究提供參考依據(jù)。方法1以羥基酪醇為原料,依據(jù)酯化反應(yīng),分別與對甲苯磺酰氯、甲基磺酰氯和對硝基苯磺酰氯反應(yīng)合成羥基酪醇前體藥物。2將羥基酪醇前體藥物作用于神經(jīng)膠質(zhì)瘤C6細(xì)胞、肺癌A549細(xì)胞和結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞,用CCK-8法測定其對腫瘤細(xì)胞的抑制作用。3將篩選出羥基酪醇前體藥物B1、B2以不同濃度作用于神經(jīng)膠質(zhì)瘤C6細(xì)胞24h后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化。4在倒置熒光顯微鏡下通過Hoechst 33342/PI雙染觀察B1、B2作用于C6細(xì)胞24h后的形態(tài)變化。5利用流式細(xì)胞儀分析B1、B2處理C6細(xì)胞24h后細(xì)胞周期的變化。6收集B1、B2作用C6細(xì)胞后的含藥培養(yǎng)液及細(xì)胞,用乙酸乙酯萃取,萃取液經(jīng)HPLC分析。結(jié)果1按照設(shè)計的合成方法,完成目標(biāo)化合物制備,經(jīng)光譜鑒定。2 CCK-8比色法結(jié)果顯示:在8種羥基酪醇前體藥物中,B1、B2對神經(jīng)膠質(zhì)瘤C6細(xì)胞、肺癌A549細(xì)胞和結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞三種腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用均最強,且強于原藥羥基酪醇。在三種腫瘤細(xì)胞中,C6細(xì)胞對前藥B1、B2最敏感,且前藥B1對其呈劑量依賴性抑制,而前藥B2在濃度為150umol/L時,抑制率就達(dá)到80%以上,增加濃度抑制率無明顯變化,在濃度為1200umol/L時,抑制率有所降低。3將不同濃度的B1、B2作用于C6細(xì)胞24小時后,在倒置顯微鏡下觀察可見:隨著給藥劑量的增加,細(xì)胞變圓,死細(xì)胞越來越多,貼壁生長的細(xì)胞變稀疏,并出現(xiàn)細(xì)胞碎片。4在倒置熒光顯微鏡下觀察可見:隨著給藥濃度增加出現(xiàn)了呈亮藍(lán)色熒光的早期凋亡細(xì)胞及呈紅色熒光的晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞。5流式細(xì)胞儀檢測發(fā)現(xiàn):羥基酪醇前體藥物B1、B2可使神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞C6阻滯在G1期而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。6經(jīng)HPLC檢測發(fā)現(xiàn)羥基酪醇前體藥物B1、B2作用于C6細(xì)胞24h后能夠釋放出原藥HT,但是量很少,HT所占前體藥物B1、B2的比例也很小。結(jié)論本論文以羥基酪醇為原藥,通過酯化反應(yīng)設(shè)計并合成了3個系列8種羥基酪醇前體藥物;通過體外腫瘤細(xì)胞增殖抑制試驗,篩選出兩種具有強抗腫瘤活性的羥基酪醇前體藥物B1、B2,其通過阻滯細(xì)胞周期G1期來實現(xiàn)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用;通過HPLC分析發(fā)現(xiàn)B1、B2能夠釋放出原藥HT,為其進一步體內(nèi)研究提供參考依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：羥基酪醇前體藥物 抗腫瘤活性 細(xì)胞凋亡 釋放原藥
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R943
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文縮略表10-11
• 引言11-12
• 第1章 目標(biāo)化合物的設(shè)計和合成12-30
• 1.1 材料與方法12-15
• 1.1.1 原料和試劑12
• 1.1.2 主要儀器和設(shè)備12-13
• 1.1.3 羥基酪醇前體藥物的制備13-15
• 1.2 結(jié)果15-26
• 1.2.1 用對甲苯磺酰氯制備羥基酪醇前體藥物15-19
• 1.2.2 用甲基磺酰氯制備羥基酪醇前體藥物19-22
• 1.2.3 用對硝基苯磺酰氯制備羥基酪醇前體藥物22-26
• 1.3 討論26-27
• 1.4 小結(jié)27-28
• 參考文獻28-30
• 第2章 體外活性評價30-54
• 2.1 材料與方法30-36
• 2.1.1 原料與試劑30-31
• 2.1.2 主要溶液的配制31-32
• 2.1.3 實驗方法32-35
• 2.1.4 統(tǒng)計學(xué)分析35-36
• 2.2 結(jié)果36-48
• 2.2.1 羥基酪醇及其前體藥物對腫瘤細(xì)胞增殖抑制作用36-40
• 2.2.2 倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)變化40-41
• 2.2.3 Hoechst33342-PI雙染觀察細(xì)胞凋亡情況41-42
• 2.2.4 不同濃度羥基酪醇前體藥物對細(xì)胞周期的影響42-45
• 2.2.5 前藥在體外轉(zhuǎn)化為原藥的測定45-48
• 2.3 討論48-51
• 2.3.1 羥基酪醇前體藥物對腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用48-49
• 2.3.2 羥基酪醇前體藥物對細(xì)胞形態(tài)的影響49-50
• 2.3.3 羥基酪醇前體藥物對細(xì)胞凋亡的影響50-51
• 2.3.4 羥基酪醇前體藥物與酯酶51
• 2.4 小結(jié)51-52
• 參考文獻52-54
• 第3章 綜述 羥基酪醇及前體藥物研究進展54-70
• 3.1 羥基酪醇概述54-59
• 3.1.1 羥基酪醇的研究進展54-56
• 3.1.2 羥基酪醇的化學(xué)結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)56-57
• 3.1.3 羥基酪醇的藥理作用57-59
• 3.2 前體藥物59-62
• 3.2.1 前體藥物結(jié)構(gòu)60
• 3.2.2 制備原理60-61
• 3.2.3 前體藥物的應(yīng)用61-62
• 3.2.4 羥基酪醇前體藥物研究進展62
• 3.3 抗腫瘤前體藥物與酯酶62-63
• 參考文獻63-70
• 結(jié)論70-71
• 致謝71-72
• 導(dǎo)師簡介72-73
• 作者簡介73-74
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集74

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本文編號：299583