本文關(guān)鍵詞：基于微型光譜儀戰(zhàn)地急救生化試劑的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】： 目的: 為適應(yīng)高科技局部戰(zhàn)爭條件下對戰(zhàn)地傷員(休克、出血、感染、多器官衰竭等重傷比例相應(yīng)的增加)的救治保障需要,滿足野戰(zhàn)環(huán)境下急救設(shè)備便攜、機(jī)動的需求,擬研制一種基于低電壓啟動的微型光譜儀進(jìn)行檢測,并可在野戰(zhàn)條件下使用的生化檢測儀器及配套試劑。其檢測的指標(biāo)包括血紅蛋白、葡萄糖及血鉀、鈉、氯、二氧化碳,并將這幾項(xiàng)指標(biāo)組合在一起,形成急救生化的功能檢測單元,通過一次檢測獲得6項(xiàng)檢測結(jié)果。本研究重點(diǎn)在于對上述6種檢測試劑進(jìn)行方法改良與改進(jìn),使之能適用于微型光譜儀的檢測要求,同時對其同步檢測的可行性進(jìn)行探討,為簡化操作、縮短報(bào)告時間、適應(yīng)野外檢測創(chuàng)造條件,也為提高戰(zhàn)地急救能力提供技術(shù)支持。 方法: 1、為每項(xiàng)檢測指標(biāo)在微型光譜儀的檢測波長范圍內(nèi)(360nm～780nm)選擇一種合適的方法及試劑; 2、分別將選定的各項(xiàng)指標(biāo)液體檢測試劑制備為干試劑:對試劑干燥方式進(jìn)行選擇,同時對改善試劑外觀及性能的添加劑種類和濃度進(jìn)行篩選; 3.將制備好的干試劑通過調(diào)整試劑樣品稀釋比、檢測時間以及對顯色劑進(jìn)行調(diào)整替換,進(jìn)行干試劑成分及測定方法的改進(jìn); 4、初步觀察各項(xiàng)指標(biāo)檢測試劑的性能:對干試劑的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、穩(wěn)定性進(jìn)行初步評價(jià)。 5、將六項(xiàng)指標(biāo)檢測試劑同步凍干于自制檢測杯中,在微型光譜儀上進(jìn)行整體檢測的初步應(yīng)用,同時對檢測試劑性能進(jìn)行再評價(jià),對測定結(jié)果采用SPSS 11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理。 6、對儀器的溫控系統(tǒng)及磁力混勻系統(tǒng)進(jìn)行使用評價(jià)。 主要結(jié)果: 1、血紅蛋白檢測試劑由高鐵氰化鉀,氰化鉀,離子表面活化劑等成分配置而成,并直接進(jìn)行凍干。制備后的干試劑具有良好的溶解性能,降低試劑樣品稀釋度為125:1,使凍干后試劑具有良好溶解性能,同時獲得較好的線性范圍。試劑準(zhǔn)確性實(shí)驗(yàn)偏倚系數(shù)為5.76%、試劑批內(nèi)變異系數(shù)為2.22%,批間變異系數(shù)均值為3.37%,試劑在3個月內(nèi)穩(wěn)定性能良好。 2、葡萄糖檢測試劑由酶試劑、0.5%的自制色原TBHBA、以及10g/L的添加劑白蛋白制備而成,增加試劑樣品稀釋倍數(shù)為200:1,使試劑縮短檢測時間為10min,且試劑準(zhǔn)確性實(shí)驗(yàn)偏倚系數(shù)為3.28%,試劑批內(nèi)變異系數(shù)為2.15%,批間變異系數(shù)均值為3.76%,試劑在3個月內(nèi)穩(wěn)定性能良好。 3、鉀離子檢測試劑由四苯硼鋰、蛋白水解酶、氫氧化鈉以及20g/L的添加劑木糖醇組成,制備好的干試劑保持了較好的溶解性能及反應(yīng)性能。試劑準(zhǔn)確性實(shí)驗(yàn)偏倚系數(shù)為4.13%,試劑批內(nèi)變異系數(shù)為2.98%,批間變異系數(shù)均值為4.06%,試劑在3個月內(nèi)穩(wěn)定性能良好。 