珍稀瀕危藥用鐵皮石斛HMGR基因的克隆和特征分析
本文關(guān)鍵詞:珍稀瀕危藥用鐵皮石斛HMGR基因的克隆和特征分析,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:3-羥基-3-甲基戊二酸單酰輔酶A還原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme-A reductase,HMGR)是甲羥戊酸途徑中的第一個(gè)限速酶,在植物細(xì)胞萜類物質(zhì)合成代謝過程中發(fā)揮重要作用。但是,HMGR基因在珍稀瀕危蘭科藥用植物鐵皮石斛類萜生物合成途徑中的作用尚不清楚。本研究利用RT-PCR和RACE技術(shù),首次從鐵皮石斛中克隆到一個(gè)HMGR基因,命名為DoHMGR1(GenBank注冊(cè)號(hào)JX272632)。DoHMGR1基因cDNA全長2 071 bp,編碼一條由562個(gè)氨基酸組成的多肽,分子量59.73 kD,等電點(diǎn)6.18。DoHMGR1蛋白包含HMGR蛋白家族的4個(gè)保守結(jié)構(gòu)域(63~561、147~551、268~383、124~541)和兩個(gè)跨膜基序(42~64、85~107)。DoHMGR1基因與多種植物HMGR基因相似性很高(67%~89%),與萬代蘭、水稻、玉米等單子葉植物親緣關(guān)系較近。DoHMGR1基因具有組織表達(dá)特異性,其轉(zhuǎn)錄本在石斛根和莖中表達(dá)量較高,為葉中的2.13和1.98倍。DoHMGR1基因的分子鑒定為進(jìn)一步解析該基因在鐵皮石斛萜類物質(zhì)合成代謝途徑中的分子調(diào)控作用奠定基礎(chǔ)。
【作者單位】: 陜西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院 陜西省中藥基礎(chǔ)與新藥研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院、北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥用植物研究所;
【關(guān)鍵詞】: 鐵皮石斛 -羥基--甲基戊二酰輔酶A還原酶 基因表達(dá) 實(shí)時(shí)定量PCR
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31070300,31101608) 教育部科學(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(211177) 陜西省科技計(jì)劃青年科技新星項(xiàng)目(2012KJXX-44)
【分類號(hào)】:R915
【正文快照】: 植物細(xì)胞類萜生物合成途徑由甲羥戊酸(mevalonate,MVA)和5-磷酸脫氧木酮糖/2C-甲基4-磷酸-4D-赤蘚醇(1-deoxy-D-xylulose 5-phosphate/2C-methyl-D-erythritol 4-phosphate,DXP/MEP)途徑組成,其中,MVA為細(xì)胞合成萜類、甾醇、激素等物質(zhì)提供前體化合物,在植物次生代謝過程中發(fā)
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本文編號(hào):254995
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