發(fā)布時間：2017-03-28 12:15

  本文關鍵詞：大豆肽對大鼠血脂代謝的影響及其抗動脈粥樣硬化機理研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的 深入研究大豆肽對血脂代謝的影響及其抗動脈粥樣硬化的作用機理,為新型大豆蛋白乃至生物活性肽的開發(fā)及其在食品、保健品、食品添加劑、飼料等相關行業(yè)的利用和發(fā)展提供可靠的理論依據(jù)。 研究方法 1.大豆肽對大鼠血脂代謝影響的量效研究 (1)血脂代謝實驗Wistar雄性大鼠,50只,體重(200±10)g,根據(jù)血清膽固醇(TC)水平及體重均衡的原則,隨機分為5組：正常對照組、高脂模型組、低、中、高劑量大豆肽組。正常對照組進食正常飼料,高脂模型組進食高脂飼料(特制,配方見后述),低、中、高劑量組配方飼料則是在高脂飼料的基礎上分別加入不同劑量的大豆肽,飼養(yǎng)40天后取血測定大鼠各項血脂指標。 (2)攝食量及糞便排出量影響實驗實驗期的最后3d,將大鼠移入代謝籠,單籠單只飼養(yǎng)。準確記錄每只大鼠的飼料投入量、剩余量,并收集每只大鼠3d的糞便烘干待檢,稱重并計算各組大鼠攝食量及糞便排出量,比較各組不同。 (3)體重及臟器重量影響實驗實驗期間每周稱量一次大鼠體重,實驗結(jié)束后,解剖大鼠取其肝、心、腎,稱重、計算臟體比值。肝臟冷凍(-20℃)待檢,比較各組大鼠體重、臟器重量及其系數(shù)間差異。 2.大豆肽抗動脈粥樣硬化機制的實驗研究 (1)脂酶與氧化型低密度脂蛋白影響實驗實驗結(jié)束后,大鼠斷頭取足量血分離血清待測,銅試劑法測定脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)濃度,計算總脂酶(總脂酶=LPL+HL)含量；ELISA法測定肝臟組織中卵磷脂脂酰基轉(zhuǎn)移酶(LCAT)、血清中氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)含量,比較各縛差異。 (2)內(nèi)皮因子影響實驗前述分離血清為待測樣品。ELISA法測定前列腺素(PGI2)和血栓烷A2(TXA2)及內(nèi)皮素-1(ET-1)含量；硝酸還原酶法測定內(nèi)源性一氧化氮(NO)含量,比較各組差異。 (3)載脂蛋白實驗ELISA法測定大鼠血清載脂蛋白A、B (Apo AI、Apo B),計算兩者比值并比較各組間的差異。 (4)糞膽汁酸實驗糞便烘干萃取后,循環(huán)酶法檢測其中的膽汁酸含量,比較各組間的差異。 (5)離體膽固醇微膠粒形成實驗以新鮮豬膽汁為反應體系,向體系中加入一定量的膽固醇,除空白管外,其他分別加入不同劑量大豆肽溶液,每個劑量設置10個平行樣,一定反應條件后測定游離膽固醇含量,以加入系統(tǒng)的膽固醇量減去沉淀中游離膽固醇量,計算膽固醇微膠粒含量。抑制率(%)=(1-含大豆肽試管中膽固醇微膠粒的含量/空白試管中膽固醇微膠粒的含量)*100% 3.統(tǒng)計學方法實驗數(shù)據(jù)均以(x±s)進行表示。采用SPSS16.0軟件進行統(tǒng)計學分析。兩組間比較采用t檢驗；多組間比較采用方差齊性檢驗和單因素方差分析(One Way ANOVA)。進一步進行組間兩兩比較時,若方差齊時,采用SNK檢驗(Student-Newman-Keuls法)；若方差不齊時,采用Games-Howell檢驗。以P0.05為差異有統(tǒng)計學意義(差異具有顯著性)。 結(jié)果 1.血脂代謝影響實驗結(jié)果 (1)血脂代謝實驗結(jié)果在實驗期內(nèi),高脂模型組大鼠經(jīng)高脂飼料飼養(yǎng)后,血清TC濃度是正常對照組的1.77倍,TG為1.58倍。經(jīng)t檢驗分析,高脂模型組和正常對照組之間大鼠TC、TG水平具有顯著性差異(t0.01)。實驗期末,與高脂模型組相比,中、高劑量組大鼠TC、TG含量均顯著降低(P0.05, P0.01);HDL-C含量升高但不具有顯著性(P0.05)。 (2)攝食量及糞便排出量影響實驗結(jié)果各組動物生長發(fā)育良好,活動正常,體重穩(wěn)定增加。高脂模型組大鼠攝食量減少,但不具有顯著性(P0.05),各組之間糞便排出量差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。 (3)體重及其臟器重量影響實驗結(jié)果實驗期間各組大鼠體重穩(wěn)定增加,從第2周末開始,中、高劑量組及正常組大鼠體重增加明顯,與高脂模型組相比,差異具有顯著性(P0.05,P0.01)。實驗期末,與高脂模型組相比,中、高劑量組大鼠體重、肝、心、腎重量增加明顯(P0.05,P0.01),高劑量組大鼠肝/體系數(shù)、腎/體系數(shù)偏高,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05,P0.01)。 2.大豆肽抗動脈粥樣硬化機制實驗結(jié)果 (1)實驗期末,與高脂模型組相比,中、高劑量組大鼠LPL、HL、總脂酶、LCAT、內(nèi)皮源性NO、PGI2、Apo AI、糞膽汁酸含量均顯著增加(P0.05,P0.01)；高劑量組Apo AI/Apo B增加具有統(tǒng)計學意義(P0.01)；而中、高劑量組ox-LDL、 ET-1、TXA2顯著降低(P0.05,P0.01)。各組之間Apo B無明顯差異(P0.05)。 (2)在反應體系中加入不同劑量大豆肽混懸液時,可以看到各管均可抑制膽固醇微膠粒形成,但各管抑制率無顯著性差異(P0.05)。 結(jié)論 1.飼喂大鼠高脂飼料40天后,可誘導大鼠高脂模型成功。 2.飼料含量為4.050%和12.150%的大豆肽混懸液均可明顯降低大鼠TC、TG,并-定程度的升高大鼠HDL-C濃度,根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》(2003年版)判定標準,大豆肽有輔助降血脂功能。 3.大豆肽抗As機制可能為： (1)增強血液中的脂酶及Apo AI含量,降低Apo B含量,提高體內(nèi)尤其是肝臟對脂蛋白的轉(zhuǎn)運、轉(zhuǎn)化,從源頭抑制脂粒的過量沉積。 (2)減少ox-LDL產(chǎn)生,從而減少泡沫細胞形成,降低血小板粘附、聚集及血栓形成,預防動脈粥樣硬化(AS)。 (3)增加PGI2、內(nèi)皮源性N0,減少TXA2及ET-1,抑制其對內(nèi)皮細胞的損傷,維持血管正常的生理功能,防止AS斑塊的產(chǎn)生。 (4)增加糞膽汁酸的排泄,加速體內(nèi)脂蛋白的轉(zhuǎn)化、清除,降低血脂水平。
【關鍵詞】：大豆肽 降血脂 脂酶 內(nèi)皮因子、膽汁酸 動脈粥樣硬化 機制
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R589.2;R965
【目錄】：