4、鈉離子檢測試劑由β-半乳糖苷酶、O-硝基酚半乳糖苷、緩沖液等組成,分兩步進(jìn)行凍干。制備好的干試劑溶解性能良好,且試劑準(zhǔn)確性實(shí)驗(yàn)偏倚系數(shù)為2.79%,試劑批內(nèi)變異系數(shù)為2.10%,批間變異系數(shù)均值為4.34%,試劑在3個月內(nèi)穩(wěn)定性能良好。 5、氯離子檢測試劑由硫氰酸汞、硝酸鐵、硝酸汞等以及40g/L的添加劑右旋糖酐組成,將制備好的干試劑稀釋倍數(shù)調(diào)整為100:1,獲得了較好的檢測性能。試劑準(zhǔn)確性實(shí)驗(yàn)偏倚系數(shù)為3.05%,試劑批內(nèi)變異系數(shù)為2.10%,批間變異系數(shù)均值為3.15%,試劑在3個月內(nèi)穩(wěn)定性能良好。 6、二氧化碳檢測試劑由碳酸酐酶、指示劑及20g/L的添加劑聚乙二醇組成,制備好的干試劑準(zhǔn)確性實(shí)驗(yàn)偏倚系數(shù)為3.27%,試劑批內(nèi)變異系數(shù)為3.57%,批間變異系數(shù)均值為5.41%,試劑在3個月內(nèi)穩(wěn)定性能良好。 7、按照六項(xiàng)指標(biāo)檢測試劑的凍干方式,直接凍干于自制檢測杯中,使用統(tǒng)一的稀釋液,加樣后自動進(jìn)行磁力混勻及加熱,孵育后由系統(tǒng)在指定波長下進(jìn)行檢測,通過電腦微處理快速輸出報(bào)告。由檢測結(jié)果顯示,各指標(biāo)檢測試劑偏倚系數(shù)均在10%以內(nèi),除二氧化碳檢測試劑批間重復(fù)性(CV%)超出5%外,其余各項(xiàng)指標(biāo)檢測試劑批內(nèi)及批間重復(fù)性(CV%)均小于5%,且測定結(jié)果與干化學(xué)分析儀VITRO S-250相關(guān)性r≥0.97。 8、微型光譜儀空氣孵育系統(tǒng)在3min內(nèi)能夠達(dá)到試劑孵育所需的37℃,同時混勻系統(tǒng)92%的磁力攪拌子混勻狀態(tài)良好。 結(jié)論: 1、通過對血紅蛋白、葡萄糖及鉀、鈉、氯、二氧化碳,六種急救生化檢測試劑方法、成分的改進(jìn)與改良,研制出了適用于微型光譜儀的檢測干試劑。該試劑在三個月內(nèi)穩(wěn)定性能良好,測定結(jié)果準(zhǔn)確、可靠,能夠基本滿足臨床測定的要求,試劑便于保存和攜帶。 2、多項(xiàng)目急救生化指標(biāo)組合式檢測所形成的功能檢測單元,能夠通過一次檢測即可獲得6項(xiàng)測定結(jié)果,可為傷員的現(xiàn)場救治提供必要的檢驗(yàn)數(shù)據(jù),同時縮短了報(bào)告時間,為及時救治提供了保證。 3、低電壓啟動的微型光譜儀,采用干電池作動力,無需交流電能完成自動孵育及混勻,整套裝置具有良好的便攜性和機(jī)動性,能夠滿足戰(zhàn)場急救、現(xiàn)場快速檢驗(yàn)的需要。 4、微型離心機(jī)的配套研制,可為檢測標(biāo)本提供快速、有效的分離,同時儀器運(yùn)行使用干電池,實(shí)現(xiàn)了不受環(huán)境限制、進(jìn)行快速現(xiàn)場檢測的目的。 綜上所述,由實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)戰(zhàn)地急救生化試劑的性能是可靠的,其基于微型光譜儀進(jìn)行的同步檢測方法是可行的。整套檢測系統(tǒng)適于野戰(zhàn)環(huán)境,能夠滿足便攜、機(jī)動的戰(zhàn)地檢測需求,實(shí)現(xiàn)為戰(zhàn)地急救提供快速、可靠檢測數(shù)據(jù)的目的。
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2009
【分類號】：R82

【參考文獻(xiàn)】

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