第一部分γ-H2AX:體內(nèi)精確分析DNA雙鏈斷裂及修復(fù)的指標(biāo) 目的:DNA雙鏈斷裂(DSB)是最嚴(yán)重的DNA損傷形式,DSB修復(fù)缺陷會(huì)導(dǎo)致放射敏感性的顯著增加。臨床劑量放射治療后,不同的組織顯示出不同的放射反應(yīng),可能與其內(nèi)在的放射敏感性相關(guān),而關(guān)于體內(nèi)各組織DSB修復(fù)的差異研究少見。電離輻射后,組蛋白H2AX在DSB處迅速磷酸化形成γ-H2AX焦點(diǎn),已經(jīng)證實(shí)γ-H2AX焦點(diǎn)可以作為體外分析DSB形成和修復(fù)的指標(biāo),在本研究中,我們觀察不同放射敏感性小鼠系照射后γ-H2AX是否能反應(yīng)體內(nèi)各組織的DSB形成和修復(fù)的狀況,從而為預(yù)測臨床放射敏感性提供精確和可靠的指標(biāo);以及體內(nèi)不同組織其放射敏感性差別的存在是否與DSB修復(fù)在差異有關(guān)。 方法:照射誘導(dǎo)DSB形成試驗(yàn),C57BL/6鼠行0.1 Gy,0.5 Gy和1.0 Gy全身照射后10分鐘,收集正常組織(腦,肺,小腸和心臟)進(jìn)行分析;DSB修復(fù)試驗(yàn),修復(fù)正常鼠(C57BL/6)和修復(fù)缺陷鼠(BALB/c,A-T和SCID小鼠)在全身照射2Gy后0.5,2.5,5,24和48 h分析正常組織(腦,肺,小腸和心臟)。未照射的各系小鼠作為對照組。γ-...

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1DSB的信號傳導(dǎo)系統(tǒng)

圖1DSB的信號傳導(dǎo)系統(tǒng)2DSB修復(fù)途徑DNADSB啟動(dòng)一系列的信號級聯(lián)反應(yīng)分析和修復(fù)斷裂的DSB，DSB主要有兩條修復(fù)途徑:同源重組(homologousrecombination，HR)和非同源末端連接(non一homologousend一oining，NHEJ)(圖2)。這....

圖2DSB修復(fù)的兩條主要途徑:NHEJ和HRo

3DNADSB觸發(fā)的細(xì)胞內(nèi)信號反應(yīng)迅速的DSB信號傳導(dǎo)反應(yīng)已經(jīng)很詳細(xì)的描敘，包括一系列的轉(zhuǎn)錄后修飾(圖3)。3.1.Y一HZAXDNADSB信號傳導(dǎo)中較早期事件是組蛋白HZAX在絲氨酸139的磷酸化形成Y一HZAx【”，’“]，它可以使DNA損傷反應(yīng)因子聚集在DNA損傷的部位「’....

圖3DSB應(yīng)答系統(tǒng)

華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文點(diǎn)，這些點(diǎn)狀的物質(zhì)稱為“foci’，，并有研究表明Y一HZAX分子聚集形成一個(gè)斑點(diǎn)即表有一個(gè)DsB產(chǎn)生[8]。磷脂酞肌醇一3激酶相關(guān)的激酶家族(phosphatidylin。Sitol3一kinarelatedkinase，PIKK)在DNA損傷信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)....

圖4小膠質(zhì)細(xì)胞的靜息狀態(tài)(a)fl了激活狀態(tài)(b)

華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文胞的突起活動(dòng)極其活躍，巡戈全腦區(qū)域，以此感知任何內(nèi)環(huán)境的改變144〕。小膠質(zhì)細(xì)胞的狀態(tài)與神經(jīng)發(fā)生有密切的關(guān)系，靜止?fàn)顟B(tài)的小膠質(zhì)細(xì)胞是維持經(jīng)發(fā)生的基礎(chǔ)哪]。有研究表明，離體(in飛，itr。)受照射的神經(jīng)祖細(xì)胞可分化而在體內(nèi)(i。;ivo)實(shí)驗(yàn)的情況卻不然，....

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