發(fā)布時(shí)間：2017-03-23 07:01

  本文關(guān)鍵詞：甘草次酸修飾的PEI-PLGA的合成及其作為納米粒載體的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：聚合物納米粒是由高分子物質(zhì)構(gòu)成的固態(tài)膠體粒子,具有穩(wěn)定的形態(tài)結(jié)構(gòu)、表面效應(yīng)、小尺寸效應(yīng)及量子隧道效應(yīng),有些聚合物納米粒還具有溫度、p H、電場和磁場效應(yīng)等特定功能。所以,近些年來得到廣泛關(guān)注。通常腫瘤化療藥物都存在靶向性差、毒副作用大等缺點(diǎn)。一些化療藥物還由于溶解度小而影響其應(yīng)用。將難溶性的化療藥物載入納米粒中,不僅可增加藥物的溶解度,而且可使藥物靶向病變部位,減少對正常組織和細(xì)胞的毒副作用等,具有廣泛的應(yīng)用前景。本文選擇具有優(yōu)良生物相容性和生物降解性的PLGA為疏水鏈,PEI為親水鏈,通過形成酰胺鍵,合成兩親性共聚物PEI-PLGA(PP),再用具有優(yōu)良肝靶向性的甘草次酸對其進(jìn)行修飾,制得具有肝靶向性的共聚物GA-PEI-PLGA(GPP)�？疾霨A、PEI、PLGA摩爾比對GPP形成納米粒的影響,篩選優(yōu)化確定三者的最佳摩爾比為1:1:1。并應(yīng)用FT-IR、13C-NMR、1H-NMR對產(chǎn)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征,確證成功合成GPP共聚物。以芘為探針,采用穩(wěn)態(tài)熒光探針法測定GPP共聚物的臨界膠束濃度(CMC)為21.72?g/m L。所形成的GPP納米粒大小均勻,平均粒徑為164.6 nm,zeta電位為45 m V。通過溶血試驗(yàn)對GPP納米粒的血液相容性進(jìn)行考察,以評價(jià)其安全性。結(jié)果表明,GPP納米粒的血液相容性優(yōu)于PP納米粒,PP納米粒的血液相容性優(yōu)于PEI。選擇姜黃素(Cur)為模型藥物,采用薄膜水化法制備姜黃素/GA-PEI-PLGA(Cur/GPP)納米粒,應(yīng)用單因素實(shí)驗(yàn)及正交設(shè)計(jì)試驗(yàn),考察水化溫度、水化時(shí)間、投藥量對納米粒的包封率及載藥量的影響,篩選最佳制備工藝。結(jié)果表明,水化溫度對納米粒的包封率和載藥量的影響最大,其次是投藥量,再次是水化時(shí)間。確定最佳制備工藝條件為:水化溫度60℃、水化時(shí)間4 h、投藥量7 mg。按此最佳制備工藝制得的包封率為85.4%,載藥量為16.1%。透射電子顯微鏡觀察可見Cur/GPP納米粒呈球形,大小均一,分布均勻;激光粒度分析儀測得Cur/GPP納米粒的平均粒徑為330.3nm,zeta電位為39.2 m V。采用動(dòng)態(tài)透析法考察Cur/GPP納米粒的體外釋藥性能。結(jié)果表明,游離Cur快速釋放,3 h的累積釋放率已達(dá)到95.0%。Cur/GPP納米粒在0~2 h有一定的突釋現(xiàn)象,2~14 h的釋放速率較快,14~86 h的釋放較平緩。Cur/GPP納米粒在2 h的累積釋放率為35.4%,14 h的累積釋放率為70.4%,86 h的累積釋放率為87.0%,具有緩釋特性。采用MTT實(shí)驗(yàn)考察GPP納米粒的細(xì)胞毒性,Cur/GPP納米粒的對Hep G2和BEL-7402細(xì)胞的生長抑制作用,并與姜黃素/PEI-PLGA(Cur/PP)納米粒、游離Cur進(jìn)行比較。結(jié)果表明,GPP納米粒、PP納米粒對Hep G2和BEL-7402細(xì)胞兩種的生長均有抑制作用,隨著納米粒濃度升高、納米粒與細(xì)胞共孵育的時(shí)間增大,其抑制作用增大,細(xì)胞毒性增大;GPP納米粒對Hep G2和BEL-7402細(xì)胞兩種的生長抑制作用均小于PP納米粒,說明GPP納米粒的細(xì)胞毒性小于PP納米粒。共同孵育24、72 h后,GPP納米粒對Hep G2細(xì)胞和BEL-7402細(xì)胞的抑制率總體上大于Cur/PP納米粒,兩者均大于游離Cur;共同孵育48 h后,濃度較低時(shí)Cur/PP納米粒的抑制作用大于Cur/GPP納米粒,濃度較高時(shí)Cur/GPP納米粒的抑制作用大于Cur/PP納米粒,且二者的抑制作用總體大于游離Cur。采用細(xì)胞攝取試驗(yàn)評價(jià)Cur/GPP納米粒的體外靶向性,以激光共聚焦顯微鏡觀察Hep G2對Cur/GPP納米粒的攝取情況,并與Cur/PP納米粒進(jìn)行比較。結(jié)果表明,GA修飾可顯著促進(jìn)納米粒攝取進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),Cur/GPP納米粒比Cur/PP納米粒更易被Hep G2細(xì)胞攝取,且有較多的納米粒進(jìn)入細(xì)胞核中。
