本文關鍵詞：cRGD修飾的載阿霉素酸敏感膠束的構建及抗腫瘤研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:本文旨在構建集智能、高效、低毒為一體的c RGD修飾的、生物可降解酸敏感膠束給藥系統(tǒng),以期實現(xiàn)阿霉素在腫瘤新生血管和腫瘤細胞內的遞送及藥物的快速釋放。同時,對所制備的膠束的體外及體內抗腫瘤效果進行考察。方法:本文通過開環(huán)聚合反應合成生物可降解的兩親性嵌段共聚物PEG-PTMBPEC,通過酰胺反應將c RGD連接到PEG-PTMBPEC末端。采用氫譜(1H NMR)對合成的聚合物材料進行表征。通過透析法制備了空白膠束和載藥膠束。通過動態(tài)光散射(DLS)、透射電鏡(TEM)及熒光分光光度計對膠束的粒徑、電位、PDI、形態(tài)、載藥量及包封率進行表征。以αvβ3受體過度表達的黑色素瘤細胞(B16)及人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)為主要的模型細胞�？瞻啄z束的毒性,c RGD多肽的最佳配體密度及各種處方膠束的IC50值是通過MTT法測定的。在細胞攝取實驗部分,通過激光共聚焦(CLSM)及流式細胞儀對膠束的攝取情況進行定性及定量的分析。通過不同的抑制劑對未經(jīng)c RGD修飾的膠束(NT-micelle)及多肽修飾的膠束(c RGD-micelle)的攝取的抑制情況來考察膠束的攝取機制。CLSM進一步驗證膠束在細胞內的p H敏感性。膠束的體內抗腫瘤實驗是在B16荷瘤小鼠的體內進行的。采用HE染色法考察膠束對小鼠的心臟毒性。結果:1H NMR結果顯示,所合成的PEG-PTMBPEC的純度為80.3%,c RGD的連接效率為82.3%。所制備的膠束粒徑在153-181 nm之間,PDI均小于0.3。膠束的載藥量接近10%,包封率近60%。TEM電鏡圖顯示,所制備的膠束形態(tài)圓整且分布均勻,同時在血清中具有良好的穩(wěn)定性。膠束的體外釋放呈現(xiàn)明顯的p H依賴性�？瞻啄z束對正常細胞及腫瘤細胞均無毒,表明空白載體具有良好的生物相容性。主動靶向膠束的IC50值比未經(jīng)修飾的膠束低1.82(B16)及1.78(HUVEC)倍。細胞對c RGD-micelle的攝取顯著高于NT-micelle。膠束通過多種途徑進入細胞,其中以網(wǎng)格蛋白介導的內吞途徑為主。CLSM結果顯示,細胞內溶酶體的酸性環(huán)境可觸發(fā)膠束的p H敏感性,使藥物在細胞內可快速釋放。體內實驗結果顯示,膠束組的小鼠即使在15 mg/kg的給藥劑量下,仍無明顯的毒副作用。同時,c RGD-micelle比NT-micelle表現(xiàn)出更強的抑瘤效果。HE染色實驗結果顯示,膠束在高劑量的給藥條件下對心臟無毒。結論:本文成功制備了c RGD修飾的酸敏感載阿霉素的膠束。所制備的膠束粒徑均一,具有較高的包封率,在血清中具有良好的穩(wěn)定性且體外釋放呈現(xiàn)良好的p H敏感性。體內外抗腫瘤活性實驗結果顯示,主動靶向膠束具有較高的優(yōu)勢。膠束可實現(xiàn)DOX在細胞內的快速釋放且在高劑量的給藥條件下,對心臟毒性較低�？傊�,該聚合物膠束給藥系統(tǒng)用于癌癥的治療具有廣闊的前景。
【關鍵詞】：cRGD多肽 酸敏感 聚合物膠束 細胞攝取機制 快速釋藥
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R943
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• ABSTRACT6-11
• 前言11-22
• 1. 刺激響應型納米給藥系統(tǒng)11-14
• 1.1 pH敏感型11-13
• 1.2 還原敏感型13
• 1.3 溫度敏感型13-14
• 2. RGD多肽介導的主動靶向給藥系統(tǒng)14-15
• 3. 納米載體的攝取途徑15-19
• 3.1 網(wǎng)格蛋白介導的內吞15-16
• 3.2 小窩蛋白介導的內吞16
• 3.3 巨胞飲途徑16-17
• 3.4 網(wǎng)格蛋白-小窩蛋白非依賴途徑17
• 3.5 納米載體的多途徑內吞17-19
• 4. 阿霉素的簡介19
• 5. 聚合物材料的簡介19-20
• 6. 課題的設計理念及意義20-22
• 第一章 聚合物材料的合成及表征22-25
• 1 材料與儀器22
• 1.1 材料與試劑22
• 1.2 實驗儀器22
• 2 實驗方法22-23
• 2.1 聚合物的合成22-23
• 3 實驗結果23-24
• 4 討論與小結24-25
• 第二章pH敏感膠束的制備及表征25-33
• 1 材料與儀器25
• 1.1 材料與試劑25
• 1.2 實驗儀器25
• 2 實驗方法25-28
• 2.1 DOX體外分析方法的建立25-26
• 2.2 pH敏感膠束的制備26
• 2.3 pH敏感膠束的表征26-28
• 3 實驗結果28-32
• 3.1 DOX體外分析方法的建立28
• 3.2 膠束粒徑、電位、PDI、包封率及載藥量28-30
• 3.3 膠束的體外釋放30-31
• 3.4 膠束的血清穩(wěn)定性31-32
• 4 討論與小結32-33
• 第三章pH敏感膠束體外抗腫瘤活性的研究33-48
• 1 材料與儀器33
• 1.1 材料與試劑33
• 1.2 實驗儀器33
• 2 實驗方法33-37
• 2.1 細胞培養(yǎng)33-34
• 2.2 細胞毒性實驗34-35
• 2.3 細胞攝取實驗35
• 2.4 攝取機制考察35-36
• 2.5 細胞內定位36-37
• 2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析37
• 3 實驗結果37-46
• 3.1 細胞毒性實驗結果37-40
• 3.2 細胞攝取考察40-42
• 3.3 攝取機制考察42-45
• 3.4 膠束pH敏感性考察45-46
• 4 討論與小結46-48
• 第四章pH敏感膠束體內抗腫瘤活性的研究48-54
• 1 材料與儀器48
• 1.1 材料與試劑48
• 1.2 實驗儀器48
• 1.3 實驗動物48
• 2 實驗方法48-49
• 2.1 B16 荷瘤鼠模型的建立48
• 2.2 DOX給藥劑量的篩選48-49
• 2.3 體內抗腫瘤活性研究49
• 2.4 心臟病理切片觀察49
• 3 實驗結果49-52
• 3.1 DOX給藥劑量的篩選49-50
• 3.2 體內抗腫瘤活性研究50-51
• 3.3 心臟病理切片觀察51-52
• 4 討論與小結52-54
• 全文總結54-56
• 后續(xù)工作與展望56-57
• 參考文獻57-64
• 攻讀碩士期間公開發(fā)表的論文64-65
• 縮略詞表65-67
• 致謝67-69

【相似文獻】

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李玲;cRGD修飾的載阿霉素酸敏感膠束的構建及抗腫瘤研究[D];蘇州大學;2015年

  本文關鍵詞：cRGD修飾的載阿霉素酸敏感膠束的構建及抗腫瘤研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：255201