一次性力竭運(yùn)動對大鼠大腦皮質(zhì)線粒融合分裂基因表達(dá)的影響
本文關(guān)鍵詞:一次性力竭運(yùn)動對大鼠大腦皮質(zhì)線粒融合分裂基因表達(dá)的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:研究目的:通過研究力竭運(yùn)動后大鼠大腦皮質(zhì)的線粒體融合蛋白Mfn-1和分裂蛋白Drp-1的基因表達(dá)的變化,及其與細(xì)胞凋亡之間存在的關(guān)系。對力竭運(yùn)動導(dǎo)致大腦皮質(zhì)細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制進(jìn)行初步的探討。研究方法:選取180~220g的成年雄性大鼠40只,隨機(jī)將大鼠分為5個組即:空白組、運(yùn)動后即刻組、運(yùn)動后12小時組、運(yùn)動后24小時組、運(yùn)動后48小時組并建立模型?瞻捉M未進(jìn)行任何干預(yù)處理,力竭運(yùn)動后即刻取材的為運(yùn)動后即刻組,力竭運(yùn)動后12小時、24小時、48小時取材的分別為運(yùn)動后12小時組、運(yùn)動后24小時組、運(yùn)動后48小時組。用免疫組化觀察各組大腦皮質(zhì)細(xì)胞中凋亡基因Bax和Caspase-3的表達(dá);用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)觀察大腦皮質(zhì)細(xì)胞Mfn-1和Drp-1的mRNA表達(dá)量;采用Western blot方法觀察大腦皮質(zhì)細(xì)胞Mfn-1和Drp-1的蛋白表達(dá)情況。研究結(jié)果:(1)免疫組化:一次性力竭游泳運(yùn)動后引起凋亡調(diào)控基因Bax和Caspase-3表達(dá)上升,Bax,Caspase-3蛋白陽性率表達(dá)水平:空白組蛋白表達(dá)水平與其他各組有明顯差異(P<0.01);運(yùn)動后即刻組蛋白表達(dá)水平增高,與其他各組有顯著差異(P<0.01);運(yùn)動后12小時蛋白表達(dá)水平最高與其他各組有顯著差異(P<0.01);運(yùn)動后24小時蛋白表達(dá)水平降低,與其他各組與各組有顯著差異(P<0.01);運(yùn)動后48小時蛋白表達(dá)水平降低但比空白組高,與其他各組有顯著差異(P<0.01);各組數(shù)據(jù)有統(tǒng)計學(xué)意義。 (2)RT-PCR:一次性力竭游泳運(yùn)動后大鼠大腦皮質(zhì)線粒體Drp-1、Mfn-1mRNA表達(dá)量同免疫組化結(jié)果呈上升趨勢?瞻捉MDrp-1,Mfn-1mRNA表達(dá)量與其他各組有明顯差異(P<0.01);運(yùn)動后即刻組表達(dá)量開始增加,與其他各組有顯著差異(P<0.01);運(yùn)動后12小時表達(dá)量逐漸增加,與其他各組有顯著差異(P<0.01);運(yùn)動后24小時表達(dá)量最高,與其他各組與各組有顯著差異(P<0.01);運(yùn)動后48小時表達(dá)量降低但高于空白組,與其他各組有顯著性差異(P<0.01)。 (3) Western Blot: Drp-1基因蛋白表達(dá)量在空白組中表達(dá)量最低與其他各組間有顯著性差異(P<0.01);運(yùn)動后即刻組和運(yùn)動后12小時中的Drp-1基因蛋白表達(dá)水平增高,兩組間無顯著性差異(P>0.01),與其他各組有顯著性差異(P<0.01);運(yùn)動后24小時與運(yùn)動后48小時組中Drp-1基因蛋白表達(dá)水平增高,兩組間無明顯差異(P>0.01),與其他各組有顯著性差異(P<0.01)。Mfn-1基因蛋白表達(dá)量在空白組中表達(dá)量與運(yùn)動后即刻組基因蛋白表達(dá)水平兩組間無顯著性差異(P>0.01),與其他各組有顯著性差異(P<0.01);運(yùn)動后12小時與運(yùn)動24小時組基因蛋白表達(dá)水平增高,兩組間無顯著性差異(P>0.01);與其他各組有顯著性差異(P<0.01);運(yùn)動后48基因蛋白表達(dá)水平最高,與其他各組有顯著性差異(P<0.01)。研究結(jié)論:一次性力竭運(yùn)動后大鼠皮質(zhì)細(xì)胞線粒體融合分裂基因表達(dá)改變與細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)一致,力竭運(yùn)動可能是改變線粒體融合分裂基因的表達(dá)影響細(xì)胞凋亡。
