本文關(guān)鍵詞：運動對大鼠生殖細(xì)胞凋亡及解偶聯(lián)蛋白2表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：本研究通過10周的60min、120min游泳訓(xùn)練,觀察長期不同運動量訓(xùn)練后大鼠睪丸組織UCP2的表達(dá)變化和運動對自由基代謝的影響,探討不同負(fù)荷游泳運動對大鼠生殖機(jī)能的影響及相關(guān)機(jī)理。 方法：隨機(jī)選取雄性SD大鼠24只,隨機(jī)分成安靜對照組(C組)、60min運動組(E60組)、120min運動組(E120組),每組8只。(1)C組不運動,正常飼養(yǎng)；(2)E60組和E120組大鼠采用無負(fù)重游泳訓(xùn)練共10周。實驗結(jié)束后,檢測血清SOD、MDA、NO指標(biāo)的變化,HE染色觀察睪丸組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu),用TUNEL法檢測睪丸生殖細(xì)胞凋亡,流式細(xì)胞儀檢測精子凋亡百分比,PCR檢測Cyt C及UCP2mRNA表達(dá)變化。 結(jié)果：1.訓(xùn)練前各組大鼠間體重差異不顯著,經(jīng)過10周的訓(xùn)練后,兩組大鼠體重都極顯著低于對照組,但增長率僅有E120組極顯著低于對照組,E60組的增長率與c組差異不顯著,E120組與E60組之間差異也不顯著。2.HE染色觀察到C組大鼠睪丸生精小管正常,E60組間隙變寬,管中可見成熟精子,E120組睪丸生精上皮破壞,支持細(xì)胞間緊密連接明顯消失。TUNEL檢測發(fā)現(xiàn),E120組凋亡明顯高于C組、E60組。3.精子總數(shù)E120組顯著低于C組,E60組與C組、E120組無顯著性差異,精子畸形率E120組顯著高于C組和E60組,精子活動率各組間無顯著性差異。4.GnRH濃度E60組顯著高于C組,E120組顯著低于對照組,極顯著低于E60組。FSH、LH、血清T濃度,E60組極顯著高于對照組,E120組顯著低于對照組,極顯著低于E60組。組織中的T濃度,E120組顯著低于C組。5.大鼠血清中SOD活性,E60組顯著高于C組,E120組極顯著低于C組和E60組。MDA濃度,E60組顯著低于C組,E120組極顯著高于C組和E60組。NO濃度,E60組顯著高于C組,E120組極顯著高于C組,顯著高于E60組。6.Cyt C基因在睪丸組織中,E60組顯著低于C組,E120組極顯著高于C組和E60組。UCP2基因在睪丸組織中E120組極顯著高于c組,顯著高于E60組。 結(jié)論：1.長時間大運動量運動比有氧運動睪丸生殖細(xì)胞凋亡率增加,提示生殖細(xì)胞凋亡增加可能是大運動量運動使生殖功能下降的生理機(jī)制；2.長期的適宜的強(qiáng)度引起抗氧化酶的適應(yīng)性改變,提高了機(jī)體的抗氧化能力,也有利于機(jī)體功能的改善；3.大運動量運動上調(diào)UCP2參與調(diào)控活性氧,并保護(hù)機(jī)體免受細(xì)胞活性氧的氧化損傷,從而減少細(xì)胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】：運動 生殖機(jī)能 細(xì)胞凋亡 UCP2 Cyt C
【學(xué)位授予單位】：揚州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：G804.7;R87
【目錄】：

• 中文摘要2-3
• Abstract3-8
• 縮語表8-9
• 一、文獻(xiàn)綜述9-21
• 1. 概述9
• 2 解偶聯(lián)蛋白2(UNCOUPLINGPROTEIN2,UCP2)的研究進(jìn)展9-11
• 2.1 UCP2的結(jié)構(gòu)與分布9
• 2.2 UCP2的功能與調(diào)節(jié)9-10
• 2.3 UCP2與細(xì)胞凋亡10-11
• 2.4 運動對UCP2的影響11
• 3 細(xì)胞色素C(CYT C)概述11-13
• 3.1 Cyt C的結(jié)構(gòu)與分布11-12
• 3.2 Cyt C的功能與調(diào)節(jié)12
• 3.3 Cyt C與細(xì)胞凋亡12
• 3.4 運動對Cyt C的影響12-13
• 4 運動與生殖機(jī)能13-16
• 4.1 性激素與生殖機(jī)能13-14
• 4.1.1 促性腺激素釋放激素(GnRH)13
