本文關(guān)鍵詞：模擬微重力對肺炎克雷伯桿菌生物學(xué)特性影響的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:國內(nèi)外的大量研究結(jié)果已證實(shí),微重力環(huán)境可引起許多微生物一系列的生物學(xué)特性發(fā)生改變,包括細(xì)菌的生長繁殖以及代謝等。本實(shí)驗(yàn)初步研究肺炎克雷伯桿菌(Klebsiella pneumoniae,KPN)生長增殖、抗生素敏感性、表面形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)、蛋白質(zhì)表達(dá)和毒力基因表達(dá)在模擬微重力環(huán)境下的改變。方法:肺炎克雷伯桿菌ATCC13883在RCCS建立的模擬微重力模型中培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)在軸心與地面平行的旋轉(zhuǎn)瓶中,對照組培養(yǎng)在軸心與地面垂直的旋轉(zhuǎn)瓶中;使用分光光度計(jì)檢測菌株生長繁殖變化,應(yīng)用K-B紙片法和微量肉湯稀釋法檢測KPN培養(yǎng)至1d、3d、5d、7d、14d時抗生素的敏感性,在模擬微重力模型中連續(xù)培養(yǎng)14d后,使用掃描電鏡觀察KPN的表面形態(tài),透射電鏡觀察其超微結(jié)構(gòu),應(yīng)用表面增強(qiáng)激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜技術(shù)(SELDI-TOF-MS)檢測菌體的蛋白質(zhì)表達(dá)變化,利用Real-time PCR檢測4種毒力基因(wab G、ure A、fim H、uge)的表達(dá)改變。結(jié)果:模擬微重力環(huán)境下肺炎克雷伯桿菌的生長繁殖加快,最終的細(xì)菌總量增加,在培養(yǎng)至第14d時抗生素阿米卡星、哌拉西林、環(huán)丙沙星的抑菌環(huán)直徑較對照組減小;由掃描電鏡觀察結(jié)果可知,KPN形態(tài)發(fā)生改變,細(xì)長的菌體增多,透射電鏡結(jié)果表明超微結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,菌體胞質(zhì)內(nèi)顆粒狀物質(zhì)增多;和對照組相比較,蛋白質(zhì)譜檢測結(jié)果分析有18個蛋白質(zhì)表達(dá)發(fā)生了變化(P0.05),其中蛋白表達(dá)發(fā)生上調(diào)和下調(diào)的均為9個,由Real-time PCR結(jié)果表明,毒力基因wab G、ure A、fim H、uge相對表達(dá)量較對照組明顯下調(diào)。結(jié)論:模擬微重力使肺炎克雷伯桿菌生長繁殖能力增強(qiáng),連續(xù)培養(yǎng)至14d時對哌拉西林、環(huán)丙沙星、阿米卡星藥物敏感性降低,KPN的形態(tài)、超微結(jié)構(gòu)、蛋白表達(dá)、毒力基因表達(dá)也發(fā)生相應(yīng)變化。
【關(guān)鍵詞】：模擬微重力 肺炎克雷伯桿菌 抗生素 蛋白 基因
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R852.2
【目錄】：

• 中英文縮略詞對照表5-6
• 中文摘要6-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-12
• 第一部分 模擬微重力對肺炎克雷伯桿菌生長繁殖和藥敏影響12-19
• 1 引言12
• 2 材料與方法12-14
• 3 結(jié)果14-17
• 4 討論17-19
• 第二部分 模擬微重力對肺炎克雷伯桿菌蛋白和毒力基因表達(dá)影響19-33
• 1 引言19
• 2 材料與方法19-25
• 3 結(jié)果25-30
• 4 討論30-33
• 第三部分 模擬微重力對肺炎克雷伯桿菌形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)的影響33-39
• 1 引言33
• 2 材料與方法33-35
• 3 結(jié)果35-37
• 4 討論37-39
• 結(jié)論39-40
• 參考文獻(xiàn)40-44
• 附錄44-45
• 致謝45-46
• 綜述46-53
• 參考文獻(xiàn)51-53

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 孫藝鑄,戴琳;肺炎克雷伯桿菌致呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎12例報(bào)告[J];山東醫(yī)藥;2001年24期

2 張永龍,李家泰,趙鳴武;肺炎克雷伯桿菌β-內(nèi)酰胺酶的分子特性[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2002年04期

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本文編號：461055