本文關(guān)鍵詞：痕量DNA中基于單核苷酸多態(tài)性的ABO血型檢測技術(shù)的改進(jìn)和應(yīng)用，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：痕量檢材是法醫(yī)學(xué)面臨的難題之一,如何從痕量檢材中獲得更多的信息一直是法醫(yī)學(xué)工作努力的方向。隨著全基因擴(kuò)增技術(shù)的出現(xiàn)和單細(xì)胞測序技術(shù)的發(fā)展,痕量檢材的難題得到了有效解決。ABO血型作為人類重要的遺傳表型已在法醫(yī)學(xué)檢測中被廣泛使用,傳統(tǒng)的血清學(xué)能夠得到準(zhǔn)確的分型結(jié)果,以ABO基因中突變位點(diǎn)為技術(shù)基礎(chǔ)的血型DNA檢測方法也得到長足發(fā)展。兩種技術(shù)的結(jié)合,不僅能夠解決痕量檢材的難題,而且能夠得到與表型相關(guān)的信息,為警方搜索犯罪嫌疑人提供一定的幫助。 通過遺傳標(biāo)記進(jìn)行的身份認(rèn)證常常用于偵破案件、司法審判及法醫(yī)親子鑒定中。在大多數(shù)法醫(yī)DNA檢驗的實際案件中,所得到的現(xiàn)場檢材往往很多都已腐敗,甚至是高度腐敗,在此類法醫(yī)學(xué)檢材中DNA分子受到損害,DNA鏈發(fā)生斷裂,使DNA分子的完整性受到極大破壞。隨著司法實踐的不斷深入,對物證證據(jù)要求不斷提高,需要DNA檢驗提供更多的信息。應(yīng)用經(jīng)典的STRs分型會出現(xiàn)基因漏擴(kuò)或優(yōu)勢擴(kuò)增等現(xiàn)象,影響最終的分型結(jié)果,從而給法醫(yī)學(xué)實際應(yīng)用帶來極大的困難。 單核苷酸多態(tài)性(Single Nucleotide Polymorphism, SNP)作為第三代遺傳標(biāo)記具有分布廣泛、突變率低、遺傳穩(wěn)定及易于自動化的高通量快速檢測分析的特點(diǎn),同時,因其擴(kuò)增片段長度短、不存在復(fù)制滑動而利于腐敗降解、痕量檢材的檢測,使得SNPs在法醫(yī)學(xué)領(lǐng)域獲得了越來越廣泛的重視。遺傳學(xué)家與人類學(xué)家通力合作,從人類進(jìn)化歷程、遷徙歷史等角度出發(fā),結(jié)合基因組測序及全基因組關(guān)聯(lián)分析技術(shù),對人體色素沉積、顱面發(fā)育等與人類表型相關(guān)的遺傳突變進(jìn)行了深入研究,構(gòu)建起用于預(yù)測嫌疑人基本特征的個體識別體系。隨著身份認(rèn)證及表型相關(guān)的SNPs技術(shù)體系的構(gòu)建,法醫(yī)物證學(xué)中一個“DNA智能化”的新時代正在拉開序幕。 本論文采用實驗室自主研發(fā)的汗?jié)撝讣y提取液(No.200810233535.8)對痕量指紋脫落上皮細(xì)胞進(jìn)行提取,使用全基因組擴(kuò)增(Whole Genome Amplification, WGA)技術(shù)對痕量DNA進(jìn)行擴(kuò)增,并結(jié)合SNaPshot技術(shù)對與ABO血型相關(guān)的6個SNPs位點(diǎn)進(jìn)行檢測,進(jìn)而對ABO血型進(jìn)行分型。首先,將SNaPshot檢測ABO血型方法應(yīng)用到在痕量DNA中,并結(jié)合實驗實際對方法進(jìn)行了優(yōu)化與調(diào)整。隨后,收集到48份指紋上皮脫落細(xì)胞,同時采集口腔拭子作為陽性對照,使用優(yōu)化后的ABO血型檢測方法對48份樣品進(jìn)行檢測,全部48份指紋上皮脫落細(xì)胞均得到檢出,47份口腔拭子得到檢出(第32號樣品的口腔拭子由于操作失誤在處理過程中損失)。檢出的47份結(jié)果能夠完全匹配。同時,基因型分型的結(jié)果與血清學(xué)結(jié)果一致。優(yōu)化后的ABO血型檢測方法能夠在痕量DNA中實現(xiàn)有效檢出,對于某些案件的偵破提供一種可行的方法。
【關(guān)鍵詞】：單核苷酸多態(tài)性 痕量檢材 表型預(yù)測 ABO血型分型
【學(xué)位授予單位】：昆明理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：D919.4
【目錄】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 第一章 研究背景11-31
• 1.1 SNPs與困難法醫(yī)學(xué)檢材12-15
• 1.1.1 法醫(yī)學(xué)中的SNPs分型技術(shù)12-13
• 1.1.2 法醫(yī)學(xué)中的困難檢材13-15
• 1.2 SNPs與法醫(yī)學(xué)個體識別15-17
• 1.3 SNPs與法醫(yī)學(xué)表型推斷與預(yù)測17-29
• 1.3.1 ABO血型相關(guān)SNPs17-20
• 1.3.2 人體色素沉積相關(guān)SNPs20-23
• 1.3.3 易感基因相關(guān)SNPs23-26
• 1.3.4 顱面發(fā)育相關(guān)SNPs26-29
• 1.4 研究意義29-31
• 第二章 在痕量DNA中SNaPshot檢測ABO血型方法的構(gòu)建與優(yōu)化31-53
• 2.1 材料和方法33-44
• 2.2 實驗結(jié)果44-49
• 2.3 實驗討論49-53
• 第三章 在痕量DNA中SNaPshot檢測ABO血型方法的應(yīng)用評估53-70
• 3.1 材料與方法53-54
• 3.2 實驗結(jié)果54-68
• 3.3 實驗討論68-70
• 第四章 總結(jié)與展望70-71
• 致謝71-72
• 參考文獻(xiàn)72-77
• 附錄A 攻讀碩士期間發(fā)表論文情況77

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 何柏芳;吳銀寶;李進(jìn);陳慧;楊慶恩;黃代新;;基于通用報告引物的5個Y-SNP復(fù)合擴(kuò)增及其單倍型[J];法醫(yī)學(xué)雜志;2010年01期

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  本文關(guān)鍵詞：痕量DNA中基于單核苷酸多態(tài)性的ABO血型檢測技術(shù)的改進(jìn)和應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：375525