【關(guān)鍵詞】：納米粒 甘草次酸修飾的PEI-PLGA 姜黃素 薄膜水化法 MTT實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞攝取
【學(xué)位授予單位】：廣東藥學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R943
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 第一章 緒論10-15
• 1 納米粒作為載藥系統(tǒng)10
• 1.1 納米粒的概念10
• 1.2 納米粒的分類10
• 2 靶向給藥系統(tǒng)10-11
• 3 聚合物納米粒常用的載體材料11-13
• 3.1 天然高分子材料11-12
• 3.2 合成高分子材料12-13
• 4 模型藥物的選擇13
• 5 論文工作的提出13-15
• 第二章GA-PEI-PLGA共聚物的制備及表征15-28
• 1 儀器與試藥15-16
• 1.1 儀器15
• 1.2 試藥15-16
• 2 實(shí)驗(yàn)方法16-17
• 2.1 GA-PEI-PLGA共聚物的制備16
• 2.2 GA-PEI-PLGA共聚物的表征16-17
• 2.3 GA-PEI-PLGA納米粒的粒徑和zeta電位測定17
• 3 結(jié)果與討論17-28
• 3.1 GA-PEI-PLGA共聚物的制備17-19
• 3.2 GA-PEI-PLGA共聚物的表征19-28
• 第三章GA-PEI-PLGA納米粒的血液相容性28-31
• 1 儀器與試藥28
• 1.1 儀器28
• 1.2 試藥28
• 1.3 動(dòng)物28
• 2 方法28-29
• 2.1 樣品溶液的配制28
• 2.2 紅細(xì)胞懸液的制備28
• 2.3 溶血試驗(yàn)28-29
• 3 結(jié)果與討論29-31
• 第四章 姜黃素/GA-PEI-PLGA納米粒的制備及其理化性質(zhì)考察31-42
• 1 材料31
• 1.1 儀器31
• 1.2 試藥31
• 2 實(shí)驗(yàn)方法31-35
• 2.1 姜黃素測定方法建立31-32
• 2.2 姜黃素/GA-PEI-PLGA（Cur/GPP）納米粒的制備32
• 2.3 載藥納米粒的包封率、載藥量測定32-33
• 2.4 載藥納米粒的制備工藝優(yōu)化33-34
• 2.5 Cur/GPP納米粒的表征34
• 2.6 Cur/GPP納米粒的體外釋藥行為34-35
• 3 結(jié)果與討論35-42
• 3.1 姜黃素測定方法建立35
• 3.2 Cur/GPP納米粒的制備35-36
• 3.3 載藥納米粒的制備工藝優(yōu)化36-39
• 3.4 Cur/GPP納米粒的表征39-40
• 3.5 Cur/GPP納米粒的體外釋藥性能40-42
• 第五章Cur/PEI-PLGA和Cur/GA-PEI-PLGA體外活性研究42-55
• 1 儀器與試藥42-43
• 1.1 細(xì)胞系42
• 1.2 儀器42
• 1.3 試藥42-43
• 2 實(shí)驗(yàn)方法43-45
• 2.1 溶液的配制43
• 2.2 HepG2 細(xì)胞和BEL-7402 細(xì)胞的培養(yǎng)及單細(xì)胞懸液的制備43
• 2.3 Cur/GA-PEI-PLGA納米粒對HepG2 和BEL-7402 細(xì)胞的抑制作用43-45
• 2.4 細(xì)胞攝取試驗(yàn)45
• 3 結(jié)果與討論45-55
• 3.1 MTT試驗(yàn)45-50
• 3.2 細(xì)胞攝取試驗(yàn)50-55
• 結(jié)論與展望55-57
• 參考文獻(xiàn)57-61
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文61-62
• 致謝62

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：甘草次酸修飾的PEI-PLGA的合成及其作為納米粒載體的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：263146