• 中文摘要6-9
• ABSTRACT9-13
• 符號說明13-14
• 前言14-21
• 第一部分 大豆肽對血脂代謝影響的量效研究21-31
• 1 材料與方法21-22
• 2 結(jié)果22-25
• 3 討論25-31
• 第二部分 大豆肽抗動脈粥樣硬化機理研究31-44
• 1 材料與方法31-32
• 2 結(jié)果32-37
• 3 討論37-44
• 結(jié)論44-45
• 參考文獻45-51
• 致謝51-52
• 附錄一：血清總膽固醇測定方法52-53
• 附錄二：血清甘油三酯測定方法53-55
• 附錄三：血清高密度脂蛋白膽固醇測定方法55-57
• 附錄四：大鼠載脂蛋白A(APO AI)檢測方法57-60
• 附錄五：總膽汁酸檢測試劑盒(循環(huán)酶法)說明書60-61
• 附錄六：大鼠卵磷脂膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶(LCAT)試劑盒使用說明書61-64
• 附錄七：大鼠內(nèi)皮素(ET-1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書64
• 附錄八：大鼠前列環(huán)素(PGI_2)試劑盒說明書64
• 附錄九：大鼠血栓素A_2(TXA_2)試劑盒使用說明書64
• 附錄十：大鼠氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)劑盒使用說明書64-65
• 附錄十一：大鼠載脂蛋白B(APO B)定量檢測試劑盒(ELISA)使用說明書65-66
• 附錄十二：一氧化氮(NO)試劑盒說明書(硝酸還原酶法)66-68
• 附錄十三：總脂酶測試盒說明書(測脂蛋白脂酶LPL及肝脂酶HL)68-71
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文71-72
• 學位論文評閱及答辯情況表72

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 倪鴻昌,李俊;高血脂癥實驗性動物模型的研究進展[J];安徽醫(yī)藥;2004年06期

2 陳園園;施用暉;樂國偉;;不同分子量大豆低聚肽抗氧化活性與抗疲勞關系研究[J];氨基酸和生物資源;2008年02期

3 梁晉普;楊惠民;盛彤;韓麗蓓;袁玉嬌;牛曉紅;金紅;;載脂蛋白E基因多態(tài)性與高脂血癥痰瘀證患者血脂水平關系的研究[J];中華中醫(yī)藥雜志;2008年07期

4 包樂媛;張業(yè)尼;錢磊;王建玲;鄒菁;路福平;杜連祥;;大豆肽對高脂血癥大鼠的降脂作用[J];大豆科學;2007年05期

5 陳曉光,劉松巖,楊涵音;大豆低聚糖—功能性低聚糖[J];大豆通報;2000年04期

6 高長城,胡銳,李煜馨;大豆肽對增強體能的作用[J];大豆通報;2001年02期

7 張曉剛;肝脂酶與脂蛋白代謝[J];國外醫(yī)學.臨床生物化學與檢驗學分冊;2002年01期

8 劉新旗;涂叢慧;張連慧;陸健;;大豆蛋白的營養(yǎng)保健功能研究現(xiàn)狀[J];北京工商大學學報(自然科學版);2012年02期

9 陳成,劉文玉,楊青;大豆蛋白活性肽的生物學功能及其應用[J];黑龍江農(nóng)業(yè)科學;2004年03期

10 黃永艷;李春旺;;中醫(yī)藥治療高脂血癥實驗研究進展[J];中醫(yī)藥導報;2006年01期

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本文編號：272252