本文關(guān)鍵詞：運(yùn)動疲勞經(jīng)20-HETE和PKC誘導(dǎo)心肌NADPH氧化酶和活性氧活性及細(xì)胞凋亡

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【摘要】：運(yùn)動疲勞是指機(jī)體無法在某一特定的水平維持或不能維持預(yù)設(shè)的運(yùn)動強(qiáng)度,心臟機(jī)能暫時(shí)性減弱的一種現(xiàn)象。20-羥二十烷四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acid,20-HETE)是細(xì)胞色素P450ω-羥化酶催化花生四烯酸生成的重要代謝產(chǎn)物,是一種有效的血管收縮劑。為了揭示大鼠心肌細(xì)胞在運(yùn)動疲勞后是否產(chǎn)生并釋放了內(nèi)源性物質(zhì)20-HETE,是否激活了PKC,并影響NADPH氧化酶衍生的ROS產(chǎn)物水平,誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡,本文通過游泳耐力訓(xùn)練的方式建立了運(yùn)動性疲勞大鼠模型,并將大鼠隨機(jī)分為四組：對照組,運(yùn)動疲勞組,運(yùn)動疲勞+20-HETE抑制劑HET0016組和運(yùn)動疲勞+PKC抑制劑白屈菜赤堿(CHE)組。 分別通過：1)使用組織NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測,發(fā)現(xiàn)疲勞組大鼠的NADPH氧化酶活性較對照組大鼠增強(qiáng)了177.77%；腹腔注射20-HETE抑制劑HET0016的運(yùn)動疲勞大鼠,其NADPH氧化酶活性較疲勞組減弱了24%,揭示了疲勞通過促進(jìn)20-HETE生成,增強(qiáng)了心肌細(xì)胞的氧化損傷；腹腔注射PKC抑制劑白屈菜赤堿的運(yùn)動疲勞大鼠,發(fā)現(xiàn)其NADPH氧化酶活性較疲勞組降低了52%,揭示了疲勞激活了PKC,加強(qiáng)了心肌細(xì)胞的氧化損傷。2)使用ROS熒光探針一二氫乙啶(Dihydroethidium,DHE),激光共聚焦軟件測定各組產(chǎn)生的紅色熒光,發(fā)現(xiàn)疲勞組大鼠的ROS活性較對照組大鼠增強(qiáng)了38.267%;腹腔注射20-HETE抑制劑HET0016的運(yùn)動疲勞大鼠,發(fā)現(xiàn)其ROS活性較疲勞組減弱了17.07%,揭示了疲勞通過促進(jìn)20-HETE生成,增強(qiáng)了心肌細(xì)胞的氧化損傷；腹腔注射PKC抑制劑白屈菜赤堿的運(yùn)動疲勞大鼠,發(fā)現(xiàn)其ROS活性較疲勞組降低了11.047%,揭示了疲勞激活了PKC,加強(qiáng)了心肌細(xì)胞的氧化損傷。3)通過caspase-3分光光度法檢測,發(fā)現(xiàn)與對照組相比,運(yùn)動疲勞激活了凋亡蛋白caspase-3的活性,并使其活性升高了76.7%,揭示了疲勞促進(jìn)了心肌細(xì)胞凋亡；對運(yùn)動疲勞+20-HETE抑制劑HET0016組,發(fā)現(xiàn)與運(yùn)動疲勞組相比,其caspase-3活性降低了24.1%,揭示了疲勞通過促進(jìn)20-HETE生成,增強(qiáng)了心肌細(xì)胞的凋亡；對疲勞+白屈菜赤堿組發(fā)現(xiàn),與運(yùn)動疲勞組相比,其caspase-3活性顯著降低了15.6%。揭示了疲勞激活了PKC,誘導(dǎo)了心肌細(xì)胞的凋亡。這些結(jié)果揭示了運(yùn)動疲勞促進(jìn)內(nèi)源性物質(zhì)20-HETE的生成與釋放,激活PKC,提升了NADPH氧化酶衍生的ROS產(chǎn)物水平,激活了凋亡蛋白caspase-3的活性,即誘導(dǎo)了心肌細(xì)胞凋亡。這為進(jìn)一步研究運(yùn)動疲勞對心臟的影響做出了理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：運(yùn)動疲勞 20-HETE PKC ROS NADPH氧化酶 caspase-3 心肌細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R87
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-7
• 目錄7-8
• 1 引言8-12
• 1.1 運(yùn)動疲勞對骨骼肌細(xì)胞過氧化和凋亡的影響8-9
• 1.2 運(yùn)動疲勞與心肌損傷及細(xì)胞凋亡9
• 1.3 20-HETE和PKC對心肌細(xì)胞過氧化及凋亡的影響9-10
• 1.4 凋亡蛋白CASPASE-3與心肌細(xì)胞凋亡10-12
• 2 材料和方法12-15
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料12-13
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)動物12
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器12
• 2.1.3 藥品與試劑12
• 2.1.4 主要試劑的配置12-13
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法13-15
• 2.2.1 分組與訓(xùn)練方案13
• 2.2.2 NADPH氧化酶活性檢測13
• 2.2.3 心肌細(xì)胞中ROS測定13-14
• 2.2.4 caspase-3活性測定14
• 2.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法14-15
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果15-18
• 3.1 運(yùn)動疲勞對心肌細(xì)胞NADPH氧化酶活性的影響15
• 3.2 運(yùn)動疲勞對心肌細(xì)胞ROS活性的影響15-16
• 3.3 運(yùn)動疲勞對心肌細(xì)胞CASPASE-3活性的影響16-18
• 4 討論18-21
• 結(jié)論21-22
• 創(chuàng)新點(diǎn)22-23
• 參考文獻(xiàn)23-26
• 致謝26

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：823749