• 4.1.2 黃體生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)13-14
• 4.1.3 睪酮(T)14
• 4.2 運動對性激素調(diào)節(jié)的影響14-16
• 4.2.1 運動與GnRH14-15
• 4.2.2 運動與LH、FSH15
• 4.2.3 運動與T15-16
• 4.3 運動對生殖機(jī)能的影響16
• 5. 精子細(xì)胞凋亡與生殖機(jī)能16-19
• 5.1 細(xì)胞凋亡概述16-17
• 5.2 精子細(xì)胞凋亡與生殖機(jī)能17
• 5.3 精子細(xì)胞凋亡的發(fā)生機(jī)理17-18
• 5.4 運動對細(xì)胞凋亡的影響18-19
• 5.4.1 中小強(qiáng)度有氧運動下的細(xì)胞凋亡18
• 5.4.2 大強(qiáng)度運動下的細(xì)胞凋亡18-19
• 6 研究展望19-21
• 二、實驗部分21-39
• 1. 實驗材料與方法21-26
• 1.1 實驗對象21
• 1.2 實驗分組21
• 1.3 運動環(huán)境及運動量的控制21
• 1.4 實驗取材和樣本處理21-22
• 1.4.1 血清制備21
• 1.4.2 睪丸勻漿制備21-22
• 1.4.3 精子懸液制備22
• 1.5 指標(biāo)檢測22-25
• 1.5.1 血液指標(biāo)的測定22
• 1.5.2 睪丸組織指標(biāo)的測定22
• 1.5.3 精子活率的測定22
• 1.5.4 精子畸形率22
• 1.5.5 精子計數(shù)22-23
• 1.5.6 睪丸組織HE染色23
• 1.5.7 原位缺口末端標(biāo)記法檢測生精細(xì)胞凋亡23
• 1.5.8 Annexin V/PI染色結(jié)合流式細(xì)胞技術(shù)檢測精子凋亡的測定23-24
• 1.5.9 大鼠睪丸組織Cyt C、UcP2mRNA表達(dá)檢測24-25
• 1.5.9.1 組織總RNA的提取24
• 1.5.9.2 RNA甲醛變性電泳檢測24-25
• 1.5.9.3 cDNA的合成25
• 1.5.9.4 熒光定量引物設(shè)計與合成25
• 1.5.9.5 RT-PCR反應(yīng)25
• 1.6 主要儀器及試劑25-26
• 1.7 數(shù)據(jù)處理26
• 2. 實驗結(jié)果26-35
• 2.1 實驗大鼠行為表現(xiàn)26
• 2.2 實驗大鼠體重26-27
• 2.3 實驗大鼠精子質(zhì)量27-28
• 2.4 實驗大鼠睪丸組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)28
• 2.5 實驗大鼠生殖細(xì)胞凋亡28-31
• 2.5.1 原位缺口末端標(biāo)記法檢測生精細(xì)胞凋亡28-29
• 2.5.2 流式細(xì)胞技術(shù)檢測精子凋亡29-31
• 2.6 實驗大鼠血清GnRH、FSH、LH含量31
• 2.7 實驗大鼠睪丸組織、血清T含量31-32
• 2.8 實驗大鼠血清SOD活性和MDA、NO含量32-33
• 2.9 大鼠睪丸組織中Cyt C和UCP2的表達(dá)33-35
• 2.9.1 RNA提取結(jié)果33
• 2.9.2 熒光定量PCR的擴(kuò)增曲線和熔解曲線33-34
• 2.9.3 目的基因在睪丸中表達(dá)量分析34-35
• 3. 討論35-38
• 3.1 不同負(fù)荷運動對大鼠睪丸組織形態(tài)結(jié)構(gòu)及精子活力等影響35
• 3.2 不同負(fù)荷運動對大鼠精子凋亡的影響35-36
• 3.3 不同負(fù)荷運動對性激素調(diào)節(jié)的影響36
• 3.4 不同負(fù)荷運動對抗氧化能力的影響36-37
• 3.5 不同負(fù)荷運動對UCP及Cyt C表達(dá)的影響37-38
• 3.6 不同負(fù)荷運動影響大鼠生殖機(jī)能及精子細(xì)胞凋亡的相關(guān)機(jī)理38
• 4. 結(jié)論38-39
• 參考文獻(xiàn)39-44
• 致謝44-45
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文45-46

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：運動對大鼠生殖細(xì)胞凋亡及解偶聯(lián)蛋白2表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：397704