【關(guān)鍵詞】:一次性力竭運(yùn)動 大腦皮質(zhì) 線粒體融合分裂 Drp-1 Mfn-1 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】:成都體育學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R87
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-10
- 1 前言10-11
- 2 文獻(xiàn)綜述11-19
- 2.1 運(yùn)動中樞性疲勞11-13
- 2.1.1 大腦皮質(zhì)與運(yùn)動性中樞疲勞11-12
- 2.1.2 線粒體與運(yùn)動性中樞疲勞12-13
- 2.2 運(yùn)動對線粒體的影響13-14
- 2.2.1 線粒體的作用、功能13
- 2.2.2 線粒體的形態(tài)、結(jié)構(gòu)13
- 2.2.3 運(yùn)動對線粒體的影響13-14
- 2.3 線粒體的融合與分裂14-16
- 2.4 線粒體調(diào)控基因16
- 2.4.1 Drp-1 的結(jié)構(gòu)、功能、作用16
- 2.4.2 Mfn-1 的結(jié)構(gòu)、功能、作用16
- 2.5 細(xì)胞凋亡16-19
- 2.5.1 運(yùn)動與細(xì)胞凋亡17
- 2.5.2 線粒體與細(xì)胞凋亡17-18
- 2.5.3 Bax,Caspase-3 凋亡基因18
- 2.5.4 線粒體融合分裂與細(xì)胞凋亡18-19
- 2.6 運(yùn)動對 Mfn-1、Drp-1 的影響19
- 3 研究方法19-26
- 3.1 實(shí)驗(yàn)材料19-21
- 3.1.1 實(shí)驗(yàn)動物19-20
- 3.1.2 實(shí)驗(yàn)主要儀器20-21
- 3.2 實(shí)驗(yàn)方法21-26
- 3.2.1 實(shí)驗(yàn)動物模型建立與分組21-22
- 3.2.2 實(shí)驗(yàn)取材與固定22
- 3.2.3 測試指標(biāo)22
- 3.2.4 免疫組化的檢測步驟及方法22-23
- 3.2.5 熒光定量 PCR 的檢測方法及步驟23-24
- 3.2.6 Western Blot 的檢測方法及步驟24-26
- 3.3 統(tǒng)計學(xué)分析26
- 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-37
- 4.1 免疫組化結(jié)果26-30
- 4.2 熒光定量 PCR 的結(jié)果30-32
- 4.2.1 RNA 提取后電泳鑒定結(jié)果30-31
- 4.2.2 熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)特異性結(jié)果31-32
- 4.3 Mfn-1,Drp-1 RT-PCR 結(jié)果32-33
- 4.4 Mfn-1 ,Drp-1 Western Blot 結(jié)果33-37
- 5 討論37-41
- 5.1 力竭運(yùn)動與大腦細(xì)胞凋亡37-38
- 5.2 線粒體與細(xì)胞凋亡38-40
- 5.3 力竭運(yùn)動對大腦皮質(zhì)線粒體影響40
- 5.4 運(yùn)動對線粒體融合分裂基因影響40-41
- 6 結(jié)論41-42
- 7 參考文獻(xiàn)42-47
- 致謝47-48
- 在讀期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果48-49
- 附件49-50
【參考文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:一次性力竭運(yùn)動對大鼠大腦皮質(zhì)線粒融合分裂基因表達(dá)的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
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